體外構(gòu)建內(nèi)皮抑素基因真核表達載體抑制血管生成-論文.pdf

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1、中國組織工程研究18卷第292014—07—09出版ChineseJoumalofTissueEngmeefingResearchJuly9,2014Vo1.18,No.29www.CRTER.0憎體外構(gòu)建內(nèi)皮抑素基因真核表達載體抑制血管生成邵佳甲’,于音,姜濤。(’長春職業(yè)技術(shù)學院食品與生物技術(shù)分院,吉林省長春市130033;吉林大學白求恩第三醫(yī)院,神經(jīng)外二科,。血管外科,吉林省長春市130033)文章亮點:1已有研究構(gòu)建了重組人內(nèi)皮抑素(recombinanthUmanEndostatin,thES)l~畢赤酵母真核表達系統(tǒng);觀察邵佳甲,女,1982

2、年生,thES恩度(Endostar)對角膜新生血管及裸鼠乳腺癌MCF-7的抑制作用。吉林省長春市人,漢族,2實驗利用內(nèi)皮抑素能強烈抑制血管生成的特性,構(gòu)建了具有高效表達endostatin蛋白的重組真核表達質(zhì)粒2008年吉林農(nóng)業(yè)大學生物工程專業(yè)畢業(yè),碩士,pcDNA3.Endo,旨在通過體外實驗證實endostatin蛋白能被有效分泌,并強烈抑制血管生成。主要從事制藥等相關(guān)生物3實驗成功構(gòu)建thES畢赤酵母真核表達系統(tǒng),使高效表達內(nèi)皮抑素蛋白成為可能,為thES能有效抑制兔角技術(shù)的教學與研究。膜血管生成及裸鼠乳腺癌的生長,提供了臨床應用前景的依據(jù)。關(guān)鍵

3、詞:通訊作者:于音,博士,主治醫(yī)師,吉林大學白求組織構(gòu)建:趣管內(nèi)皮細瞻:內(nèi)皮抑素;甌管生或:人曉靜詠血管內(nèi)皮細瑰:閫充質(zhì)于細跑質(zhì)粒:轉(zhuǎn)染恩第三醫(yī)院神經(jīng)外科,吉主題詞:林省長春市130033內(nèi)皮抑素類;內(nèi)皮細跑;新生血管化生理性:聞質(zhì)干細跑doi:l03969~issn2095-4344摘要2014.29.008Ihtp:/hvww.crter.o~g】背景:膠質(zhì)瘤的根除治療至今仍是一大難題,抗血管生成治療膠質(zhì)瘤有望成為新的有效途徑。目的:證實內(nèi)皮抑素在體外對血管生長的抑制作用,為今后利用其抑制腫瘤生長奠定實驗室基礎(chǔ)。中圖分類號:R318方法:取Wista

4、r大鼠肝臟,提取mRNA后利用RT-PCR獲取內(nèi)皮抑素cDNA片段。堿裂解法小量提取質(zhì)粒文獻標識碼:ApcDNA3。重組質(zhì)粒pcDNA3一Endo的構(gòu)建。重組pcDNA3-Endo真核表達載體轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞。RT-PCR文章編號:2095-4344及WesternBlot檢測內(nèi)皮抑素基因的表達。MTT法檢測ECV.304細胞增殖抑制實驗。體外實驗共分成4個(2014)29-04636-06稿件接受:2014-06-26組:重組質(zhì)粒組、空載質(zhì)粒組、脂質(zhì)體對照組及空白對照組。結(jié)果與結(jié)論:成功構(gòu)建pcDNA3一Endo重組真核表達質(zhì)粒,pcDNA3.En

5、do質(zhì)粒能在體外有效轉(zhuǎn)錄并分泌內(nèi)皮抑素基因,轉(zhuǎn)染了外源pcDNA3-Endo質(zhì)粒的ECV-304細胞增殖明顯受到抑制。結(jié)果提示內(nèi)皮抑素基因能在體外有效抑制血管內(nèi)皮細胞的增殖。邵佳甲.于音.姜濤.體外構(gòu)建內(nèi)皮抑素基因真核表達載體抑裁血管生或中國組織I程磷究.2014.78f29J:4636-4641.ConstructionofpcDNA3一Endoeukaryonexpressionplasmidandangiogenesisinhibition/nvitroShaoJia~ia’,YuYin,JiangTao。(~SchoolofFoodProduct

6、ionTechnologyandBiotechnology,ChangchunVocationalInstituteofTechnology,Changchun130033,JilinProvince,China;DepartmentofNeurosurgerytheThirdAfiliatedHospital(China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity),Changchun130033,JilinProvince,China;。DepartmentofVascularSurgery,theThirdAfiliat

7、edHospital(China.JapanUnionHospitalofJilinUniversity),Changchun130033,JilinProvince,China)AbstractBACKGR0UND:Theeradicationtherapyofgliomaisthemajorproblem.a(chǎn)ndanti-angiogenesistherapyisaShaoJia-jla.Master,Schoolofpotentialtreatmentofglioma.FoodProductionTechnologyandBiotechnology

8、,ChangchunOBJECTIVE:TOconfirmtheinhibiti

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