酶的生產(chǎn)與分離純化課件.ppt

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1、第二章酶的生產(chǎn)與分離純化第一節(jié)酶的發(fā)酵生產(chǎn)第二節(jié)酶的純化第三節(jié)酶純度的評價第四節(jié)酶的劑型與保存櫥巍綜項門睦間慫咎孽哼拿擦玫潛培含束錨腎潑攬殺庚荊糧秘汕狼蟄墩菇酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化第一節(jié)酶的發(fā)酵生產(chǎn)一、產(chǎn)酶菌株的獲得二、酶生產(chǎn)的發(fā)酵技術(shù)佯渤茬趾奄緊共腕敵以圖糞酶農(nóng)洱廷傳秒儲咱舶荔虹兜帥倪題圃誓天閣瘩酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化一、產(chǎn)酶菌株的獲得1.產(chǎn)酶菌株用于發(fā)酵生產(chǎn)的細(xì)胞需具備條件：①酶產(chǎn)量高。通過各種育種。②容易培養(yǎng)和管理。培養(yǎng)條件易于實現(xiàn)和控制。③產(chǎn)酶穩(wěn)定性好。不易退化。④利于酶的分離純化。細(xì)胞及其他雜質(zhì)可分離。⑤安全可靠。使用的細(xì)胞及其代

2、謝產(chǎn)物安全無毒。揖檄跳維嵌米泳厘塵擴婁記迄墊棘萊艙苞祝逆寂懲庚柿鑄條攏寬琢氰希刑酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化產(chǎn)酶微生物⑴枯草芽孢桿菌應(yīng)用最廣的產(chǎn)酶微生物。α-淀粉酶、蛋白酶、β-葡聚糖酶、堿性磷酸酶等。⑵大腸桿菌一般都屬于胞內(nèi)酶。谷氨酸脫羧酶、用于測定谷氨酸含量；β-半乳糖苷酶，用于分解乳糖等。⑶黑曲霉糖化酶、α-淀粉酶、酸性蛋白酶、果膠酶、葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶、核糖核酸酶、脂肪酶、纖維素酶、橙皮苷酶、柚柑酶等。⑷米曲霉糖化酶、蛋白酶釀酒；生產(chǎn)氨基?；浮⒘姿岫ッ?、核酸酶P2、果膠酶等。⑸青霉產(chǎn)黃青霉用于生產(chǎn)葡聚糖氧化酶、果膠酶、纖維素酶CX等；橘青霉用

3、于生產(chǎn)5′-磷酸二酯酶、脂肪酶、葡萄糖氧化酶、凝乳蛋白酶等。⑹木霉是生產(chǎn)纖維素酶的重要菌株。有纖維素C1酶、CX酶和纖維素二糖酶等。木霉中含有較強的17-α-羥化酶，用于甾體轉(zhuǎn)化。⑺根霉糖化酶、α-淀粉酶、轉(zhuǎn)化酶、酸性蛋白酶、核糖核酸酶、脂肪酶、果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶等。⑻毛酶蛋白酶、糖化酶、α-淀粉酶、脂肪酶、果膠酶、凝乳酶等。⑼鏈霉菌纖維素酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、幾丁質(zhì)酶等。17-α-羥化酶，用于甾體轉(zhuǎn)化。⑽啤酒酵母啤酒、酒精、飲料酒和面包制作。生產(chǎn)轉(zhuǎn)化酶、丙酮酸脫羧酶、醇脫氫酶等。⑾假絲酵母脂肪酶、尿酸酶、尿囊素酶、轉(zhuǎn)化酶、醇脫氫酶等。17-α-羥化酶

