雙抗原夾心法檢測HIV抗體影響因素研究.pdf

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1、現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志第25卷第3期2010年5月JM0dLabMed，Vo1．25，No·3，May·21：)10115雙抗原夾心法檢測HIV抗體影響因素研究張桂芳(冀中能源峰峰集團有限公司總醫(yī)院，河北邯鄲056200)摘要：目的探討雙抗原夾心法檢測HIV抗體的影響因素，提高HIV抗體檢測質(zhì)量。方法用雙抗原夾心法檢測HIV抗體，對同一樣品進行不同血清(非溶血與溶血，非脂濁與脂濁)、不同孵育方式(37℃；枉浴與溫育)、不同血清量(100I與5Oe1)、不同孵育時問(30rain與20min)、顯色終止后不同時聞段比色對測定結(jié)果(以值)

2、的影響。結(jié)果非溶血與溶血稀釋樣品、非脂濁與脂濁稀釋樣品、兩種孵育方式的配對t檢驗，P均>0．05；不同血清量、不同孵育時間的配對t檢驗·P均d0．05；加終止液后立即比色與5rain比色比較P>0．05，與10，15，2O，25，30min比較，P均d0．05結(jié)論溶血、脂濁樣品、不同孵育方式對值影響較小；加血清量減少、孵育時間縮短A值減低，可能導(dǎo)致弱陽性標(biāo)本漏檢；加終止液后5rain以內(nèi)比色結(jié)果比較理想，10min以上比色A值明顯減低，與立即比色比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。關(guān)鍵詞：HIV抗體；溶血；脂濁；孵育方式；血清量；孵育時間；顯

3、色終止后比色時問中圖分類號：R446．62文獻標(biāo)志碼：A文章編號：1671—7414(2010)03—1]【5一O2doi：10．3969／i．issn．1671—7414．2010．03．040艾滋病(AIDS)是由免疫缺陷病毒(HIV)引起比稀釋HIV抗體陽性血清，用于非脂濁與脂濁樣的慢性傳染病，特異性HIV抗體檢測是診斷HIV品的比較，同時測定各樣品的三酰甘油(以TG含感染的主要依據(jù)和有效途徑。目前我國普遍采用雙量表示脂血的嚴(yán)重程度)含量?？乖瓓A心法進行HIV抗體初篩檢測]。雙抗原夾1．2．4HIV抗體陽性樣品的制備：取H

4、IV抗體陰心法為第三代EIIsA試劑，不僅包被抗原高度純性樣品若干份，離心分離血清，分別加入不同量的化，且采用重組和多肽相結(jié)合，大大提高了特異性，HIV抗體陽性血清，稀釋成不同濃度的HIV抗體使漏檢率明顯下降，并可同時檢測IgG，IgM抗陽性樣品，進行不同孵育方式、不同血清量、不同孵體[3]。但抗體檢測仍受多種因素影響，為提高檢測育時間、顯色終止后不同時間段比色的比較。質(zhì)量，我們對溶血、脂濁樣品、孵育方式、血清量、孵1．3統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS14．0軟件進行統(tǒng)計育時間、加終止液后比色時間等對試驗的影響進行學(xué)分析。所有結(jié)果(值)

5、之間的比對采用配對t檢了研究分析。驗，P

6、械廠)，電熱恒溫和脂濁倍比稀釋樣品的HIV抗體，兩組值配對培養(yǎng)箱(上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司)。t檢驗，t一0．597，尸一0．562，結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意1．2方法義。1．2．1樣品來源：HIV抗體陰性樣品來自本院健2．3不同孵育方式對HIV抗體檢測的影響將康體檢者；HIV抗體強陽性樣品一份來自邯鄲市12份HIV抗體陽性樣品每份平行測定2孔(2疾控中心，經(jīng)河北省疾控中心確認(rèn)，56℃30min滅組)，一組孵育方式為37℃水浴箱，另一組孵育方活處理。式為37℃培養(yǎng)箱，其它操作條件相同，對兩組值1．2．2非溶血、溶血稀釋樣品的制備：

7、取HⅣ抗進行配對t檢驗，￡一0．544，尸一0．597，結(jié)果差異無體陰性樣品一份，分離非溶血血清和溶血(凍融法統(tǒng)計學(xué)意義。Hb15g／L)血清，用此血清倍比稀釋(1：2，1：4?2．4不同血清量和不同孵育時間對HIV抗體檢l：4096)HIV抗體陽性血清，用于非溶血與溶血測的影響將30份H1V抗體陽性樣品每份平行樣品的比較，同時測定溶血樣品的Hh濃度。測定3孔(3組)，一組正常操作(血清100l，孵育1．2．3非脂濁、脂濁稀釋樣品的制備：用HIV抗30min)；一組血清5Ol、孵育30min；另一組血清體陰性的非脂濁、脂濁(TG

8、6．5mmol／L)血清倍100l，孵育20min，其它操作條件相同，測定作者簡介：張桂芳(1964一)，女．本科，副主任技師，主要從事臨床免疫學(xué)檢驗，Tel：13171858102，E．mailyz～doctor@163．com。116現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志第25卷