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《層析法分離純化納豆激酶-論文.pdf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、食品科技2O13年第38卷第O鏞FOODSCIENCEANDTECH^IoLoGY提取掬與應用層析法分離純=jl納激酶徐慧,吳暉,尹志娜,賴富饒(華南理工大學輕工與食品學院,廣州510640)摘要:通過對納豆激酶分離純化方法的研究,得出:納豆激酶發(fā)酵液經(jīng)離心、30%-70%硫酸銨分段鹽析沉淀、SephadexG一50凝膠層析和QAE—SephadexA一50離子交換層析后,得到的酶液經(jīng)SDS—PAGE電泳檢驗為單一條帶,分子量在27—28ku之間。本純化方法的回收率達25.07%,純化倍數(shù)為13.09。關鍵詞:納豆激酶;分離純化;玉
2、米烯酮;凝膠層析;離子交換層析中圖分類號:R284.2文獻標志碼:A文章編號:1005—9989(2013)04—0241—04SeparationandpurificationofnattokinasebychromatographyXUHui,WUHui,YINZhi—an,LAIFu—rao(CollegeofLightIndustryandFoodScience,SouthChinaUniversityofTechnology,Guangzhou510640)Abstract:Inordertoobtainhighpurit
3、ynattokinase,someseparationandpurificationtechniqueswereexplored.Theoptimizedprocessincludes:removingcellsbycentrifugatiOn,30%70%saturationamm0niumsulfateprecipitation.gelfiltrationchromatographywithSephadexG-50andion—exchangechromatographywithQAE-SephadexA一50.Thepurif
4、iedenzymeshowedasingleproteinbandintheSDS—PAGEanditsmolecularweightwas27—28ku.Thepurificationfactorandactivityrecoveryofthenattokinaseare13.09timesand25.07%.respectively.Keywords:nattokinase;separationandpurification;zearalenone;gelchromatography;ion-exchangechromatogr
5、aphy收稿日期:2012—09—17通訊作者作者簡介:徐慧(1988-),女,吉林人,碩士研究生,研究方向為食品質量與安全?!?7]RichardJSanten,LawrenceDemers,SusanOhorodnik,王成章,葉建中,鄭光耀,等.分子短程蒸餾和重結晶分離eta1.Superiorityofgaschromatography/tandemmass銀杏葉甾醇類化合物研究[J].林產(chǎn)化學與工業(yè),2008,28spectrometryassay(GC/MS/MS)forestradiolformonitoring(2)
6、:43-47ofaromataseinhibitortherapy[J].Steroids,2007,72:666—王煥民,曹宗巽.氣相色譜一質譜法分離鑒定胡桃花粉中671的甾類激素【J】.植物生理學報,1986,12(3):218—223241‘食品科技FOODSCIENCEANDTECHNOLOGY2013~第38卷第蝴心腦血管疾病是人類健康和生命最大威脅之1.2.3硫酸銨分段鹽析分別取10mL發(fā)酵上清液一,溶解血栓是治療這類疾病的重要手段,近年加入不同量的硫酸銨達到不同的飽和度f20%、來研制抗血栓藥物已成為醫(yī)藥界研究熱點。納
7、豆30、3540、50606570激酶(Nattokinase,NK)是一種由納豆菌或納豆枯草75%、80%),4℃放置過夜后,12000×gN一1~,30桿菌產(chǎn)生的堿性絲氨酸蛋白酶,日本Sumi等i1】于min。離心所得沉淀分別用10mL10mmol/LpH7.41987年首次從日本傳統(tǒng)食品納豆中發(fā)現(xiàn)并命名。的磷酸鹽緩沖液溶解。分別測定鹽析上清液和沉納豆激酶具有很強的纖溶活性,能直接作用于纖淀溶解液的納豆激酶活性,以確定鹽析方法。溶蛋白,也能激活體內(nèi)纖溶酶原,增加內(nèi)源性溶1.2.4SephadexG一50層析將緩沖液復溶的酶液纖酶
8、的含量,具有降血壓、抗氧化、抗腫瘤、溶離心后上SephadexG一50凝膠層析柱(15mm×400解血栓等醫(yī)學功效。與其他溶栓類藥物相比,mm)。柱體積60mL,上樣量3mL,流速0.5mL/具有安全性好、成本低、纖溶活性強、作用時間