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《醫(yī)學(xué)畢業(yè)論文診斷劑量彩超對胎鼠腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、XX大學(xué)畢業(yè)論文診斷劑量彩超對胎鼠腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響2014年6月25日診斷劑量彩超對胎鼠腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響作者：段云友程顏苓曹鐵主出蓉【關(guān)鍵詞】彩色多普勒超聲關(guān)鍵詞：彩色多普勒超聲;胎鼠;神經(jīng)細(xì)胞;凋亡0引言二維超聲照射與動物器官組織凋亡的研究已有報道[1],但彩色多普勒超聲(彩超)對胚胎器官凋廣的研究未見報道，我們用診斷劑量彩超照射宮內(nèi)胎鼠，探討其對胎鼠中樞神經(jīng)元凋亡的影響.1材料和方法健康成熟雌性大鼠20只，受孕笫18日接受超聲照射(美國Acuson公司Sequoia512型彩色超聲診斷儀，探頭頻率3.5MHz,),按照射時間隨機(jī)
2、分為4組,Omin(對照組)>lOmin,20min及30min,每組5只.對照組進(jìn)行假照射,其余條件一律相同.輻照后24h剖宮取胎，斷頭取腦組織固定，常規(guī)石蠟包埋連續(xù)冠狀切片?在光鏡檢查的取材部位取皮質(zhì)，于20mLL-l戊二醛屮4°C固定，常規(guī)包埋,切片，染色，采用JIM-2000型透射電鏡觀察攝片.使用中國BOSTER公司提供TUNEL試劑盒染色.2結(jié)果2」TUNEL標(biāo)記結(jié)果對照組及彩超照射lOmin組，胎鼠腦組織中凋亡的神經(jīng)元極少見，凋廣細(xì)胞百分率分別為(0.9+0.51)%和(1.4+0.40)%,兩者Z間無顯著性差異(P0.01)
3、;持續(xù)照射20min,腦皮質(zhì)表面的凋亡細(xì)胞百分率明顯增多達(dá)(6.1+0.38)%,與對照組及10min組有顯著性差異(P0.01)?照射時間延長至30min,凋亡細(xì)胞百分率繼續(xù)增加(8.3±0.44)%),與對照組、10min組及20min組均有顯著性差杲(P0.01).TUNEL陰性對照組無陽性細(xì)胞.2.2電鏡觀察結(jié)杲照射30min組胎鼠腦神經(jīng)元體積縮小，胞質(zhì)內(nèi)有大量空泡，線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等基本止常，結(jié)構(gòu)完整清晰，細(xì)胞核呈高電了密度，染色體向核膜靠攏聚集成塊狀或環(huán)狀.3討論細(xì)胞凋亡是一種不同于細(xì)胞死亡的形態(tài)學(xué)改變，涉及到生命活動的
4、許多領(lǐng)域，目前己被認(rèn)為是神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中的正常事件，并在神經(jīng)系統(tǒng)的成熟或疾病中可能冇重要意義[2].多種因素可誘導(dǎo)胎鼠神經(jīng)元凋廣[3]?我們利用彩超輻照孕18d的大鼠，24h后觀察胎鼠腦組織，發(fā)現(xiàn)照射20min以上可誘導(dǎo)皮層神經(jīng)元發(fā)生凋亡，并且隨輻照時間的延長，TUNEL標(biāo)記的陽性細(xì)胞數(shù)增多，說明診斷劑量的彩超照射一定吋間后可誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡.TUNEL技術(shù)是根據(jù)凋廣細(xì)胞核內(nèi)DNA被切割后，裸露出游離的3'末端，應(yīng)用末端轉(zhuǎn)移酶將經(jīng)生物素標(biāo)記的dUTP連接到3'末端的原理，作為識別凋亡細(xì)胞的標(biāo)志[4]?出于它會對一些細(xì)胞核出現(xiàn)非特異性標(biāo)記，因而
5、形態(tài)學(xué)觀察仍是迄今為止判斷凋亡最經(jīng)典、最可靠的方法[5].我們利用TUNEL技術(shù)檢測到彩超誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡集中于皮層，選取皮層細(xì)胞進(jìn)行電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)了典型的凋廣細(xì)胞改變，證實(shí)了彩超照射20min以上確實(shí)能誘導(dǎo)皮層神經(jīng)元發(fā)生凋廣.人腦的發(fā)育從最初形成到逐漸成熟要經(jīng)過神經(jīng)元的增生、分化、遷移、死亡等一系列過程，嚴(yán)格按照細(xì)胞內(nèi)固有的程序和外界環(huán)境各因素相互協(xié)調(diào)，從而形成其穩(wěn)定的精細(xì)結(jié)構(gòu)和功能，一旦受到干擾，就有可能引起結(jié)構(gòu)紊亂和功能障礙?胎齡16?18d的鼠腦細(xì)胞正處于遷移階段，對電離輻射具冇較高的敏感性[6].木實(shí)驗(yàn)證實(shí)此期對超聲照射亦較敬感.
6、雖然R前對大腦發(fā)育中的遷移延遲與生物體發(fā)育畸形間的關(guān)系尚無直接證據(jù)，但據(jù)推測二者冇一定的內(nèi)在聯(lián)系?實(shí)驗(yàn)及流行病學(xué)調(diào)查表明孕期接受超聲照射，仔鼠的神經(jīng)行為能力下降.這些現(xiàn)象與神經(jīng)元遷移階段受損有無關(guān)系，是否與細(xì)胞凋亡有關(guān)詢需深入研究.參考文獻(xiàn)：[1]杜聯(lián)芳，張青萍，劉累彭.診斷超聲與大鼠角膜細(xì)胞凋亡[J]?中國超聲醫(yī)學(xué)雜志,2000;16(9):645-647.[1]SastryPS,RaoKS.Apoptosisandnervoussystem[J].JNeu-rochem,2000;74(1):l-20.[2]HossainMM,Naka
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