RNA的定量測定方法.doc

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1、RNA的定量測定——紫外(UV)吸收法一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握紫外線（UV）吸收法測定核酸濃度的原理。2.熟悉紫外分光光度計(jì)的使用方法。二、實(shí)驗(yàn)原理核酸及其衍生物，核苷酸、核苷、嘌呤和嘧啶有吸收UV的性質(zhì)，其吸收高峰在260nm波長處。測得未知濃度核酸溶液的A260nm值，即可以計(jì)算出其中RNA或DNA的含量。該法操作簡便，迅速，并對被測樣品無損，用量也少。三、實(shí)驗(yàn)步驟樣品做適當(dāng)倍數(shù)的稀釋（保證吸光度值讀數(shù)在0.3-0.6），將稀釋液于厚度為1cm的石英比色杯，在260nm波長處測定A值。以蒸餾水做空白。四、計(jì)算式中：△A260為稀釋液在260nm波長處A值讀數(shù)N為稀

2、釋倍數(shù).0.024（或0.020）表示1mg/mlRNA（或DNA）溶液測定的A260值相當(dāng)于0.024。