蛙心灌流試驗報告

蛙心灌流試驗報告

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時間:2020-01-14

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1、......蛙心灌流實驗實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)斯氏或八木氏離體蛙心灌流法。2、了解心肌的生理特性。3、觀察Na+、K+、Ca2+及腎上腺素(Adr)、乙酰膽堿(Ach)等對離體心臟活動的影響。實驗原理動物的離體心臟,用理化特性類似于其血漿的代體液灌流時,在一定的時間內(nèi),仍然保持有節(jié)律的舒張活動。改變灌流液的理化特性,這種節(jié)律的舒縮活動也隨之發(fā)生改變,說明內(nèi)環(huán)境理化因素的相對恒定是維持心臟正常節(jié)律活動的必要條件。實驗材料與用品1、材料:蟾蜍、斯氏蛙心套管、套管夾、支架、雙凹夾、蛙心夾、蛙板(蠟盤)、常用手術(shù)器械、滴管、

2、廢液缸、棉線2、藥品:任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、0.01%腎上腺素、0.01%乙酰膽堿3、儀器:計算機(jī)采集系統(tǒng)、張力傳感器實驗步驟1、取一只蟾蜍,用探針破壞其腦脊髓后仰臥固定于蛙板上,剪開胸前區(qū)皮膚,剪去胸骨,暴露心臟。用眼科鑷提起心包膜,再用眼科剪在心臟收縮時將其剪破,使心臟完全暴露出來。2、識別心臟的各個部分,包括心房、心室、靜脈竇等,并觀察心跳。3、插蛙心插管,制備離體蛙心。在左主動脈下穿一線結(jié)扎,靠近動脈竇,接著在左右主動脈下方穿一線,并打一松結(jié)留作固定插管用。4、參考材料

3、......用手提起結(jié)扎線,用眼科剪在左側(cè)主動脈距分叉3mm處向心臟剪一斜口,右手將盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入,先進(jìn)入動脈圓錐,然后在心室收縮時,向前略向左推動蛙心插管,使之經(jīng)主動脈瓣插入心室腔內(nèi)(注意:為了使蛙心插管順利插入心室,應(yīng)使心室與動脈圓錐成一條直線)。進(jìn)入心室的標(biāo)志是隨著心室搏動,均有血液噴入插管,插管的液面隨著心搏而升降。結(jié)扎插管并將結(jié)扎線固定于插管側(cè)面的小鉤上,以防止標(biāo)本滑脫。在蛙心插管插入心室后,用吸管及時吸出管內(nèi)的血液,更換新鮮任氏液。提起插管,剪斷主動脈左、右側(cè)分支,輕輕提起插管和

4、心臟,在靜脈竇下方繞一線,將左右肺靜脈及前后腔靜脈一起結(jié)扎(切勿損傷靜脈竇),在結(jié)扎線下方剪去所有牽連的組織,將心臟摘出。用任氏液反復(fù)沖洗(10~25滴/min的速度緩慢點滴)任氏液。至插管內(nèi)任氏液完全澄清無色為止。以后做實驗注意每次換液時,插管內(nèi)液面應(yīng)保持相同的高度。5、連接多道生理記錄儀①用夾子將蛙心插管固定于鐵架臺上,肌張力換能器固定于蛙心下方,通過蛙心夾與線將離體蛙心與張力換能器相連(蛙心夾于心室舒張時夾住心尖)。②開動多道生理記錄儀觀察曲線。6、觀察內(nèi)容?①描記正常心搏曲線:曲線疏密——代表心跳的頻率

5、;曲線的規(guī)律性——代表心跳節(jié)律性;曲線的幅度——代表心室收縮的強(qiáng)弱曲線的頂點水平——代表心室收縮的程度;曲線的基線——代表心室舒張的程度。②加入2%CaCl2溶液1~2滴,混勻,觀察曲線變化。③加入1%KCl溶液1~2滴,混勻,觀察曲線變化。④加入1/10000Ad溶液1~2滴,混勻,觀察曲線變化,待效應(yīng)明顯后,將灌流液全部吸出,換入新鮮任氏液,使心跳恢復(fù)正常。參考材料......⑤加入1/100000Ach溶液1~2滴,混勻,觀察曲線變化,待效應(yīng)明顯后,將灌流液全部吸出,換入新鮮任氏液(如果加入Ach后心跳已

6、停止舒張狀態(tài),換液后,可用滴管插至插管底部,將灌流液劑入心室,反復(fù)數(shù)次,將心室內(nèi)Ach完全清洗出)。注意事項1、用眼科鑷提起心包膜,再用眼科剪在心臟收縮時將其剪破,使心臟完全暴露出來。2、未結(jié)扎剪斷血管會造成大出血,是嚴(yán)重錯誤操作;未結(jié)扎便插入插管同理。3、為了使蛙心插管順利插入心室,應(yīng)使心室與動脈圓錐成一條直線。4、進(jìn)入心室的標(biāo)志是隨著心室搏動,均有血液噴入插管5、在蛙心插管插入心室后,用吸管及時吸出管內(nèi)的血液,更換新鮮任氏液參考材料

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