不同基因型戊型肝炎病毒存在多種類型抗原表位.pdf

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1、!"卷#期微生物學報!（"#）：#$%&#$"$%%"年$月!日!"#$%&"’()&(*(+&"$,&-&"$!’()*+,*-$%%"!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!不同基因型戊型肝炎病毒存在多種類型抗原表位##"##$鄧蕾，孟繼鴻，趙宇，張紅梅，戴星（東南大學#基礎醫(yī)學院病原生物學與免疫學系$醫(yī)學院附屬中大醫(yī)院皮膚科南京$#%%%D）摘要：以戊型肝炎病毒（39K）LM’$重組蛋白N#""OF為免疫原制備單克隆抗體（PJQ)F），采用間接9RSTQ和免疫印跡法，檢測PJQ)F與不同基因型和亞型

2、39K重組蛋白N#""0+（*!,型）、N#""U,V（!)型）、N#""P>（*!J型）、N#""P(（8"型）、N#""O（F#型）、N#""W（G豬39K，#型）和N#""X=（?$型）的反應性，采用抗原或抗體競爭9RSTQ分析N#""蛋白與天然39K顆粒之間抗原表位的關系。結果獲得!Y.、$9.、##9##、#$32、.Q.和#’#"株穩(wěn)定分泌PJQ)F的雜交瘤細胞株。!Y.分泌的PJQ)與/種N#""均發(fā)生反應，其與免疫原N#""OF的結合可被!、"、#或$型天然39K顆?；虿∪搜甯偁幰种啤?9.、##9##和#$32分泌的PJQ)F只與N#""OF、N#""WG和N#""X

3、=?發(fā)生反應，它們與N#""OF的結合僅能被#和SK型病毒或血清所抑制。.Q.分泌的PJQ)只與N#""OF及N#""WG結合，#’#分泌的PJQ)只與N#""OF結合，兩者均能被#型美國株競爭抑制，而!、"、$型不能抑制它們與N#""OF的結合。由此可見，不同基因型和亞型39KLM’$編碼蛋白N#""上存在多種類型抗原表位，其中包括!、"、#、$基因型共同的，#、$基因型共有的和第#基因型特異的等，這些表位與天然39K顆粒上的抗原表位具有相同的免疫學特征。關鍵詞：戊型肝炎病毒；抗原表位；單克隆抗體；重組蛋白；基因型中圖分類號：M.D$文獻標識碼：Q文章編號：%%%#7"$%D（$%%"

4、）%#7%#$%7%/戊型肝炎（39）是由戊型肝炎病毒（3(N,C;C;F9當以不同基因型和亞型的N#""對39病人和實驗K;*+F，39K）引起的一種經(jīng)消化道傳播的急性傳染性感染動物血清進行抗體9RSTQ滴定時，發(fā)現(xiàn)血清抗［/］肝炎，呈全球分布，以暴發(fā)流行或散發(fā)感染的形式存體滴度的高低與所用抗原的基因型明顯有關，提［#］在。急性39病情較重，病死率為$Z2[，而孕婦示不同基因型39K可能具有不同的抗原表位。因［$］病死率可高達#2[&$%[。39K基因組全長約此，有必要對不同基因型39K抗原表位的差異進行/Z$V)，含有.個開放讀碼框架（LM’），其中LM’$編深入研究。我們曾通過制備

5、單克隆抗體（PJQ)F）進碼病毒的衣殼蛋白。根據(jù)全基因組序列分析，39K行抗原表位分析，發(fā)現(xiàn)39K第!基因型重組蛋白［.］在全球主要可分為!個基因型：!型來自于亞洲（N#""0+*）和第"基因型重組蛋白（N#""P(8）既含有和非洲，至少包括.個亞型，分別以緬甸株（S,型）、39K共同的抗原表位，又含有基因型特異性的抗原［6，D］巴基斯坦株（S)型）和摩洛哥株（SJ型）為代表；"型表位，提示39K第#、$基因型的重組蛋白中也［!］來自墨西哥；#型來自美國，還包括部分豬39K；可能含有不同于第!、"基因型的抗原表位。為此，$型包括新近發(fā)現(xiàn)的39K中國株、臺灣株和部分日本文采用代表39K第#

6、基因型的美國株N#""OF為本株。免疫原，制備抗7N#""OF的PJQ)F，進一步分析不同39K是一種MWQ病毒，容易變異，不同39K毒基因型39K重組蛋白N#""的抗原表位特點，并探株在核苷酸和氨基酸水平的同源性高低不一，為診索基因工程表達的重組蛋白與天然39K顆粒之間斷試劑和疫苗的研制帶來一定的困難。有研究報抗原表位的關系。［2］道，被39K!型或和"型抗原制備的診斷試劑!材料和方法排除的部分急性非39病人血清對39K$型的多［"］肽呈陽性反應。P(?@等的研究發(fā)現(xiàn)，39KLM’$!"!材料基因編碼的一段由!2$&"#/位氨基酸組成的重組!"!"!菌株和糞便標本：大腸桿菌（!"#$

7、%&’#$’(#)*’）蛋白（N#""）含有39K構型依賴性中和抗原表位。]P#%D菌株為U*>:(@,公司產(chǎn)品。緬甸株、墨西哥株基金項目：國家自然科學基金（.%$/#$.#，.%$/#$#$）；江蘇省自然科學基金（01$%%$%2.）；江蘇省衛(wèi)生廳醫(yī)學科技發(fā)展基金（3$%%##2）；教育部留學回國人員科研啟動基金（$%%!#/"）"通訊作者。4(5：6"7$276.$/$!2!；’,8：6"7$276..$!66/；97:,;5：