實驗四線粒體和液泡系的超活染色與觀察.ppt

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1、實驗三：線粒體和液泡系的超活染色與觀察【課前預習】1．什么是液泡系？2．為什么不能用一種活體染料同時觀察多種細胞器？【目的要求】1.觀察動植物活細胞內(nèi)線粒體、液泡系的形態(tài)、發(fā)育和分布2.了解細胞和細胞器的超活染色技術【基本原理】線粒體是細胞內(nèi)一種重要細胞器，細胞的各項活動所需要的能量，主要是通過線粒體呼吸作用來提供的。活體染色是應用無毒或毒性較小的染色劑真實地顯示活細胞內(nèi)某些結構而又很少影響細胞生命活動的一種染色方法。詹納斯綠B（JanusgreenB）是線垃體的專一性活細胞染色劑，毒性很小，屬于堿性染料，解離后帶正電，由電性吸引堆積在線粒體膜上。線粒體中細胞色素氧化酶使

2、染料保持氧化狀態(tài)呈藍綠色，從而使線粒體顯色，而在周圍的細胞質(zhì)中染料被還原，成為無色狀態(tài)。細胞中的線粒體呈藍綠色的顆粒。中性紅對液泡系的染色具有專一性，將活細胞中的液泡系染成紅色?！緦嶒炗闷贰?.器材：顯微鏡、恒溫水浴鍋、、剪刀、鑷子、解剖刀、載玻片、蓋玻片、吸管、牙簽、吸水紙2.試劑：Ringer液、1/5000詹納斯綠B、1/3000中性紅3.材料：人口腔上皮細胞、洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細胞、小麥（或綠豆）幼根根尖【方法步驟】1．線粒體的超活染色與觀察1）口腔上皮細胞線粒體的超活染色：1/5000詹納斯綠B1-2滴，口腔上皮細胞（牙簽刮?。d玻片于37℃恒溫染色10-15mi

3、n，顯微鏡下觀察。2）洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細胞線粒體的超活染色與觀察：1/5000詹納斯綠B溶液1-2滴，洋蔥鱗莖內(nèi)表皮，載玻片于37℃恒溫水浴染色10-15min，顯微鏡下觀察。2．小麥（或綠豆）幼根根尖液泡系的中性紅染色觀察小麥（或綠豆）幼苗根尖（1-2cm）縱切面切片，1/3000中性紅溶液1滴染色5-10min，載玻片于37℃恒溫水浴，蓋上蓋玻片壓扁根尖，顯微鏡下觀察。【方法步驟】1．線粒體的超活染色與觀察1）口腔上皮細胞線粒體的超活染色：1/5000詹納斯綠B1-2滴，口腔上皮細胞（牙簽刮?。?，載玻片于37℃恒溫染色10-15min，顯微鏡下觀察。2）洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細

4、胞線粒體的超活染色與觀察：1/5000詹納斯綠B溶液1-2滴，洋蔥鱗莖內(nèi)表皮，載玻片于37℃恒溫水浴染色10-15min，顯微鏡下觀察。2．小麥（或綠豆）幼根根尖液泡系的中性紅染色觀察小麥（或綠豆）幼苗根尖（1-2cm）縱切面切片，1/3000中性紅溶液1滴染色5-10min，載玻片于37℃恒溫水浴，蓋上蓋玻片壓扁根尖，顯微鏡下觀察。【實驗結果】口腔上皮細胞的線粒體分布洋蔥內(nèi)表皮細胞線粒體分布植物根尖液泡的中性紅染色【實驗報告】1．繪出人口腔上皮細胞示線粒體的形態(tài)與分布并簡要分析。2．繪出小麥幼根根尖組織液泡系的形態(tài)與分布并簡要分析