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1、油菜籽皮中單寧含量的測定Folin-Denis比色法[3]。原理單寧類化合物在堿性溶液中,可將磷鎢酸鈉還原并生成藍(lán)色化合物,顏色的深淺與單寧含量正相關(guān),在760nm最大吸收處比色,以單寧酸為標(biāo)樣作標(biāo)準(zhǔn)曲線,再根據(jù)測得的吸光值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得對應(yīng)的單寧含量。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作準(zhǔn)確配制01100mg/mL的單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5mL標(biāo)準(zhǔn)液加入裝有25mL水的50mL容量瓶中,再各加215mLFolin-Denis顯色劑,10mLNa2CO3飽和溶液,搖勻定容,室溫下放置30min后比色,用0mL標(biāo)
2、準(zhǔn)液的反應(yīng)體系作參比,每個樣品作3次平行測定,以平均吸光值與標(biāo)準(zhǔn)溶液的反應(yīng)體系作線性回歸分析,得到回歸方程。標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1所示。圖1Folin-Denis法測定單寧含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線油菜籽皮中單寧含量的測定取油菜籽皮5g,用50%乙醇(料液比1：6)在70℃下攪拌40min,超聲波輔助提取。提取3次,將油菜籽皮單寧的提取液合并,定容至250mL,取提取液1mL于含約25mL水的50mL容量瓶中,加215mLFolin-Denis顯色劑,10mLNa2CO3飽和溶液,搖勻定容至50mL,室溫下放置30min后于760nm處進(jìn)行比色測定。再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查找
3、所測吸光值對應(yīng)的單寧濃度,計算出油菜籽皮中單寧含量。單寧含量(%)=單寧量(g)/樣品重(g)*250
