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《豬FcγRIIb介導PRRSV抗體依賴增強作用研究.pdf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterPorcineFc),RIIbMediatesAntibody—dependentEnhancementofPRRSVInfectionByZhizhengJiang一Supervisor:AipingWangZoologyDepartmentofBioengineeringMay2012原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學位論文,是本人在導師的指導下,獨立進行研究所取得的成果。除
2、文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。學位論文作者:藹。尊影L日期:矽臟年∥月1日學位論文使用授權(quán)聲明本人在導師指導下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品,知識產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭州大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定,同意學校保留或向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版,允許論文被查閱和借閱;本人授權(quán)鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或者其他
3、復制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文或與該學位論文直接相關(guān)的學術(shù)論文或成果時,第一署名單位仍然為鄭州大學。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。學位論文作者:藕寄攻日期:紅f≯年多月1日摘要豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的嚴重影響?zhàn)B豬業(yè)的最主要傳染病,給全世界養(yǎng)豬業(yè)帶來了重大損失。該病毒具有抗體依賴增強作用(ADE)、持續(xù)性感染、亞型多、臨床癥狀不明顯以及爆發(fā)突然等特點,給臨床防控帶來很大困難??贵w依賴增強作用(ADE)是指亞中和滴度的特異性抗體能夠增強病毒
4、的復制和感染。ADE給疫苗的研發(fā)造成了重大障礙。ADE主要由免疫細胞表面的Fc受體(FcR)介導。Fc受體是能與免疫球蛋白(Ig)的Fc段特異結(jié)合的一類細胞表面分子,通過與IgFc段相結(jié)合,參與機體多種免疫學效應。豬IgGFc受體主要可以分為Fcl'RI(CD64)、FcTRII(CD32)以及FcTRIII(CDl6)=種。其中FcyRI和FcTRIII的丫鏈含有ITAM基序,為活化型受體;Fc丫RII因為胞內(nèi)區(qū)所含有的相對保守的ITIM基序,屬于抑制型受體。關(guān)于登革熱病毒侵染人巨噬細胞的實驗已經(jīng)證明,活化型受體Fc
5、),RI和FC丫RIIa可以介導ADE作用,但抑制型Fc受體能否介導ADE尚未報道。本研究的目的在于探討豬Fc),RIIb作為一種抑制型受體,能否介導ADE作用。在前期已經(jīng)建立表達豬Fc),RIIb的Marc.145細胞系的基礎(chǔ)上,研究了細胞系表達Fc受體和復制PRRSV特性。RT.PCR和流式細胞術(shù)證明了轉(zhuǎn)染F吖RIIb的Mare.145細胞系中Fc),RIIb可以穩(wěn)定表達;在無PRRSV抗體存在的情況下PRRSV在轉(zhuǎn)染細胞系和未轉(zhuǎn)染細胞系中感染率、復制效率一致,但在亞中和滴度抗PRRSV抗體存在的情況下,PRRSV
6、感染后轉(zhuǎn)染細胞系子代病毒量顯著提高,野生型Marc.145細胞則無此效應。抗PRRSV特異抗體的F(ab’)2片段和PRRSV陰性豬血清均不能增強PRRSV感染。抗豬FC丫RII多抗能夠阻斷PRRSV抗體介導的增強作用。這些結(jié)果證明豬FcTRIIb能夠特異介導PRRSVADE作用。為進一步研究抑制型IgGFe受體介導ADE特性,研究了PRRSVADE途徑和正常途徑感染表達豬FeyRIIb細胞的感染率差異。在PRRSV感染初期,ADE感染和非ADE感染在感染率方面沒有明顯不同,而在感染24小時后,ADE感染組的感染率明顯
7、高于非ADE感染對照組,這意味著PRRSV感染后胞內(nèi)機制可能發(fā)生了促進病毒感染的變化。豬Fm/RIIb在PRRSVADE感染中的作用研究摘要對進一步了解PRRSV與感染細胞間的相互作用以及PRRSV的發(fā)病機理具有重要意義。關(guān)鍵詞:抗體依賴增強作用(ADE);IgGFc受體;豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)ⅡAbstractPorcinereproductiveandrespiratorysyndrome(PRRS),causedbytheporcinereproductiveandrespiratorysyndro
8、mevirus(PRRSV),isoneofthemostimportantinfectiousdiseasesthataffectingpigfarms,andithascausedhugelossestoswineindustryallovertheworld.Becauseoftheantibody-dependentenh