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1、臨床生化檢驗常用的分析技術:光譜技術、電泳技術、電化學分析技術、離子層析分離技術、分子生物學技術臨床生化檢驗常用的分析技術光譜分析技術:在一定條件下,相同物質的發(fā)射和吸收光譜與該物質呈正比,因此可對該物質進行定性、定量分析。光譜分析技術光譜分析技術分類:發(fā)射光譜(火焰、熒光、原子發(fā)射光譜法)、吸收光譜(紫外、可見、原子吸收分光光度法、透射比濁法)、光譜分析技術分類散射光譜(散射比濁法)比色杯:由無色透明,耐腐蝕,耐酸堿的玻璃或石英組成比色杯玻璃杯:可見光;石英杯石英杯:紫外光玻璃杯石英杯光徑10cm,常用為常用為:1.0cm光徑分光
2、光度計的光源:可見光紫外光:宛燈,波長200-340nm分光光度計的光源可見光:鶴燈波長360-1000nm;紫外光可見光紫外光常用抗凝劑:常用抗凝劑:草酸鉀一氟化鈉:是-血糖測定標本常用的抗凝劑,25°C可穩(wěn)定24小時,4°C可穩(wěn)定48小時肝素:常用于血氣分析和部分生化項日的測定lg/L的肝素溶液0.5ml可抗凝5ml血液EDTA:適用于一般血液學檢測枸椽酸鈉:淺藍(濃度3.2%?3.8%比例1:9適用于凝血)黑色(濃度3.2%比例1:4適用于血沉)防腐劑:濃鹽酸:0.5-lml濃鹽酸/100ml尿液,適用于24小時兒茶酚胺、秀草
3、扁桃酸、17■疑皮質類固醇、17■酮類固醇等檢測防腐劑甲苯:丿永液表血形成薄膜,防止細菌繁殖。l?2ml/100ml丿永液,適用于肌酹、尿糖、蛋口質、丙酮等生化項目測定冰醋酸:5-10ml/24小時尿,適用于尿醛固酮測定麝香草酚:抑制細菌生長,適用于鉀、鈉、氯、鈣、氨基酸、糖、尿膽原、膽紅素的測定特殊標本采集:臨床醫(yī)生采3個于無菌試管中,第一個做細菌檢查細菌檢查,第二個做生化檢查生化檢查,第三個做細胞計數(shù)特殊標本采集細菌檢杳生化檢查細胞計數(shù)恒定系統(tǒng)課売與被測物質濃度無關,與干擾物濃度相關;比例系統(tǒng)誤差比例系統(tǒng)謀差的絕對量與被測物濃度
4、呈正比恒定系統(tǒng)課差比例系統(tǒng)誤差影響檢驗結杲的生物學因素:影響檢驗結杲的生物學因素嬰兒CK、GGT、AST升高,膽-紅素生理升高但不很少高于85umol/L,血脂低,血鉀可達7mmol/L,堿性磷酸酶活性高。新生兒血糖濃度低新生兒老年人腎濃縮能力、肌酹清除率、腎糖閾下降,血尿素升高老年人干燥劑:CaC12吸收水和酒精;CaO吸收水和酸;硅膠硅膠只吸收水(藍色有效,粉紅色無效)干燥劑硅膠玻璃儀黠清潔劑配置:重鋸酸鉀50g,濃硫酸900ml,水100ml紅棕色有效,變綠效力降低,黑色不可使用玻璃儀器清潔劑配置參考方法鉀鈉白蛋白總蛋白火焰光
5、度火焰光度免疫化學凱氏定氮常規(guī)方法火焰光度法(767nm深紅)、離子選擇電極火焰光度法(589nm黃色)、離子選擇電極澳甲酚綠雙縮月尿實驗室方法評估指標和實驗:指標包括:實驗室方法評估指標和實驗:指標包括:精密度、準確度、檢測能力評佔試驗:重復性試驗、冋收實驗、干擾試驗,方法比較試驗評估試驗實驗室全面質控的內容:1有專人負責全面質控工作;2對工作人員進行醫(yī)徳醫(yī)風教育和業(yè)務培訓,普及質控知識;實驗室全面質控的內容3科學的管理和嚴格的規(guī)章制度是質控方案可以試試的保證;4有標準化的操作規(guī)程;5有分析前和分析厲的質量控制程序;6儀器量器的定
6、期鑒定,校正和正確使用;7實驗用水、試劑、質控品及校準品的質量符合要求;8釆用的各種測定方法的準確度,精密度等技術性能良好;9選擇合適的室內質控方法,常規(guī)開展室內質控,對失控結果及時釆取和應的處理措施;10參加實驗室室間的質屋評價活動或能力比對檢驗,認真分析冋報結果,對失控的項目及時檢查原因,釆収相應的改正措施CILA88的PT方案主要內容要求方案主要內容要求:每年至少進行3次PT調查,每次調查至少包括5個不同的指控標本,即在一年的時間內對任意一項目至少可得15個測定,對某個特定的分析結果如落于規(guī)定限內則判斷為接受結果,對某一個接受
7、結果,不再進行優(yōu)略分級,S1和S2均應>80,否則判斷為不滿意,如果在S1或S2連續(xù)2次不滿意或有2次以上不滿意,判斷為失敗。方法評價試驗與實驗誤差類型的關系:方法評價試驗與實驗誤差類型的關系:分析誤差的類型隨機誤差恒定誤羌比例謀羞評價試驗初步試驗批內重復性試驗干擾試驗回收試驗最后試驗日間重復試驗方法比較試驗精密度:表示測定結果屮隨機誤差大小程度的指標精密度準確度:使用已經確認的方法測泄結果作為標準真值,看測沱值與真值的接近程度,用偏差系數(shù)表示,準確度主要受系統(tǒng)誤差支配(反比)準確度特界度和干擾:非待測物質對待測物質的影響。特界度和
8、干擾檢測能力:檢測的靈敏度,測定檢測方法的線性范圍檢測能力回收試驗:□的是檢測候選方法的比例系統(tǒng)誤差回收試驗質控:1.1個質控超過3s,存在隨機誤差;2.2個連續(xù)質控超過2s,存在系統(tǒng)誤差;3.同批2個結果超過4s,存在隨機誤差;質控