根系表面積及其活性的測(cè)定方法.doc

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1、根系表面積的測(cè)定測(cè)定根系表面積的方法很多，可歸納為直接測(cè)量法和間接測(cè)量法兩類(lèi)。直接測(cè)量法是測(cè)定大量的單根的平均直徑以及測(cè)量每個(gè)樣品的總根長(zhǎng)，按s=∏RL（R：直徑；L：總長(zhǎng)）公式來(lái)估算根系表面積。此法工作量大，精度差。間接測(cè)量法有染色液蘸根法、重量法、滴定法和葉面積儀法。重量法是將洗凈風(fēng)干根浸入濃硝酸鈣溶液中10秒鐘后撈出，由浸根前后硝酸鈣溶液的重量差做為相對(duì)值來(lái)表示根系的表面積。滴定法是將洗凈風(fēng)干的根系浸入3mol.L-1的HCl溶液中（500ml）15秒鐘后撈出，將根懸吊放置5分鐘，除去多余的鹽酸后再浸入蒸餾水（250ml）漂洗10分鐘以上，取浸

2、過(guò)根系的鹽酸和水各100ml，用0.3mol.L-1的NaOH進(jìn)行滴定（以酚酞為指示劑），以NaOH的滴定值（ml單位）相對(duì)表示根系的面積。如果選用完整而已知面積的根系，即可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)進(jìn)行絕對(duì)測(cè)定。葉面積儀法是將洗凈吸干附著水的根系，浸入到0.2mmol.L-1的甲烯藍(lán)溶液中1.5分鐘，撈出用吸水紙吸干附著溶液，將根散鋪在透明塑料薄膜上成長(zhǎng)條形注意不能重疊，再把多余的塑料薄膜折蓋并夾住根系，用光電葉面積儀（如用L1-3000型葉面積儀）象測(cè)葉面積一樣測(cè)定，所的測(cè)定值再乘以∏值（假定根為圓拄形），即為根系總面積。據(jù)此認(rèn)為此法對(duì)于根直徑小于1mm是誤差

3、較大。如果根系不透明時(shí)不必染色。應(yīng)用比較普遍的是染色液蘸根法，這種方法不僅可以測(cè)定總吸收面積還可以區(qū)分活躍吸收面積。1．方法原理根據(jù)沙比寧等的理論，認(rèn)為植物根系對(duì)物質(zhì)的吸收最初具有吸附的特性，并假定此時(shí)被吸附物質(zhì)是以單分子層形式均勻的覆蓋在根系表面。之后在根系的活躍部分把原來(lái)吸附著的物質(zhì)解吸到細(xì)胞中去，根系又可以繼續(xù)吸附。因此可以根據(jù)根系對(duì)某種物質(zhì)的吸附量來(lái)測(cè)定根的吸收面積。一般用甲烯藍(lán)作為被吸附物質(zhì)，其被吸附的數(shù)量可以根據(jù)供試液濃度的變化用比色法準(zhǔn)確的測(cè)出。據(jù)沙比寧測(cè)定1mg甲烯藍(lán)成單分子層時(shí)可覆蓋1.1平方米的面積，據(jù)此可以求出根系的總吸收面積。

4、當(dāng)根系在甲烯藍(lán)溶液中已經(jīng)達(dá)到吸附飽和而仍留在溶液中時(shí)，根系的活躍部分能把原來(lái)吸附的物質(zhì)吸收到細(xì)胞中去，因而可以繼續(xù)吸附甲烯藍(lán)。從后一個(gè)吸附量可求出活躍吸收面積，可作為根系活力的指標(biāo)。2．儀器藥品分光光度計(jì)；小燒杯；量筒（50ml）;移液管；容量瓶；試管；試管架；吸水紙；剪刀；鑷子；0.0002mol.L-1甲烯藍(lán)溶液：75mg甲烯藍(lán)溶解定容至1000ml(0.075mg.ml-1)；0.01mg.ml-1甲烯藍(lán)溶液：取0.0002mol.L-1的甲烯藍(lán)溶液13.4ml加水定容至100ml。3．測(cè)定方法（1）繪制甲烯藍(lán)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。取7支試管編號(hào)，按下

5、表配成甲烯藍(lán)系列標(biāo)準(zhǔn)液：試管號(hào)12345670.01mg.ml-1甲烯藍(lán)液加入量（ml）0123456加蒸餾水量（ml）10987654甲烯藍(lán)液濃度（mg.ml-1）00.0010.0020.0030.0040.0050.006把各管混勻后，用分光光度計(jì)在660nm下測(cè)定光密度并繪制濃度光密度曲線(xiàn)。（2）將根系洗凈用吸水紙吸干表面附著水，將根浸在盛水的量筒中測(cè)定根系的體積（或用根系體積測(cè)定裝置）。（3）把0.0002mol.L-1的甲烯藍(lán)溶液，分別倒入3個(gè)編號(hào)的燒杯中，每杯中溶液的量約10倍于根系體積，準(zhǔn)確記下每杯的溶液用量。（4）從量筒中取出根系，

6、用吸水紙把水吸干，注意勿傷根系。然后放入第一個(gè)盛有甲烯藍(lán)溶液的小燒杯中，浸1.5分鐘后立即取出，使根系上多余的甲烯藍(lán)溶液流回到原燒杯中去。再放入第二個(gè)小燒杯中浸1.5分鐘，取出后同樣使根系上多余的甲烯藍(lán)溶液流回到原燒杯中去。最后再浸入第三個(gè)小燒杯中1.5分鐘，取出后使根系上多余液體流回到燒杯中去。（5）從上述三個(gè)燒杯中各取出1ml甲烯藍(lán)溶液，分別加入三個(gè)試管各稀釋1-10倍，搖勻后在660nm下測(cè)定光密度，并在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出相應(yīng)的濃度（mg.ml-1）。再乘以稀釋倍數(shù)，即為浸根后溶液的甲烯藍(lán)濃度，如浸根后溶液濃度降低很多，也可不經(jīng)稀釋直接測(cè)定光密度。

7、（6）結(jié)果計(jì)算總吸收面積（m2）=【（C0-C1）×V1＋（C0-C2）×V2】×1.1活躍吸收面積（m2）=【（C0-C3）×V3】×1.1活躍吸收面積（%）=活躍吸收面積（m2）/總吸收面積（m2）×100比表面積=根系總吸收面積（cm2）/根的體積（cm3）式中：C0---------------甲烯藍(lán)溶液原濃度（0.075mg.ml-1）C1、C2、C3---分別為1、2、3燒杯浸根后溶液的濃度（mg.ml-1）V1、V2、V3----分別為1、2、3燒杯中加入的0.0002mol.L-1甲烯藍(lán)溶液的體積（ml）。根系氧化還原力的測(cè)定根系氧化

8、還原力與呼吸作用有著密切的關(guān)系，它是根系活力的重要表現(xiàn)。α-萘胺能被根系所氧化，當(dāng)根系的氧化力增大時(shí)，有氧呼