從搖瓶到發(fā)酵罐的發(fā)酵放大問(wèn)題.doc

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1、.從搖瓶到發(fā)酵罐的發(fā)酵放大問(wèn)題發(fā)酵?發(fā)酵罐?重復(fù)性標(biāo)題:?從搖瓶到發(fā)酵罐的發(fā)酵放大問(wèn)題摘要:?從搖瓶到發(fā)酵罐的發(fā)酵放大問(wèn)題我在實(shí)驗(yàn)室50ml250ml三角瓶做，37℃150rpm；放大到300L發(fā)酵罐，轉(zhuǎn)速180rpm（不能調(diào)），風(fēng)量要控制在多少合適啊？這個(gè)細(xì)菌是微好氧的。有一次，溶氧都降到2%了，反而結(jié)果還比前幾次好。但是產(chǎn)物也只有搖瓶做的50%。怎么優(yōu)化??？回復(fù)：溶氧控制在轉(zhuǎn)速180rpm時(shí)，是比較扯淡的，因?yàn)檗D(zhuǎn)速不足以把微量空氣氧打散到促進(jìn)氣液兩相的傳質(zhì)程度?。。ㄎ以?0L罐上……關(guān)鍵詞:?發(fā)酵?發(fā)酵罐?重復(fù)性我在實(shí)驗(yàn)室50ml/250ml三角瓶做，37℃150rpm；放大到300L發(fā)酵

2、罐，轉(zhuǎn)速180rpm（不能調(diào)），風(fēng)量要控制在多少合適??？這個(gè)細(xì)菌是微好氧的。有一次，溶氧都降到2%了，反而結(jié)果還比前幾次好。但是產(chǎn)物也只有搖瓶做的50%。怎么優(yōu)化??？回復(fù)：溶氧控制在轉(zhuǎn)速180rpm時(shí)，是比較扯淡的，因?yàn)檗D(zhuǎn)速不足以把微量空氣氧打散到促進(jìn)氣液兩相的傳質(zhì)程度?。。ㄎ以?0L罐上得到的發(fā)酵中后期數(shù)字為350rpm，高于此轉(zhuǎn)速，溶氧將增加很大～～）此時(shí)的溶氧顯示器數(shù)字顯示出來(lái)的波動(dòng)主要靠溶液流動(dòng)促進(jìn)傳質(zhì)，不是靠氣液兩相間的傳質(zhì)，此時(shí)你通氣量影響的是壓力（壓力高了，溶氧就增加了），多通的空氣溶解了一小部分，大部分是“流掉”了，而不是用掉了你先確保實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性后，再好好搞下一步～～工廠里面

3、因素比較復(fù)雜，好好親臨指導(dǎo)啊～～優(yōu)化大罐需要考慮：罐壓，接種量，pH范圍，通氣量范圍，起使轉(zhuǎn)速，溫度，DO范圍。這些都是必須考慮的，你可以適當(dāng)固定1到2個(gè)條件，看看生長(zhǎng)怎么樣。窮孩子，發(fā)酵罐和搖瓶相差太大，因?yàn)檎w的機(jī)制不甚相同，我覺得最大的區(qū)別在于1搖瓶靠的是離心力，而發(fā)酵罐是真正的剪切，有些菌種在搖瓶中生長(zhǎng)良好，但到發(fā)酵罐上由于剪切作用而無(wú)法結(jié)團(tuán)，所以很多時(shí)候兩者是不一樣的。2溶氧問(wèn)題：上面幾位說(shuō)得很全了，我就不多說(shuō)了:P3補(bǔ)料問(wèn)題：我看樓主MM好像是學(xué)微生物的，很多微生物發(fā)酵都需要用到前體，而且是流加式的，你在搖瓶上無(wú)法實(shí)現(xiàn)持續(xù)流加吧，但是發(fā)酵罐是可以的。4環(huán)境穩(wěn)定問(wèn)題：有些菌種，是需要

