黃瓜疫病菌拮抗細菌的分離及鑒定-論文.pdf

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1、安徽農(nóng)業(yè)科學,JournalofAnhuiAgn.Sci.2014.42(20):6692—6693責任編輯喬利利責任校對況玲玲黃瓜疫病菌拮抗細菌的分離及鑒定伍善東,劉冬華,郭照輝,單世平(湖南省微生物研究院,湖南長沙41o009)摘要[目的]篩選對黃瓜疫病有較好穩(wěn)定防治能力的生防茵。[方法]采用系列稀釋法和平板涂布法對黃瓜疫病菌拮抗細菌進行初步分離.進一步通過平板對峙法對其進行篩選,并通過形態(tài)學、生理生化特征、16SrDNA序列分析方法對拮抗效果較好的細菌進行了鑒定。『結(jié)果]共分離到黃瓜疫病病原菌的桔抗細菌56株,有4株細菌對黃瓜疫病病原菌顯示出較強的拮抗效

2、果,其中LY-38菌株對黃瓜疫病病原茵拮抗帶寬為6.5mm,抑茵率高達81.2%,通過鑒定可以確定該菌株為枯草芽孢桿茵(Bacillussubtilis)。[結(jié)論]為黃瓜疫病的田間生物防治提供了參考。關鍵詞黃瓜疫?。恨卓辜毦?;鑒定;枯草芽孢桿菌中圖分類號S436.421.1文獻標識碼A文章編號0517—6611(2o14)2o一06692—02IsolationandIdentificationofAntagonisticBacteriaagainstPhytophthoramelonisWUShah.dongetal(HarianProvincialInst

3、ituteofMicrobiology,Changsha,Hunan410o09)Abstract『0biective]TheaimwastoobtaingoodantagonisticbacteriaagainstPmelonis.[MethodlSomeantagonisticbacteriaagainstP.meloniswereisolatedfromsoilbyusingserialdilutionmethodandspread—platemethod.furtherscreenedonplate.Thenefflcientantagonisticb

4、acteriaagainstP.meloniswereidentifiedbyusingmorphology.physiologicalandbiochemicalcharacteristicsand16SrDNAsequenceanalysis.『Result1Fifty.sixbacteriawereinitiallyisolatedbytlleserialdilutionsandplatecoatingmethodandhaveanantagonisticefectoncucumberhlightpathogen.Fourofthemwerefurthe

5、ridentifiedbytheplateconfrontationmethodandshowedstrongantagonisticeffectoncucumberblightpathogen.LY一38showedtheantagonismbandwidthof6.2UlITIOilcucumberblightpathogenandtheinhibitionrateof81.2%.TheLY.38strainwasjdentifiedasBacillussubtilis.『Conclusion]rI1leresearchresultprovidesrefe

6、renceforfieldbiologicalcontrolofmdon/s.KeywordsPhytophthoramelonis;antagonisticbacteria;Identification:Bacillussubtilis黃瓜疫病是一種黃瓜毀滅性土傳病害,由疫霉菌(Phyto—從未發(fā)病植株的根際取土樣,稱10g土壤直接放人盛有90phthoramelonis)侵染所引起?,苗期至成株期均可染病,一旦Hll無菌水(帶玻璃珠)的三角瓶內(nèi),振蕩10min。依梯度稀發(fā)病,可造成黃瓜大面積死亡,減產(chǎn)幅度在加%~30%,是影釋至l0~。從10~、10~、1

7、0各吸取稀釋液1ml,分別加入響黃瓜生產(chǎn)的重要因素之一,病菌以28~30℃為最適生長滅菌培養(yǎng)皿中。每個稀釋濃度3次重復。待樣品都加入培溫度。目前,該病的防治以化學藥劑為主,但由于病菌的抗養(yǎng)皿后,分別注入預先溶化并冷卻至45℃的牛肉膏蛋白胨藥性,防治效果越來越差。在土壤中引進拮抗性微生物防治培養(yǎng)基l5~20『nl,使菌懸液和培養(yǎng)基充分均勻混合。將接植物土傳病害的研究已有60多年,并取得一定成果??狗N好的培養(yǎng)皿倒置放人30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3d。挑生素2507是新研制的可防治黃瓜疫病和絲瓜霜霉病等多種取單菌落移接到試管斜面上。再將分離所得原始菌株劃線病害的藥劑

8、,田間防治效果達到70%~80%。林壁

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