生物提取用磁性微球的制備及其性能.pdf

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1、化學工程師ChemicalEngineer2010年第9期文章編號:1002—1124(2010)09一OO64—03互!程擁;生物提取用磁性微球的鞠;媳制備及其性能劉曉紅,布和巴特爾,黃波,遲佳龍(黑龍江省化工研究院。黑龍江哈爾濱150078)摘要:磁性微球因其自身兼具高分子微球和磁性粒子的眾多特性,廣泛應(yīng)用在細胞分離、固定化酶、靶向藥物、分析檢測、免疫測定等領(lǐng)域。本文通過化學共沉淀法制備了,o4納米粒子,并采用分散聚合法對其包覆,得到Fe,0/SiO磁性微球。研究結(jié)果表明,通過上述方法制備的磁性微球可以快速、有效的提取生物中的RNA,而且最

2、佳的聚合反應(yīng)溫度為80~C。關(guān)鍵詞:磁性微球;RNA提取;制備中圖分類號:0482.54文獻標識碼:APreparationandpropertiesofmagneticmicrospheresapplicationinbiologicalextractionUUXiao—hong,BUHEButter,HUANGBo,CHIJia—long(HeilongiianglnstitnteofChemicMEngineering,Harbin150078,China)Abstract:Magneticmicrosphereshavethechara

3、cteristicsofpolymermicrospheresandthecharacteristicsofmagneticparticles,itiswidelyusedincellseparation,enzymeimmobilization,drugtargeting,analysisofdetection,immunoassayandotherfields.Fe304nanoparticlesispreparedbyusingchemicalcoprecipitationandthentheirsurfaceismodifiedbydi

4、spersionpolymerization.TheresultsshowthatmagneticmicrospherespreparedbythismethodcanextractRNAexistsinbiologyrapidlyandeffectively.a(chǎn)ndtheoptimumtemperatureis80℃.Keywords:magneticmicrosphere;RNAextraction;preparation磁f生微球在1996年開始出現(xiàn),是將無機磁性粒子與高分子材料結(jié)合形成的一種復(fù)合微球,是新型1納米FeO4的制備及表面修飾

5、功能材料。由于其自身兼具高分子微球和磁性粒子的眾多特陛,故無外加磁場時在溶液中分散均勻、穩(wěn)1.1試劑及儀器FeC13,F(xiàn)eSO4,無水乙醇,NaOH,NH3·H20,丙酮,定,加外磁場則可簡單快速分離,可以通過共聚,表面改性賦予其表面多種反應(yīng)性功能基團,具有良好無水乙醇,正硅酸乙酯,檸檬酸,均為分析純試劑;的生物相容性。它能使傳統(tǒng)繁重的核酸提取過程變實驗室用水均為二次蒸餾水。為自動化,因此,國內(nèi)外研究者紛紛開展對其的研恒溫水浴鍋;真空干燥箱;漩渦振蕩器;紫外分光光度計;磁分離架。究。目前,生物磁珠已在細胞分離、固定化酶、靶向1.2納米Fe3o的

6、制備藥物、分析檢測免疫檢測、抗體和酶類吸附回收等將0.5tool·L-的FeSO4溶液和0.5tool·L-的領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。由于技術(shù)的壟斷,使這種昂貴的FeC1溶液按1:2體積比加入到三頸瓶中,在攪拌核酸分離系統(tǒng)難以在中國普及。如果能研制出這種(400r·min)的同時加入2mol·L-的NaOH溶液,使磁珠會加快核酸提取系統(tǒng)的國產(chǎn)化,降低自動核酸混合液pH值為11,攪拌10min,并升溫到80℃,加提取系統(tǒng)的成本,推動整個有關(guān)基因工程的研究發(fā)入1.5g沉降劑,在80℃下攪拌60min。反應(yīng)完成后展】。本實驗通過化學共沉淀法制備了Fe,O納

7、米用磁場分離沉淀,10rain后,將上層清液倒出。反復(fù)粒子,并采用分散聚合法對其包覆,制備納米Fe,O/數(shù)次,用蒸餾水洗滌至清液為中性。將上述溶液過SiO2磁性微球[”】。濾,得到納米級磁粉。1.3磁粉的表面修飾收稿日期:2010—07—26稱取0.5mol·L-檸檬酸溶液于三頸瓶中,加入作者簡介:劉曉紅(1980一),女,工程師,2003年畢業(yè)于齊齊哈爾大學化學工程與工藝專業(yè),主要從事納米磁性材料方面的研究。5gFeO,用NH3·H20調(diào)節(jié)溶液的pH值約為5.5,在2010年第9期劉曉紅等:生物提取用磁性微球的制備及其性能N保護下磁力攪拌2h

8、。磁陛分離除去上清液,用丙酮從圖1的電泳結(jié)果可以看出,在凝膠中都可以洗2次,然后加入100mL蒸餾水超聲分散30min。再得到兩條帶,帶條都較清晰,帶

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