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《溶血對(duì)雙抗原夾心法檢測(cè)HIV抗體的影響.pdf》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志2010年第26卷第13期·檢驗(yàn)與臨床·溶血對(duì)雙抗原夾心法檢測(cè)HIV抗體的影響張桂芳摘要目的:探討溶血對(duì)雙抗原夾心法檢測(cè)HIV抗體的影響。方法:制備HIV抗體陰性非溶血和配對(duì)溶血(Hb2—7g/L)血清48份。另制備HIV抗體陰性非溶血和重度溶血(Hb80g/L)血清l份、HIV抗體陽性非溶血和重度溶血(Hb108g/L)血清l份,用HIV抗體陰性血清對(duì)HIV抗體陰性重度溶血血清、HIV抗體陽性非溶血和配對(duì)重度溶血血清進(jìn)行倍比稀釋,得到不同溶血程度的樣品。測(cè)定HIV抗體.檢測(cè)溶血及不同溶血程度對(duì)HIV抗體的影響結(jié)果:48份HIV
2、抗體陰性非溶血和溶血血清比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(f=0.078,P=0.938);對(duì)HIV抗體陰性重度溶血倍比稀釋血清的A值和Hb濃度做相關(guān)性分析,兩組間無相關(guān)性r=一0.382,P=0.221);對(duì)HIV抗體陽性溶血、非溶血倍比稀釋血清的A值進(jìn)行比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(£=0.236,P=0.817)。AA(溶血血清A一非溶血血清A)與Hb濃度作相關(guān)性分析.兩組間無相關(guān)性r=0.149,P=0.644)。結(jié)論:溶血對(duì)雙抗原夾心法檢測(cè)HIV抗體無影響。但是如果試劑反應(yīng)孔包被、封閉的質(zhì)量差可能引起Hb的非特異吸附而造成假陽性,故日常工作中要盡
3、量避免樣品溶血,嚴(yán)格按照全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范操作關(guān)鍵詞HIV抗體:溶血:雙抗原夾心法檢測(cè)HIV抗體是診斷AIDS和HIV感染的有<1為陰性。效途徑.由于ELISA靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)1.3.2HIV抗體陰性非溶血和溶血稀釋樣品的制便、試劑穩(wěn)定易保存等優(yōu)點(diǎn),是HIV抗體篩查的常備取HIV抗體陰性樣品,分離非溶血血清,剩余用方法之一?,目前國(guó)內(nèi)外主要使用第三代試劑標(biāo)本用凍融法分離溶血血清(Hb80g/L,為排除凍(雙抗原夾心法)。日常工作中經(jīng)常遇到溶血樣融的影響。分離的非溶血血清與溶血血清相同條件品.溶血對(duì)許多檢驗(yàn)項(xiàng)目都會(huì)產(chǎn)生不同程度的
4、影凍融)。用HIV抗體陰性非溶血血清對(duì)HIV抗體陰響。在ELISA試驗(yàn)中溶血對(duì)HIV抗體的影響有不性溶血血清作倍比稀釋(原液、1:2、?1:1024),制同的報(bào)道[3-4]。但溶血的嚴(yán)重程度與A(Absoqbance)值備不同溶血程度的HIV抗體陰性血清,檢測(cè)非溶呈怎樣的關(guān)系報(bào)道較少,筆者就溶血及溶血不同血血清和溶血稀釋血清的HIV抗體,測(cè)定A值,同程度對(duì)雙抗原夾心法檢測(cè)HIV抗體的影響進(jìn)行了時(shí)測(cè)定稀釋標(biāo)本的Hb濃度。另取48份HIV抗體分析。陰性樣品.分離非溶血血清,然后通過人為機(jī)械溶1材料與方法血分離溶血血清(Hb2—7g/L),檢測(cè)非
5、溶血血清1.1試劑HIV抗體第三代(雙抗原夾心法)診斷和溶血血清的HIV抗體,測(cè)定A值。試劑盒、HIV抗體質(zhì)控血清購(gòu)自北京萬泰有限公司。1.3.3HIV抗體陽性非溶血和溶血稀釋樣品的制1.2儀器MULTISKANMK3型酶標(biāo)儀,賽默飛世備取HIV抗體陰性標(biāo)本,待血液凝固后去除血爾儀器有限公司;DEM一3型自動(dòng)洗板機(jī),北京拓普凝塊,加人HIV抗體強(qiáng)陽性滅活血清,充分混勻,分析儀器有限公司:電熱恒溫水溫箱,上海醫(yī)療器制備HIV抗體較強(qiáng)陽性標(biāo)本,離心分離非溶血血械廠:XT.1800全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀,sysmex公司。清.剩余標(biāo)本用凍融法分離溶血
6、血清(Hb108g/L,1.3方法非溶血血清與溶血血清相同條件凍融)。再用同一1.3.1HIV抗體檢測(cè)雙抗原夾心法,操作按HIVHIV抗體陰性血清對(duì)HIV抗體較強(qiáng)陽性非溶血和抗體診斷試劑盒說明書進(jìn)行,波長(zhǎng)450nm、參考波溶血血清作倍比稀釋(原液、1:2、?1:2048),進(jìn)行長(zhǎng)630nm讀取吸光度值(A)。以吸光度值/臨界值HIV抗體檢測(cè),測(cè)定A值,同時(shí)測(cè)定各標(biāo)本Hb濃[S/CO(Cutof)]判斷結(jié)果,S/CO≥1為陽性,S/CO度。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS14.0軟件進(jìn)行配對(duì)資料t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)A值doi
7、:10.3969~.issn.1o06—5725.2010.13.066和溶血程度進(jìn)行相關(guān)分析,P<0.05為A值與溶血作者單位:056200河北省邯鄲市,冀中能源峰峰集團(tuán)有限公司總醫(yī)院程度有相關(guān)性。實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志2010年第26卷第13期24332結(jié)果高[51。2.1溶血對(duì)HIV抗體陰性樣品的影響同時(shí)檢測(cè)通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),HIV抗體陰性非溶血樣品與溶HIV抗體陰性非溶血樣品和不同程度溶血樣品的血稀釋樣品的A值差別較小(圖1),對(duì)A值和HbHIV抗體,A值隨Hb濃度變化的結(jié)果見圖1。對(duì)A濃度進(jìn)行相關(guān)性分析,r=~0.382,P=0.221>0.0
8、5,值和Hb濃度做相關(guān)性分析。兩組間無相關(guān)性(r=說明A值與Hb濃度無相關(guān)性。48份HIV抗體陰一0.382,P=0.221)。同時(shí)檢測(cè)48份HIV抗體陰性性非溶血與溶血樣品的配