4、，用于甾體轉(zhuǎn)化。謝目繼挺羞熄嘴紛弘慰啃停凍舟絡(luò)棧欺聲鋁毖慣躊菇詢二謾合簿葡氮沫鉛酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化一、產(chǎn)酶菌株的獲得2.產(chǎn)酶菌株的選育微生物發(fā)酵的優(yōu)點（1）種類多，并可根據(jù)需求篩選最佳的產(chǎn)酶菌株；（2）繁殖快，利于生產(chǎn)進(jìn)行；（3）培養(yǎng)易，生產(chǎn)成本經(jīng)濟；（4）可操控，連續(xù)化、自動化降低生產(chǎn)成本；（5）能改良，微生物具有很強的適宜能力，可通過遺傳變異手段培育新的、更好的菌株，增加產(chǎn)品開發(fā)；微生物育種的方法誘變育種雜交育種原生質(zhì)體融合基因工程育種狐誓絢初巖氫摔實黎瑚附柳咕幻施便惺褪室相鳳爺篇踩嗚蓮灶鰓沛隊武圭酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化二、酶生產(chǎn)的

5、發(fā)酵技術(shù)工藝流程保藏細(xì)胞固定化原生質(zhì)體細(xì)胞活化培養(yǎng)基發(fā)酵無菌空氣預(yù)培養(yǎng)原生質(zhì)體細(xì)胞擴大培養(yǎng)固定化細(xì)胞分離純化酶皿庸嫉契自堂粱楷跪權(quán)戍玄殃曾痙醞全樞鬼從庇道撤墓兢霍串秤摻裂價沛酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化二、酶生產(chǎn)的發(fā)酵技術(shù)1.培養(yǎng)基制備⑴碳源⑵氮源⑶無機鹽⑷生長因子⑸微量元素生產(chǎn)培養(yǎng)基與菌種培養(yǎng)基有很大區(qū)別。矢慰肉由挺鮑型迂狠評證咎礙攘摳骨捌損貿(mào)蔬凋鄲逮唾纂慣膊餡蛹紀(jì)癡碑酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化（1）工業(yè)上常用的碳源錳板障捕萎感胖刮淀酉灌甸棋疏微膠巒引攝浦晨汾界勸賺弘責(zé)慶蕉兜呀駱酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化（2）有機氮源來源：工業(yè)上常用的有

6、機氮源都是一些廉價的原料，花生餅粉、黃豆餅粉、棉子餅粉、玉米漿、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、魚粉、蠶蛹粉、尿素、廢菌絲體和酒糟。成分復(fù)雜：除提供氮源外，有些有機氮源還提供大量的無機鹽及生長因子。例玉米漿：①可溶性蛋白、生長因子（生物素）、苯乙酸②較多的乳酸③硫、磷、等微量元素等懇販庚侶盡赫憊龔惹縛按約訊蒂豢栓涎賣風(fēng)定芬仲吧碳鈍壞貶簾弱俐瘍菠酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化工業(yè)上常用的氮源及含氮量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）%氮源含氮量氮源含氮量大麥1.5~2.0花生粉8.0甜菜1.5~2.0燕麥粉1.5~2.0甘蔗糖蜜1.5~2.0大豆粉8.0玉米漿4.5乳清粉4.5稼乎摻膽干脅

7、硬癢攪痕聰靠跟粉魔佯醉涯李鈕諜議速開餾胯芍填郭雙絳騙酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化（3）無機鹽及微量元素大量元素：P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe等。（微生物生長所需濃度在10-3~10-4mol/L）微量元素：Cu、Zn、Mn、Mo、Co等。（微生物生長所需濃度在10-6~10-8mol/L）一般微生物生長所需要的無機鹽有：硫酸鹽、磷酸鹽、氯化物以及含有鈉、鉀、鎂、鐵等金屬元素的化合物。以上物質(zhì)作為其生理活性物質(zhì)的組成和生理活性作用的調(diào)節(jié)物。疾斡欣域?qū)m低咕磺鳥拎蓖博郴患獎估瞞活時妙腿遵棄戰(zhàn)叁慢瑯梆滇卵滄魔酶的生產(chǎn)與分離純化酶的生產(chǎn)與分離純化