4、維持恒定的pH來(lái)保持發(fā)酵進(jìn)行的，搖瓶中我們無(wú)法監(jiān)測(cè)到（但是現(xiàn)在已經(jīng)出現(xiàn)直接跟著檢測(cè)系統(tǒng)的搖瓶系統(tǒng)），所以你無(wú)法維持一個(gè)恒定的pH。發(fā)酵罐可以通過(guò)在線控制pH值恒定..5數(shù)據(jù)：你做發(fā)酵，最重要的是得到合適的配方與工藝吧，往往在發(fā)酵罐上可以比較全地反映出你的整個(gè)發(fā)酵狀態(tài)，什么時(shí)間菌體瘋狂生長(zhǎng)，什么時(shí)間進(jìn)入產(chǎn)素階段，根據(jù)一些指標(biāo)可以看得出來(lái)，所以搖瓶只是表層，發(fā)酵罐才是深層，總之吧，搖瓶肯定是基礎(chǔ)，只有在搖瓶的基礎(chǔ)上進(jìn)行系統(tǒng)的發(fā)酵罐的研究才能真正適合生產(chǎn)。再者，你就是由小罐到大罐的工藝操作還是不盡相同。僅供參考，大家多交流！微生物發(fā)酵的放大實(shí)驗(yàn)，要注意反應(yīng)罐的培養(yǎng)溫度，培養(yǎng)基濃度，PH值，攪拌轉(zhuǎn)速，

5、還要不斷的反應(yīng)罐增加補(bǔ)料。溫度好控制pH上罐子是可以調(diào)節(jié)的，在搖床上你只能定時(shí)取樣檢測(cè)溶氧就差的很大了，搖床上基本就是缺氧的，上罐子因?yàn)橛型馑栽谝欢l件下能確保溶氧，這樣會(huì)導(dǎo)致用搖床搖菌的時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于上罐子的時(shí)間，我現(xiàn)在做的菌，在搖床上基本是16小時(shí)左右吧，上罐子就6、7個(gè)小時(shí)不銹鋼最怕氯離子了,特別是鹽酸.酸的種類多了,看你需要補(bǔ)課的多,還是自己先學(xué)一陣子先吧.回復(fù)選擇硫酸或磷酸即可不知樓主為何選鹽酸:sweat:回復(fù)不銹鋼最怕氯離子啦，尤其是鹽酸，有些用自來(lái)水的廠子都要嚴(yán)格控制水中氯的含量！你們做多久啦？多大的罐子呀？發(fā)酵罐是壓力容器，先停下來(lái)檢修吧，不然出了事就是人命關(guān)天的大事:ca

6、t3:回復(fù)主要看HCl在發(fā)酵過(guò)程中起什么作用，是否可以替換。如果不能替換，說(shuō)明對(duì)Cl離子代謝需要。可用鹽酸鹽替代。如果僅僅是調(diào)節(jié)pH那就選硫酸試試。另外就是發(fā)酵過(guò)程忌S元素離子。以上種種，需要試驗(yàn)選擇。如何確定發(fā)酵罐中添加IPTG的時(shí)間(發(fā)酵罐,大腸桿菌,搖瓶培養(yǎng))發(fā)酵罐?大腸桿菌?搖瓶培養(yǎng)標(biāo)題:?如何確定發(fā)酵罐中添加IPTG的時(shí)間(發(fā)酵罐,大腸桿菌,搖瓶培養(yǎng))摘要:?[如何確定發(fā)酵罐中添加IPTG的時(shí)間(發(fā)酵罐,大腸桿菌,搖瓶培養(yǎng))]使用的是大腸桿菌(Escherichiacoli)，在搖瓶培養(yǎng)時(shí)，是在OD為06-08時(shí)加入IPTG誘導(dǎo)，現(xiàn)在轉(zhuǎn)到7L的罐里，如何確定添加IPTG的時(shí)間？還是根

7、據(jù)OD嗎？關(guān)鍵詞:[發(fā)酵罐大腸桿菌搖瓶培養(yǎng)]……關(guān)鍵詞:?發(fā)酵罐?大腸桿菌?搖瓶培養(yǎng)..使用的是大腸桿菌(Escherichiacoli)，在搖瓶培養(yǎng)時(shí)，是在OD為0.6-0.8時(shí)加入IPTG誘導(dǎo)，現(xiàn)在轉(zhuǎn)到7L的罐里，如何確定添加IPTG的時(shí)間？還是根據(jù)OD嗎？回復(fù)時(shí)間一般選擇在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，你可以先監(jiān)測(cè)OD作出生長(zhǎng)曲線，然后定。接種的時(shí)間選擇，對(duì)于最后高密度培養(yǎng)所能達(dá)到的OD值，和蛋白表達(dá)有很大的