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《多重PCR快速診斷豬偽狂犬病毒、豬圓環(huán)病毒2型與豬細(xì)小病毒方法的建立-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)第43卷第1期JournalofFujianA~culmmandForestryUniversity(NaturalScienceEdition)2014年1月多重PCR快速診斷豬偽狂犬病毒、豬圓環(huán)病毒2型與豬細(xì)小病毒方法的建立謝燕婷’,鄭敏,石磊。,王隆柏,張志剛’(1.廈門銀祥集團(tuán)有限公司肉食品安全生產(chǎn)技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,福建廈門361100;2.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,福建福州350013;3.華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院,廣東廣州510640)摘要:利用PrimerPremier5.0及DNAstar軟件對(duì)豬偽狂犬病毒gB基因、豬
2、圓環(huán)病毒2型ORF2基因和豬細(xì)小病毒VP2基因的保守區(qū)進(jìn)行引物設(shè)計(jì),選出擴(kuò)增序列為豬偽狂犬病毒(373bp)、豬圓環(huán)病毒2型(430bp)和豬細(xì)小病毒(495bp)的3對(duì)引物.敏感性和特異性試驗(yàn)結(jié)果表明,mPcR對(duì)3種病毒的核酸檢測(cè)限量從豬偽狂犬病毒至豬細(xì)小病毒分別為1.62×l0~、1.47×10和1.28×10~tag,對(duì)滅菌雙蒸水、豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒eDNA和豬瘟病毒eDNA的mPCR擴(kuò)增結(jié)果均為陰性.mPCR可作為臨床上豬偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒2型感染和豬細(xì)小病毒病的病原學(xué)快速診斷方法.關(guān)鍵詞:多重PCR方法;豬偽狂犬病病毒;豬圓環(huán)病毒2型;豬細(xì)小病毒中圈分類
3、號(hào):s855.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1671-5470(2014)01-0060-05EstablishmentofmultiplexPCRforrapiddetectionofporcinepseudorabiesvirus.porcinecircovirustypeⅡandporcineparvovirusXIEYah—ting,ZHENGMin2SH[Lei’,WANGLong—bai2ZHANGZhi-gang,,(1.StateKeyLaboratoryofFoodSafetyTechnologyforMeatProducts,XiameuYinxiangGr
4、oupCO,Lid,Xiameu,F(xiàn)ui361100,China;2.InstituteofAnimalHusbandryandVe~finaryMedicine,F(xiàn)ujianAcademyofA~culturalSciences,F(xiàn)uzhou。Fuiian350013,China;3.CoHegeofLightIndustryandFoodSciences,SouthChinaUniversityofTechnology,Guangzhou,Guangdong510640,China)Abstract:AccordingtothegenesequencesinGenBan
5、kofPRV,PCV2ORF2,PPVVP2,specificprimersforeachofthreecommonDNAvirusesweredesignedbyPrimerPremier5.0andDNAst~software,andthreespecifcbands,res1ely,PRV(373bp),PCV2(430Sp),PPV(495bp)wereamplified.ItWaSshownthatmPCRwasabletodetecta8l訊lea81.62×10一,1.47×10and1.28×10ngofeachviraltargetthm1lgIItheh
6、ighlysensitiveandspecifcityassay.AnddeteetiousofddH20,PRRSV,SVwerenegativeatthe8allletime.Inconclusion,mPCRwouldbeUs~ulinroutinemoleculardiagnosisandepidemiologyofPRV,PCV2andPPV.Keywords:n1PCR;PRV;PCV2;PPV從病料中分離出的具致病作用的病毒稱為豬圓環(huán)病毒2型(porcinecircovirustype2,PC~2),而從傳代細(xì)胞系PK-l5中分離到的圓環(huán)病毒稱為豬圓環(huán)病毒毒1
7、型(porcinecircovirustype1,PCVI)¨.PCV2感染后會(huì)出現(xiàn)斷奶仔豬多系統(tǒng)消耗綜合征(postweaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)、豬皮炎腎病綜合征、豬呼吸系統(tǒng)混合疾病、繁殖障礙癥.現(xiàn)“豬圓環(huán)病毒病”(porcineeircovirusdiseases,PCVD)的含義是指群體病或是與PCV2相關(guān)的疾病】.PCV2是引起PMWS發(fā)生的主要原因,但其他病原如PPV等的混合感染也具有重要的協(xié)同致病性J.偽狂犬病病毒(pseudorabiesvires