酸性染料比色法測(cè)定斜脈暗羅莖、葉和皮中總生物堿含量-論文.pdf

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1、江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)2014年第42卷第1期一263一劉冰晶，曾靖，李超，等．酸性染料比色法測(cè)定斜脈暗羅莖、葉和皮中總生物堿含量[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42(1)：263—264酸性染料比色法測(cè)定斜脈暗羅莖、葉和皮中總生物堿含量劉冰晶，曾靖，李超，杜兵，曾發(fā)揮，曾雪亮(1．贛南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，江西贛州341000；2．江西省腦血管藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西贛州341000)摘要：以小檗堿為對(duì)照品，在pH值為4．5的醋酸一醋酸鈉緩沖溶液中，以溴甲酚綠指示液為顯色劑，利用分光光度法在628nm測(cè)定斜脈暗羅中總生物堿含量，結(jié)果表明，小檗堿對(duì)照品在2．0～12．0mg

2、／L范圍內(nèi)濃度(c)與吸光度(D)呈線性關(guān)系，回歸方程為D=0．0082C+0．1671，r=0．9991；斜脈暗羅莖、葉和皮中的總生物堿含量分別為0．2671％、1．4737％和0．7908％。分光光度比色法測(cè)定總生物堿含量操作簡便，結(jié)果可靠，重復(fù)性好，可用于斜脈暗羅總生物堿含量的測(cè)定。關(guān)鍵詞：斜脈暗羅；總生物堿；紫外分光光度法；莖；葉；皮中圖分類號(hào)：R284．2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1002—1302(2014)01—0263—02斜脈暗羅(Polyalthiaplagioneura)屬番荔枝科(Annonaee—?jiǎng)蚣吹?0mg／L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取小

3、檗堿對(duì)照品溶液，顯色后進(jìn)ae)暗羅屬(Polyalthiagenus)，系我國特有種，分布于云南、廣行可見一紫外全波長掃描，結(jié)果表明對(duì)照品溶液在628nm處東、廣西南部及海南?，為海南優(yōu)勢(shì)種。國內(nèi)外學(xué)者從暗有最大吸收峰。經(jīng)多次重復(fù)，峰形一致且空白對(duì)照無干擾，故羅屬20多種植物中得到了生物堿、萜類等多種類型化合選擇628nm作為樣品測(cè)定的波長。取標(biāo)準(zhǔn)溶液1．2、2．4、物“，從斜脈暗羅中分離得到生物堿類化合物marcanineA3．6、4．8、6．0、7．2mL分別置于20mL容量瓶中，用三氯甲烷和少量其他化合物一，但有關(guān)斜脈暗羅總生物堿含量的測(cè)稀釋至1

4、0mL，加入pH值為4．5的醋酸一醋酸鈉緩沖液定未見報(bào)道。本研究以小檗堿為對(duì)照品，在pH值為4．5的5．0mL和0．04％溴甲酚綠溶液2．0mL，劇烈振搖5min，靜醋酸一醋酸鈉緩沖溶液中，以溴甲酚綠為顯色劑，在628nm置30rain；取下層液5mL，加入0．01mol／L氫氧化鈉一乙醇波長下，利用分光光度法測(cè)定斜脈暗羅總生物堿含量，為保護(hù)溶液1．0mL，搖勻，于628nm處測(cè)吸光度。以小檗堿含量為和合理利用藥用植物資源斜脈暗羅提供科學(xué)依據(jù)。橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。1．2．3空白溶液的制備取10mL三氯甲烷溶液于20mL1材料與方法容量瓶

5、中，加入5．0mL醋酸一醋酸鈉緩沖液和0．04％溴甲1．1儀器、試劑與材料酚綠溶液2mL，劇烈搖動(dòng)5min，然后靜置30min；取下層液紫外可見分光光度計(jì)(尤尼柯uV一4802)；98～C一數(shù)顯5mL，加入0．olmol／L氫氧化鈉一乙醇溶液1．0mL搖勻，作控溫電熱套(天津泰斯特)；索式提取器；電子天平；三氯甲烷為空白溶液。(AR)；溴甲酚綠(AR)；小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品(成都領(lǐng)航者生物)；pH1．2．4斜脈暗羅總生物堿的提取分別準(zhǔn)確稱取斜脈暗羅值為4．5的醋酸一醋酸鈉緩沖液；0．01mol／L氫氧化鈉溶液莖0．5g、葉0．25g和皮0．5g，用適量氨水濕潤

6、，密封放置(用乙醇溶解)。30min，索式提取2h，將提取液置于碘化鉍鉀溶液經(jīng)薄層層斜脈暗羅采自海南省昌江縣霸王嶺自然保護(hù)區(qū)，由海南析(TLC)至不顯色為止，回收三氯甲烷，殘留物放冷至室溫，師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院鐘瓊芯教授鑒定為Polyalthiaplagio—用三氯甲烷溶解并定容至20mL；取0．2mL于容量瓶中，加neura，標(biāo)本現(xiàn)藏于江西省腦血管藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。三氯甲烷定容至10mL，混勻作為樣品液；取10mL樣品液于1．2試驗(yàn)方法3個(gè)20mL容量瓶中，加入5．0mL醋酸一醋酸鈉緩沖液和參照劉冰晶等的方法并進(jìn)行改良。2mL0．04％溴甲酚綠溶液，劇

7、烈搖動(dòng)5min，然后靜置1．2．1試驗(yàn)溶液配制用0．2mol／L氫氧化鈉滴加冰醋酸，30min；取下層液5mL，加0．01mol／L氫氧化鈉一乙醇溶液調(diào)節(jié)pH值為4．5，即得醋酸一醋酸鈉緩沖溶液；稱取溴甲酚1．0mL，搖勻，于628nm處測(cè)吸光度，計(jì)算生物堿含量。試驗(yàn)綠40mg，加100mLpH值為4．5的醋酸一醋酸鈉緩沖溶液溶重復(fù)3次。解，過濾，即得0．o4％溴甲酚綠溶液。2結(jié)果與分析1．2．2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作稱取干燥至恒重的小檗堿對(duì)照品2mg，置于100mL容量瓶中，用三氯甲烷定容至100mL，搖2．1標(biāo)準(zhǔn)曲線方程經(jīng)過統(tǒng)計(jì)處理，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為

8、：D=0．0082C+0．1671，相關(guān)系數(shù)r=0．9991，線性范圍為2．0—12．0mg／