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1、山東農(nóng)業(yè)科學(xué)2015，47(1)：14～16ShandongAgriculturalSciencesDOI：10．14083／j．issn．1001—4942．2015．01．004不同發(fā)根農(nóng)桿菌誘導(dǎo)花生發(fā)根研究任艷，江晨，王輝，石延茂，尹亮，李雙鈴，崔瀟，李磊，袁美h(1．山東省花生研究所，山東青島266100；2．青島市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，山東青島266100)摘要：利用5種發(fā)根農(nóng)桿菌侵染不同花生外植體，對比其發(fā)根誘導(dǎo)率，分析尋找利于花生轉(zhuǎn)化的外植體、花生品種及發(fā)根農(nóng)桿菌。結(jié)果表明，農(nóng)桿菌94022誘導(dǎo)發(fā)根率較其它發(fā)根農(nóng)桿菌
2、高；后期繼代培養(yǎng)中子葉誘導(dǎo)的發(fā)根易于培養(yǎng)，存活率高，生長狀態(tài)好；在用培養(yǎng)后的子葉為外植體時，花育2O較其它品種發(fā)根誘導(dǎo)率高。關(guān)鍵詞：發(fā)根農(nóng)桿菌；花生；外植體；發(fā)根誘導(dǎo)中圖分類號：$565．204．3文獻(xiàn)標(biāo)識號：A文章編號：1001—4942(2015)01—0014-03StudyonHairyRootInductionofPeanutwithDifferentAgrobacteriumrhizogenesRenYan，JiangChen，WangHui，ShiYanmao，YinLiang，LiShuangling，Cui
3、Xiao，LiLei，YuanMei(1．ShaMongPeanutResearchste，~ng&o266100，China；2Q機(jī)0AcademyofAgr／cu／tura／Sc／ences，ng掃266100，China)AbstractFivekindsofAgrobacteriumrhizogeneswereusedtoinfectpeanutexplantsandtherootinduc—tionrateswerecontrastedtofindthesuitableexplants，peanutvarietie
4、sandA．rhizogenesforpeanuttransfor—mation．TheresultsshowedthatA．rhizogenes94022hadhigherrootinductionratethantheothers．Thehairyrootsinducedfromcotyledonwereeasytocultivateinthesuccessivetransfercuhurewithhighersurvivalrateandgoodgrowthcondition．Withculturedcotyledon
5、asexplants，Huayu20hadhigherrootinductionratethanotherpeanutvarieties．KeywordsAgrobacteriumrhizogenes；Peanut；Explants；Hairyrootinduction發(fā)根農(nóng)桿菌能誘導(dǎo)大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)花生是世界上廣泛種植的經(jīng)濟(jì)作物之一，是單子葉植物l1]，發(fā)根農(nóng)桿菌所含Ri質(zhì)粒的T—我國第二大食用植物油和蛋白質(zhì)資源。同時DNA通過整合進(jìn)入植物核基因組，并穩(wěn)定表達(dá)引花生的根和莖等外植體中含有白藜蘆醇，建立起宿主植物發(fā)根J
6、。發(fā)根起源于單個細(xì)胞，具有花生發(fā)根培養(yǎng)體系對尋求白藜蘆醇的新資源也有生長迅速、遺傳穩(wěn)定、有利于高效表達(dá)克隆的篩選重要意義。本試驗以5種發(fā)根農(nóng)桿菌和5個花生等特點。用含改造型Ri質(zhì)粒的發(fā)根農(nóng)桿菌感品種及其不同部位外植體為材料，分析尋找利于染植物細(xì)胞可將目的基因?qū)酥参锝M織再生出轉(zhuǎn)花生轉(zhuǎn)化的外植體、花生品種及發(fā)根農(nóng)桿菌?；蛑仓辍?。并根據(jù)插入位點的多樣性篩選出l材料與方法高效表達(dá)的發(fā)根無性系進(jìn)行生產(chǎn)和利用，是進(jìn)行次生代謝物質(zhì)離體調(diào)控和大規(guī)模生產(chǎn)的良好體1．1試驗材料系供試花生品種：魯花9號、豐花1號、花育收稿日期：2014—08
7、—01基金項目：科技部“863”項目(2006AA100106)“優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)多抗油菜和花生分子育種技術(shù)研究與品種創(chuàng)新”；科技部作物種業(yè)科技工程(2011BAD35B04)作者簡介：任艷(1979一)，女，山東蘭陵人，助理研究員，碩士，主要從事花生組織培養(yǎng)技術(shù)研究。E—mail：cangry@sohu．con$通訊作者：袁美(1972一)，女，湖北公安人，研究員，博士，主要從事花生生物技術(shù)研究。E—mail：yuanbeauty@126．con第1期任艷，等：不同發(fā)根農(nóng)桿菌誘導(dǎo)花生發(fā)根研究l52O、魯花11、花育22。所用發(fā)根農(nóng)
8、桿菌：$22、Ar～46．84％，Ar一1最低為32．81％。說明發(fā)根農(nóng)桿1、Ar一2、9402、94022。菌94022最適宜誘導(dǎo)花生外植體發(fā)根。1．2試劑與培養(yǎng)基2．2不同花生外植體的發(fā)根誘導(dǎo)試劑有乙酰丁香酮、頭孢霉素、卡那霉素、利由表1可看出，5種花生外植體均可誘導(dǎo)出福平；培養(yǎng)基為M
