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《離體蛙心灌流【機(jī)能實驗指導(dǎo)】》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、離體蛙心灌流［實驗?zāi)康模?.學(xué)習(xí)離體蛙心灌流的實驗方法。2.觀察Na、K、Ca三種離子及腎上腺索、乙酰膽堿等因索對心臟活動的影響。［實驗原理］1.心臟的正常節(jié)律性活動需要一個適宜的內(nèi)環(huán)境，內(nèi)環(huán)境的變化宜接影響著心臟的正常活動。本實驗在蛙心的灌流液內(nèi)人為地加入一些物質(zhì)而改變心臟活動的內(nèi)壞境，觀察心臟活動有何變化。2.心肌細(xì)胞分類收縮性興奮性傳導(dǎo)性自律性非自律細(xì)胞，心房肌，心室肌細(xì)胞有有有無自律細(xì)胞,p細(xì)胞,浦肯野細(xì)胞無有有有快反應(yīng)細(xì)胞：心房肌，心室肌，浦肯野細(xì)胞：主耍由快鈉通道被激活，Na快速內(nèi)流引發(fā)動作電位，去極速度快慢反應(yīng)細(xì)胞：竇房結(jié)細(xì)胞，房室交界區(qū)細(xì)胞：主耍由慢鈣通
2、道被激活，Ca內(nèi)流引發(fā)動作電位，去極速度慢3.心肌細(xì)胞的生理特征：電生理特征：自律性，興奮性，傳導(dǎo)性機(jī)械主理特征：收縮性影響心肌細(xì)胞電牛理因素彩響心肌細(xì)胞興奮性因素（心室肌細(xì)胞）影響心肌細(xì)胞自律性因索（竇房結(jié)細(xì)胞）影響心肌細(xì)胞傳導(dǎo)性因素（房室交界區(qū)細(xì)胞）靜息電位水平與閾電位水平之間的差距4期自動除極的速度結(jié)構(gòu)因素：直徑鈉通道狀態(tài)最人復(fù)極電位水平與閾電位水平之間差距動作電位0期去極速度和幅度鄰近部位膜的興奮性心肌細(xì)胞興奮一收縮耦聯(lián)過程所需的Ca要從細(xì)胞外液轉(zhuǎn)運(yùn)，細(xì)胞興奮時，膜通道開放，因此：細(xì)胞外液Ca濃度f一一細(xì)胞興奮時內(nèi)流Cat心肌收縮力f反之亦然4.1%KCI：即1
3、34mmol/L（正常：4mmol/L）輕，屮度高釗I細(xì)胞外KT一一K與Ca在細(xì)胞膜上有競爭性抑制一一K抑制細(xì)胞膜對Ca轉(zhuǎn)運(yùn)一一進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)Caj一一心肌的興奮收縮聯(lián)過程減弱一一心肌收縮力J[K]T一一膜內(nèi)外k濃度梯度減小一一靜息電位絕對值減小一一興奮性f[K]T一一細(xì)胞膜對k通透性增加一一K通道失活VJ—一自動去極化VJ—一自律性J[K]T一一細(xì)胞膜對k通透性增加一一K外流增加一一最人復(fù)極電位f一一自律性J[K]T一一Ca內(nèi)流受抑制一一0期去極速度和幅度降低一一傳導(dǎo)性降低重度高鉀：[K]門一一RP1一一Na通道失活一一興奮性喪失1.2%CaCI2：即180mmol/L（
4、正常：2mmol/L）細(xì)胞膜外Na與Ca有競爭性抑制細(xì)胞外液Ca濃度匸一一細(xì)胞興奮時內(nèi)流Cat心肌收縮力T快反應(yīng)細(xì)胞：高ca一一Na內(nèi)流抑制一一0期去極化速度及幅度卜?降一一傳導(dǎo)性J慢反應(yīng)細(xì)胞：高Ca一一Ca易進(jìn)入細(xì)胞，Ca內(nèi)流增加一一0期去極化速度增加一一傳導(dǎo)性f2.0.65%NaCI:111mmol/L細(xì)胞外Caj—一2期內(nèi)流Ca
5、一一胞漿Ca濃度J匕、肌收縮J[Ca]J—一Ca內(nèi)流減少一一0期去極化速度減慢一一傳導(dǎo)性！[Ca]J—一Ca不易進(jìn)入細(xì)胞一一4期自動除極的速度減慢一一自律性J7：腎上腺索正性變化腎上腺素與心肌細(xì)胞膜上的P1受體結(jié)合卜肌細(xì)胞和肌漿網(wǎng)膜Ca通
6、透性f一一肌漿屮Ca濃度增加2肌收縮f使K通道，Na通道，Ca通道都開放，?…一慢Ca通道一&乙酰膽?堿負(fù)性變化乙酰膽堿與心肌細(xì)胞膜上的M受體結(jié)合匕、肌細(xì)胞膜K通道的通透性f一一促k外流一1:竇房結(jié)細(xì)胞復(fù)極時K外流f一一最人復(fù)極電位水平f一一自律性J2：復(fù)極時K外流f一一AP2,3期縮短一一Ca進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)J匕、肌收縮J乙酰膽堿可直接抑制Ca通道一一Ca內(nèi)流JC?肌收縮J[實驗對象]青蛙或蟾賒[實驗器材和藥品]1?器材牛物信號采集系統(tǒng)、機(jī)械換能器、蛙類手術(shù)器械1套、蛙心插管、蛙心夾、試管夾、雙凹夾、萬能支架、滴管、150ml小燒杯4個、任氏液。2.藥品0.65%氯化鈉、2
7、%氯化鈣、1%氯化鉀、1：10000腎上腺索、1：10000乙酰膽堿等。［實驗步驟］1離體蛙心的制備(1)取1只蟾賒，破壞腦和脊髓，仰臥固定于蛙板上，丿IJ外科剪由劍突處向兩鎖骨肩峰端呈三角形剪開皮膚，用粗剪刀剪開胸壁，用圖釘固定兩前肢，用鍛了提起心包膜，用眼科剪將具剪開，眾露心臟。(2)在兩個主動脈干下各穿兩根細(xì)線(一根用來結(jié)扎腔靜脈，另一根用來結(jié)扎蛙心插管和主動脈)，并將具小一根打一活結(jié)備用。(3)將心臟上翻，辨認(rèn)心房，靜脈竇，腔靜脈，然后結(jié)扎腔靜脈。(4)川左手捉起結(jié)扎線，右手卅眼科剪在左側(cè)主動脈距分義部3mm處剪一“v”型口。將盛有少量任氏液的蛙心套管(用拘指將
8、套管堵住，以防套管中的任氏液流岀)從“v”型口插入動脈球底部，然后稍后撤套管，再將蛙心管尖端轉(zhuǎn)向蟾賒的背側(cè)及左下方，于心縮期插入心室內(nèi)。插管如已進(jìn)入心室，可見管屮液而隨著心搏而升降，此時即可將預(yù)置線的活結(jié)扎緊，并固定于插管壁的小鉤上。(5)小心提起套管和心臟，剪斷主動脈左右分支；將心臟連同靜脈竇一起剪下。(6)吸去管內(nèi)的血液，并用任氏液反復(fù)沖洗心室內(nèi)的余血，以防血液凝固而影響實驗的進(jìn)行。用連有細(xì)線的蛙心夾在心舒期夾住心尖部。(心尖人，夾纟R織少，不易損傷心臟)2.實驗裝置將蛙心插管用試管夾固定于支架上，蛙心夾的連線連接在機(jī)械換能器上。換能
