離體蛙心灌流實習.ppt

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1、離體蛙心灌流實驗目的學習離體蛙心灌流的方法；觀察鈉、鉀、鈣三種離子對心臟活動的影響。觀察腎上腺素、乙酰膽堿等因素對心臟活動的影響。實驗原理作為蛙心起搏點的靜脈竇能按一定節(jié)律自動產(chǎn)生興奮。因此，只要將離體失去神經(jīng)支配的蛙心保持在適宜的環(huán)境中，在一定時間被仍能產(chǎn)生節(jié)律性興奮和收縮。另一方面，心臟正常的節(jié)律性活動有賴于內(nèi)環(huán)境理化因素的相對穩(wěn)定，所以，改變灌流液的成分，則可以引起心臟活動的改變。實驗原理工作細胞：普通的具有收縮能力的心肌細胞自律細胞：組成特殊傳導系統(tǒng)的心肌細胞心肌收縮力：Ca2+心率：自律細胞4期自動除極速度RP或MDP與閾電位之差動物與器材

2、牛蛙斯氏蛙心套管、套管夾、常用手術器械、任氏液、張力換能器、蛙心夾、0.65%NaCl溶液、5%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:5000腎上腺素溶液、1:10000乙酰膽堿溶液、300u/ml肝素溶液方法與步驟離體蛙心的制備：雙毀髓→左主動脈結扎→左右兩主動脈下方活結備用→剪口，插管（管內(nèi)盛任氏液與肝素）→結扎備用線（套管＋左右主動脈）→剪斷動脈→結扎并剪斷靜脈。固定套管并用任氏液換洗血液；進入RM6240系統(tǒng)。方法與步驟觀察并記錄正常心搏曲線；向套管內(nèi)分別加入以下溶液（0.65%NaCl溶液置換任氏液、0.5%NaCl溶液1-

3、2d、1%KCl溶液1-2d、2%CaCl2溶液1d、1:5000腎上腺素溶液1-2d、1:10000乙酰膽堿溶液1-2d），觀察并記錄曲線變化。0.65%0.5%NaCl競爭性抑制Ca內(nèi)流胞漿內(nèi)[Ca]↓心肌細胞收縮力↓腎上腺素：主要與心肌的β1受體結合，產(chǎn)生正性變時、變力和變傳導效應。乙酰膽堿：與心肌細胞的M2受體結合，產(chǎn)生負性變時、變力和變傳導效應。具體作用機制見《大學生理學》P236~239、P248注意事項制備蛙心標本時，勿傷靜脈竇；各溶液作用一旦出現(xiàn)，應立即用新鮮任氏液換洗，以免心肌受損，而且待心跳恢復正常后方能進行下一步實驗；蛙心插管內(nèi)

4、液面應保持恒定；每次更換或滴加溶液必須做標記；