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《豬偽狂犬病毒納米pcr檢測(cè)方法的建立-中國(guó)動(dòng)物檢疫》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、豬偽狂犬病毒納米PCR檢測(cè)方法的建立1，2111121張悅勇，南文龍，秦立得，鞏明霞，吳發(fā)興，單 虎，陳義平（1.中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032；2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)，山東青島 266109）摘 要：[目的]快速靈敏檢測(cè)豬偽狂犬病毒（PRV）[方法]根據(jù)PRVgB基因設(shè)計(jì)特異性引物，建立了PRV納米PCR檢測(cè)方法。[結(jié)果]PRV納米PCR方法的最低檢出限為10拷貝/μL，其敏感性比未添加納米金的對(duì)照PCR提高100倍；建立的納米PCR與豬細(xì)小病毒、豬圓環(huán)病毒Ⅱ型、豬繁殖與呼吸綜合征病毒等常見豬病毒性病原均無交叉反應(yīng)。
2、應(yīng)用納米PCR和PRV國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中的PCR方法，對(duì)2014—2016年期間采集自17個(gè)省市發(fā)病豬場(chǎng)的148份臨床樣品進(jìn)行平行檢測(cè)，PRV納米PCR的陽(yáng)性檢出率為49.3%（73/148），PRV國(guó)標(biāo)PCR方法的陽(yáng)性檢出率為23.6%（35/148），并且PRV納米PCR檢測(cè)為陽(yáng)性，而PRV國(guó)標(biāo)PCR方法檢測(cè)為陰性的38份樣品，測(cè)序結(jié)果均確認(rèn)為PRV陽(yáng)性。[結(jié)論]本研究建立的納米PCR檢測(cè)方法敏感特異，可用于豬偽狂犬病的病原學(xué)檢測(cè)。關(guān)鍵詞：豬偽狂犬病毒；納米PCR；gB基因中圖分類號(hào)：S852.651 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：10
3、05-944X（2017）03-0102-04DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2017.03.026ANanoPCRAssayforDetectionofPseudorabiesVirus1，2111121ZhangYueyong，NanWenlong，QinLide，GongMingxia，WuFaxing，ShanHu，ChenYiping（1.ChinaAnimalHealthandEpidemiologyCenter，Qingdao，Shandong266032；2.QingdaoAgricultu
4、ralUniversity，Qingdao；Shandong266109）Abstract：[Objective]InordertodeveloparapidandsensitivemethodfordetectingPseudorabiesvirus（PRV）.[Methods]AnanoPCRassayfordetectionofPRVwasdevelopedwithapairofspeci?cprimersthatweredesignedbasedonsequenceofgBgene.[Results]Resultsshowe
5、dthedetectionlimitofthisassaywas10copies/μL，sensitivityofwhichwas100timeshigherthanconventionalPCRassaythatnogoldnanoparticlewasadded.Goodspeci?citywasalsoidenti?edthattherewasnocrossreactionwithothercommonviralpathogensofswinesuchasporcineparvovirus（PPV），porcinecircov
6、irustype2（PCV2），porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus（PRRSV）.UsingPRVnanoPCRandnationalstandardPCRtestofgBgene，148clinicalsamplescollectedfrom17differentareasduring2014-2016wereconductedparalleldetection.ThepositiveratesbynanoPCRandnationalstandardPRVwere43.5%
7、（73/148）and27.2%（35/148）.38samplestestednegativebynationalstandardPRVpresentedapositiveresultwhenusingthemethodofnanoPCR，whichwereconsistentwithDNAsequencing.[Conclusion]TheestablishedPRVnanoPCRmethodwasapplicableforpathogenicdetectionofPRVduetoitshighsensitivityandgoo
8、dspeci?city.Keywords：Pseudorabiesvirus；nanoPCR；gBgene；detection豬偽狂犬病毒（Pseudorabiesvirus，PRV）是敏感的PRV檢測(cè)方法，對(duì)該病的防控具有重要意常見
