實(shí)驗(yàn)三線粒體和液泡系的超活染色與觀察.docx

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1、實(shí)驗(yàn)三線粒體和液泡系的超活染色與觀察活體染色是能使生活有機(jī)體的細(xì)胞或組織特異性著色但對活樣品有沒有毒害作用的一種活體染色方法，其目的是顯示生活細(xì)胞內(nèi)的某些結(jié)構(gòu)，而不影響細(xì)胞的活動和產(chǎn)生任何物理化學(xué)變化以致引起細(xì)胞的死亡?；铙w染色技術(shù)可以用來研究生活狀態(tài)結(jié)構(gòu)和生理、病理狀態(tài)。通常吧活染色體分為體外活染色體與體外活體染色兩類，體外活體染色又稱超活染色，它是有活的動植物分離出部分細(xì)胞或組織小塊，以染料溶液侵染，染料被選擇固定在活細(xì)胞的某些結(jié)構(gòu)上而顯色，活體染色之說所以能固定‘堆積在細(xì)胞內(nèi)某些特殊的部分，主要是靠染料的電化學(xué)特性。堿性

2、染料的膠粒表面帶陽離子，酸性染料的膠粒表面帶陰離子，而被染得部分本身也是具有陰離子或陽離子，這樣，他被彼此之間就發(fā)生了吸引作用。但并非任何染料均可用于活體染色，理論上應(yīng)選擇那些對細(xì)胞無毒性或毒性很小的染料，且使用時需要配成稀的溶液-實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察動植物活細(xì)胞內(nèi)線粒體、液泡系的動態(tài)、數(shù)量與分布2學(xué)習(xí)一些細(xì)胞器的超活染色技術(shù)實(shí)驗(yàn)原理線粒體是細(xì)胞內(nèi)一種重要的細(xì)胞器，使細(xì)胞進(jìn)行呼吸的場所。細(xì)胞的各項(xiàng)活動所需要的能量，主要是通過線粒體呼吸作用來提供的。活體染色是應(yīng)用無毒或毒性很小的染色劑真實(shí)的專一姓活體染色劑。線粒體中細(xì)胞色素氧化酶使燃料

3、保持氧狀態(tài)呈藍(lán)綠色，而在周圍的細(xì)胞質(zhì)染料被還原，成為無色狀態(tài)中性紅為若堿性染料，對液泡?。ǜ郀柣w）的染色有專一性，只將活細(xì)胞的液泡系然成紅色，細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)完全不變色，這可能是與液泡中某些蛋白有關(guān)。三、實(shí)驗(yàn)用品1、器材顯微鏡、恒溫水浴鍋、解剖盤、剪刀、鑷子、雙面刀片、載玻片，凹面載玻片、蓋玻片、表面皿、吸管、牙簽、吸水紙2（1）Ringer溶液氯化鈣0.03氯化鉀0.25g、氯化鈉0.85g蒸餾水100ml（2）10%、1/3000中性紅溶液:稱取0.5g中性紅溶于50mlRinger液，稍加熱30~40使之很快溶解，用濾子

4、過濾，裝入棕色瓶于暗處保存。臨用前,取已配好的1%中性紅溶液1毫升，加入29毫升Ringer溶液混勻，裝入棕色瓶備用材料人口腔上皮細(xì)胞、小麥種子或黃豆幼根根尖四、實(shí)驗(yàn)步驟（一）人口腔粘膜上皮細(xì)胞線粒體的超活染色與觀察清潔的載玻片放在37攝氏度恒溫水浴鍋的金屬板上；滴兩滴1/5000詹納斯綠B染液；用牙簽在口腔頰粘膜處稍用力刮去上皮細(xì)胞，刮下的粘液狀物放大載玻片的染液滴中染色10分鐘（注意不可使染液干燥，必要時可加讓染液）蓋上蓋玻片，顯微鏡下觀察(二)植物性能液泡系的超活染色與觀察取豆芽的根尖放入中性紅染色液滴中，染色5分鐘洗去

5、染液，滴一滴Ringer液，蓋上蓋玻片在油鏡下觀察