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《地高辛血藥濃度監(jiān)測(cè)方法的綜述研究.doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、地高辛(digoxin)是臨床治療充血.性心力衰竭(congestiveheartfa訂ure,CHF)的常用藥物，療效較佳。但因其毒副作用大，安全范圍窄，藥動(dòng)學(xué)、藥效學(xué)個(gè)體羌異大，且有治療劑量與屮毒劑量在一定程度上相互重吾的藥動(dòng)學(xué)特性，易發(fā)生中毒反應(yīng)。因此,地高辛是臨床上需要做血藥濃度監(jiān)測(cè)的主要藥物乙一。在臨床治療過程屮及時(shí)監(jiān)測(cè)地高辛的血藥濃度是調(diào)-整給藥方案，維持有效血藥濃度，預(yù)防藥物屮毒的主要方法。對(duì)地高辛血藥濃度監(jiān)測(cè)方法進(jìn)行研究有很強(qiáng)的現(xiàn)實(shí)意義。1?免疫測(cè)定法(IA)1.1?放射免疫測(cè)定法(RIA)RTA法測(cè)定體內(nèi)地高辛血藥濃度基木原理:將
2、標(biāo)記了抗原的放射性核素與受檢標(biāo)木中的抗原同時(shí)競(jìng)爭(zhēng)抗體，檢測(cè)標(biāo)記到的抗原抗體復(fù)合物的放射性強(qiáng)度,推斷并確定地高辛的濃度。其檢測(cè)限可達(dá)0.01ug/L,平均回收率為101.3%,U內(nèi)RSD=3.0%,日間RSD=6.5%［1］。RIA法優(yōu)點(diǎn):檢測(cè)方法相對(duì)簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，敏感性強(qiáng)、精密度好，準(zhǔn)確度佳、具有特異性，檢測(cè)成木較低等。R1A的缺點(diǎn):檢測(cè)時(shí)問較長(zhǎng)，標(biāo)記物的半衰期過短,易受代謝產(chǎn)物的干擾，存在不同程度的放射性污染，試劑盒有效期短且批間RSD偏大等［2］。1.2?酶免疫測(cè)定法(EIA)E1A法是一種非放射性免疫分析技術(shù)，其在放射免疫分析理論的基礎(chǔ)
3、上，用酶標(biāo)記抗原或抗體作為示蹤物,酶標(biāo)記物穩(wěn)定，靈敏度與RIA法接近，靈敏度高，操作簡(jiǎn)便快捷,ETA法在一定程度上克服了RIA放射性危害和標(biāo)記物半衰期短的缺點(diǎn)［3］,具有較強(qiáng)的特異性，有效期長(zhǎng)等特點(diǎn)。1.2.1?酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)?ELISA法靈敏度可高達(dá)0.04ng/mL,是一種非均相免疫分析法的檢測(cè)技術(shù)，有很高的檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性，實(shí)驗(yàn)條件的環(huán)境要求較高，樣品不需做預(yù)處理且需求量較少，僅需5.0uL,有效避免地高辛樣活性物質(zhì)的干擾。缺點(diǎn)主要是人為因素干擾檢測(cè)結(jié)果,酶穩(wěn)定性在孵冇時(shí)間較長(zhǎng)的情況下降低長(zhǎng)時(shí)間容易受到溫度和pH的影響,
4、影響檢測(cè)結(jié)果精確性［4］。1.2.2?克隆酶免疫測(cè)定法(CEDTA)?克隆酶免疫測(cè)定法原理：B-半乳糖廿酶通過DXA技術(shù)被裂解成2個(gè)無活性片段，酶受體和酶供體;兩個(gè)活性片段重組示形成具有催化活性的酶。P-半乳糖廿酶的水解底物氯酚紅-3-D-ntt喃半乳糖廿顯紫紅色，而地高辛的血藥濃度與該酶生成量成正比?？寺∶该庖邷y(cè)定法與放射免疫測(cè)定法具有良好的相關(guān)性，具有較好的可靠性［5］;批內(nèi)和批間變異系數(shù)均低于5%,具有較好的精密度［6］;檢測(cè)速度快,且易于H動(dòng)化操作、無放射性污染。1.3?熒光免疫測(cè)定法(FIA)熒光免疫分析技術(shù)是發(fā)展比較早的一種標(biāo)記免疫技術(shù)
5、，以熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體而進(jìn)行抗原定位，主要應(yīng)用于微量、超微量位置分析測(cè)定。1.3.1?熒光偏振免疫測(cè)定法(FPIA)?熒光免疫測(cè)定法是一種以熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體而進(jìn)行抗原定位的技術(shù)，常用于微量和超微量物質(zhì)的分析測(cè)泄，作用原理：以蛋白競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合原理為基礎(chǔ),利用被測(cè)物質(zhì)屮被測(cè)對(duì)象所具有的偏振光特性進(jìn)行測(cè)量，其不需分離游離及結(jié)合的熒光標(biāo)記物，測(cè)定周期短，無放射性污染。木法樣品預(yù)處理操作簡(jiǎn)單，測(cè)定過穆耗時(shí)較少，靈敏(最小檢出量為0.01ng/mL),誤差范圍約2.57%^4.00%［7］,雅培TDX儀的最低檢測(cè)限約為0.26ng/mL［8］,但FPIA測(cè)定結(jié)果易受
6、木底熒光的干擾，所用儀器較復(fù)雜，地高辛濃度增加的假彖時(shí)有發(fā)生［9］。1.3.2?時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定法(TRFIA)?TRFIA是一種操作簡(jiǎn)便,不受樣品自然熒光干擾的新型菲放射性免疫標(biāo)記技術(shù)，采用的不蹤物取代傳統(tǒng)的熒光標(biāo)記發(fā)光物質(zhì),運(yùn)用新的熒光特性的刪系元素及其螯合物，測(cè)定反應(yīng)產(chǎn)物在反應(yīng)體系發(fā)生后的熒光強(qiáng)度，用體系屮分析物的濃度根據(jù)產(chǎn)物熒光強(qiáng)度和相對(duì)熒光強(qiáng)度的比值來判斷，從而達(dá)到定量分析［10］。同RIA法相比,木法靈敏度大大的提高;交叉反應(yīng)率低于FPTA法［11］,無放射性污染，示蹤穩(wěn)定可多標(biāo)記，標(biāo)準(zhǔn)范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。1.4?化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法(CL
7、IA)CLTA法檢測(cè)原理：當(dāng)被化學(xué)發(fā)光劑、催化發(fā)光酶或產(chǎn)物等標(biāo)記的抗體或抗原與相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合后,發(fā)光底物受上述標(biāo)記物的影響與產(chǎn)物發(fā)生氧化還原反丿'2激發(fā)熒光物質(zhì)發(fā)射可見光，用分光光度計(jì)測(cè)量反應(yīng)發(fā)射的可見光。最低檢測(cè)限可達(dá)0.1ng/mL,線性范囤為0~4.0ng/mL,日內(nèi)RSD<4%,日間RSD<6.5%［⑵。如有臨床癥狀難以鑒別或懷疑藥物過量中毒,可快速檢測(cè)。儀器設(shè)備及配套試劑目前較常用的是美國(guó)ACS:180PLUS化學(xué)發(fā)光儀。木儀器靈敏度較高,但機(jī)器較貴、檢測(cè)費(fèi)用較高，在臨床有一定的限制［13］。1.5?干化學(xué)測(cè)定法(Dry
8、chemicalassay)Drychemicalassay以異種酶排斥免疫為原理,結(jié)合了T化學(xué)分析技術(shù)和白動(dòng)生化分析儀測(cè)
