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《水稻T-DNA插入突變體庫的構(gòu)建及側(cè)翼序列的分離.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、ConstructionofMutantPopulationforIndicaRiceKasalathandAnalysisoftheFlankingSequencebySHANGShangAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofSciencemBiochemistryandMolecularBiologymCentralSouthUniversityofForestryandTechnology498ShaoshanSouthRoad，TianxinDist
2、rictChangshaHunan410004，P．R．CHINASupervisorProfessorWANGPing，ResearchFollowCHENCaiyanApril，2011J
3、IIIIliltIIIIi中南林業(yè)科技大學(xué)．．j，Y1913學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品，也不包含為獲得中南林業(yè)科技大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均己在文中以明確方式表明。本
4、人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。雙劣作者簽名：N便伽11年6月．7日中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件或電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)中南林業(yè)科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于：摘要水稻是世界上重要的糧食作物之一，由于其基因組較小，遺傳背景清晰，成熟的遺傳轉(zhuǎn)化體系，與其它禾本科植物存在廣泛的共線性等特點(diǎn)，成為單子葉植物研究的模式植物。研究水稻目的基
5、因組功能可以通過創(chuàng)造基因功能缺失突變體這個(gè)最為有效的途徑進(jìn)行。構(gòu)建大量的水稻突變體庫在研究水稻功能基因組中占有非常重要的作用。本研究是以水稻秈稻品種Kasalath為受體材料，通過構(gòu)建pCAMBLA1301．pUCl9載體，利用農(nóng)桿菌侵染的方法轉(zhuǎn)化至水稻中，獲得如下結(jié)果：1．利用限制性內(nèi)切酶HindⅢ、XbaI對pCAMBIA1301和pUCl9進(jìn)行雙酶切，然后利用T4連接酶進(jìn)行連接，成功構(gòu)建pCAMBIA1301．pUCl9載體。2．以水稻秈稻品種Kasalath成熟胚誘導(dǎo)的愈傷組織為轉(zhuǎn)化受體，利用農(nóng)桿菌侵染法將pCAMBIA1301-pUCl9導(dǎo)入Kasalath中
6、，獲得再生植株280棵。3．通過對農(nóng)桿菌介導(dǎo)的T-DNA插入遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化，將對水稻秈稻品種Kasalath得到轉(zhuǎn)基因苗的時(shí)間由3個(gè)月縮短至36天。通過統(tǒng)計(jì)分析Kasalath轉(zhuǎn)化的分化率可達(dá)到3．5％。4．對轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行PCR檢測，結(jié)果表明pCAMBIA1301．pUCl9已經(jīng)整合到水稻基因組中。5．利用質(zhì)粒營救對轉(zhuǎn)基因植物的T-DNA插入的側(cè)翼序列進(jìn)行測序，通過與GeneBank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對，得到T-DNA插入位置。關(guān)鍵詞：水稻Kasalath：水稻突變體庫；側(cè)翼序列；插入突變ABSTRACTRiceisoneofthemostimportantfoodcr
7、opsintheworld，becauseofrelativesmallgenomesize，sophisticatedgenetictransformationsystem，well-constructedphysicalmap，andnearcompletionofthegenomicsequencingprojectofsubspecies，andthereisawiderangeofothergrassesandothercharacteristicswerelinearandbecamethemodelmonocotplantresearch．Function
8、officegenomegenefunctionbycreatingmutantthemosteffectiveways．Constructionofalargenumberofricemutantlibraryofricefunctionalgenomicsinthestudyplaysaveryimportantrole．Inthisstudy，Kasalathriceforthereceptormaterial，BybuildingpCAMBIA1301-pUCI9vector，transformedbyAgrobacteriumi
