藥敏試驗及藥敏試驗結(jié)果分析

藥敏試驗及藥敏試驗結(jié)果分析

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1、藥敏試驗及藥敏試驗結(jié)果分析一、藥敏試驗MIC:在與微生物生長速率有關(guān)的特定時間間隔內(nèi),通常是18-24小時,能夠抑制被測菌生長的最低藥物濃度。對倍稀釋的優(yōu)點:操作容易敏感株的MIC呈正態(tài)分布區(qū)分異常(R)與敏感(S)的菌群藥敏試驗折點的建立1.MIC的分布2.藥代動力學和藥效學定MIC的折點3.臨床療效和細菌清除率4.抑菌圈直徑的分布…定抑菌圈折點統(tǒng)計學的線性回歸計算錯誤率:盡可能減少極重要誤差(假敏感率)MIC的分布藥代動力學和藥效學藥代動力學:藥物吸收,分布,代謝,排泄藥效學:藥物對機體的作用時間依賴型(%T>MIC〕:β-內(nèi)酰胺類,大環(huán)內(nèi)酯類濃度依賴型(A

2、UC/MIC比率〕:AGS,FQ這些參數(shù)可用于計算具有最佳藥效的給藥方案MIC與抑菌圈直徑的線性關(guān)系耐藥中介敏感RISLog2.MICD1d2抑菌圈直徑(mm)v抑菌圈直徑與MIC的關(guān)系不同國家的判定折點 -可能不同原因:用藥劑量不同,服藥的間隔不同評價敏感時較保守更強調(diào)檢測出耐藥株(即特定的耐藥群)技術(shù)因素:接種、培養(yǎng)基敏感性分類(NCCLS的定義)敏感(Susceptible)用常規(guī)用量治療有效常規(guī)用藥時達到的平均血藥濃度超過細菌的MIC5倍以上。耐藥(Resistance)用常規(guī)用量治療不能抑制細菌的生長MIC高于藥物在血、體液中可能達到的濃度敏感性分類(

3、2)中介(Intermediate)MIC接近血、體液中藥物的濃度,治療反應率低于敏感株藥物生理濃集部位有效(尿-FQ)加大用藥劑量可能有效緩沖區(qū):防止操作的系統(tǒng)誤差造成重大結(jié)果的判定錯誤藥敏試驗的方法學半定量…紙片擴散法(抑菌圈直徑)MIC法:稀釋法(肉湯、瓊脂)自動化儀法抗生素連續(xù)梯度法(Etest)流式細胞儀藥敏試驗方法的選擇紙片法有獨特之處選藥靈活、便宜、易懂MIC法:商品肉湯法(自動化法)↑可用于厭氧菌、苛氧菌計算機管理快速,但可能有錯誤(如誘導型菌)新藥的評價藥敏試驗方法1(紙片擴散法〕材料:浸有一定Abs的干燥的園濾紙片步驟:制備菌懸液-涂平板-貼

4、紙片-孵育-卡尺測量抑菌圈直徑-判定R、I、S優(yōu)點:選藥靈活、便宜、一個平皿可測多個藥缺點:影響因素多適用于快生長菌、部分苛養(yǎng)菌紙片擴散法-影響因素MIC接種菌量細菌生長率抗生素含量、擴散性平皿厚度溫度,預孵育時間紙片擴散法-標準化NCCLS:美國實驗室標準化委員會(NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards)每年修訂更改包括質(zhì)控新藥的判定標準特殊耐藥性的檢測NCCLS的法規(guī)規(guī)定紙片含量、接種濃度、培養(yǎng)基、平皿厚度、判定標準、質(zhì)控規(guī)定常規(guī)測試報告的抗生素不同的藥判定標準不同不同的菌判定標準也不同常規(guī)測試并報告的

5、藥物分組(1)腸桿菌科綠膿和非腸桿菌科一級氨芐頭孢他啶唑林,慶大慶大,替卡,哌拉二級阿米卡星阿米卡星氨芐/舒,阿莫/克吡肟,哌酮,氨曲南頭孢膚肟,頭霉環(huán)丙,亞胺培南,替卡/克噻肟,曲松,環(huán)丙妥布,磺胺亞胺培南,替卡,哌拉三級氨曲南,頭孢他啶頭孢曲松卡那,奈替,妥布氯霉素,奈替四環(huán)素,氯霉素常規(guī)測試并報告的藥物分組(2)葡萄球菌腸球菌一級苯唑,青霉素青霉素,氨芐二級紅霉素類萬古霉素克林,萬古三級氯霉素慶大常規(guī)測試并報告的藥物分組(3)流感嗜血桿菌肺炎鏈球菌一級氨芐,青霉素青霉素,紅霉素TMP/SMZTMP/SMZ二級頭孢膚肟,噻肟氧氟,四環(huán)素他啶,氯霉素萬古霉素三

6、級阿奇,頭孢克羅氯霉素,利福平環(huán)丙,亞胺培南利福平,四環(huán)素預報用藥(一)測試藥菌名推測其它藥物的敏感性苯唑西林葡萄球菌所有β-內(nèi)酰胺類四環(huán)素所有(除葡多西環(huán)素,米諾環(huán)素萄球菌和不動桿菌〕紅霉素G+球菌羅紅,克拉,阿奇克林霉素所有林可霉素預報用藥(二)測試藥菌名推測其它藥物的敏感性氨芐西林腸球菌青霉素青霉素G葡萄球菌氨芐,美洛,替卡頭孢噻吩腸桿菌科拉定,頭孢氨芐,克羅奈啶酸s腸桿菌科所有FQs萬古霉素s所有替考拉寧s紙片擴散法操作規(guī)程(一)培養(yǎng)基:MH(重復性好,低抑制劑,營養(yǎng)好)厚度:4mmPH:7.2~7.4pH低時,氨基糖甙,大環(huán)內(nèi)酯↓pH高時,青霉素類的活

7、性↑離子濃度(Ca2+,Mg2+)影響氨基糖甙類、四環(huán)素對Pae活性高時,抑菌圈↓;紙片擴散法操作規(guī)程(二)接種:純的新鮮菌落,0.5號麥氏比濁管菌懸液在15分鐘內(nèi)種入平皿內(nèi)紙片中心的間距>=24mm孵育:CO2影響Ags,Tet,Macrolides質(zhì)控:ATCC25922,35218ATCC27853,ATCC25923紙片擴散法結(jié)果的判定1.先看菌名(鑒定到種〕2.不同的藥物使用不同的折點藥名菌名RS菌株1菌株2Pip/Taz綠膿≤17≥1816R30SCAZ綠膿≤14≥1816I19S3.同是S時,偏離敏感折點越高的藥,MIC越低,活性也越高抑菌圈的分布

8、抑菌圈的分布非NCCLS

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