糖化血紅蛋白的檢測.doc

糖化血紅蛋白的檢測.doc

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1、糖化血紅蛋白的檢測????(一)糖化血紅蛋白檢測技術(shù)的分類及評價?????HbA1c檢測技術(shù)繁多,目前臨床常用的檢測方法可分為兩大類。一類利用糖化血紅蛋白與非糖化血紅蛋白電荷差異進(jìn)行分離,包括:離子交換HPLC、毛細(xì)管電泳法、等電聚焦電泳法等;另一類則利用血紅蛋白糖基化基團(tuán)與非糖基化基團(tuán)結(jié)構(gòu)的不同開展檢測,包括:硼酸鹽親和層析法、免疫法和酶法。????離子交換HPLC作為DCCT(美國糖尿病控制與并發(fā)癥研究)和IKPDS(英國糖尿病前瞻性研究)的推薦方法,具有精密度和準(zhǔn)確性良好、方便快捷、干擾因素較小等優(yōu)點。其缺點在于成本較高,部分產(chǎn)品受血紅蛋白濃度和血紅蛋白變異體的影響

2、。衛(wèi)生部臨檢中心室間質(zhì)評結(jié)果顯示,采用該方法的實驗室從2013年的278家上升到2018年的1284家,顯示近年來離子交換HPLC早我國臨床實驗室得到廣泛應(yīng)用。????毛細(xì)管電泳法是一類以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場為驅(qū)動力的液相分離分析技術(shù),可分離HbA2、血紅蛋白C(HbC)、血紅蛋白E(HbE)、血紅蛋白S(HbS)、血紅蛋白D(HbD)、胎兒血紅蛋白(HbF)、HbA0,以及其他血紅蛋白和HbA1a、HbA1b、HbA1c。該方法具有所需樣本量少、可自動化、重復(fù)性好、可用于β-地中海貧血以及其他血紅蛋白合成障礙性疾病的篩查等優(yōu)點,但存在檢測成本較高、檢測速度慢

3、等缺點。????硼酸鹽親和層析法則利用m-氨基苯硼酸與結(jié)合于血紅蛋白的葡萄糖順位二醇基發(fā)生特異性反應(yīng),該方法檢測總的糖化血紅蛋白,包括HbA1c和其他位點的糖化血紅蛋白。其優(yōu)點在于所需標(biāo)本量少、檢測速度快、可用于POCT、受血紅蛋白變異體影響最小。其缺點在于受HbF影響,無法發(fā)現(xiàn)Hb變異體。????大多數(shù)免疫測定法能特異地識別血紅蛋白β鏈N端糖基化的氨基酸(通常是開始的4~10個氨基酸),免疫法又可分為免疫化學(xué)發(fā)光法、免疫比濁法、乳膠凝集法和免疫層析法。該方法優(yōu)點包括:特異性高、可自動化、成本低廉、無Hb變異的干擾。缺點在于:受乳糜血和膽紅素影響,無法發(fā)現(xiàn)Hb變異體。??

4、??酶法則使用一種特異性酶酶切N端纈氨酸來測定HbA1c。由于采用比色法,該方法不需要昂貴、精密的檢驗儀器,實驗室常用的全自動生化分析儀即可完成檢測。其優(yōu)點在于:方便快速、成本低廉。但目前國內(nèi)不同廠家生產(chǎn)的試劑質(zhì)量良莠不齊,不同檢測系統(tǒng)間的精密度和準(zhǔn)確性差異明顯。建議臨床實驗室在引入該方法前嚴(yán)格開展性能驗證工作,驗證能否滿足臨床要求。????鑒于離子交換HPLC為每個患者樣品提供了一張便于判斷的層析圖,很多臨床實驗室將其作為HbA1c的首選方法。但該方法受血紅蛋白變異體的影響,會掩蓋HbA1c而導(dǎo)致結(jié)果錯誤。因此,有專家提出,實驗室采用離子交換HPLC檢測HbA1c時,應(yīng)

5、選用兩種檢測方法。審核離子交換HPLC結(jié)果前,首先篩查層析圖是否存在異常血紅蛋白,如果存在,則可以選擇免疫法或毛細(xì)管電泳法進(jìn)行復(fù)查,確保HbA1c檢測結(jié)果準(zhǔn)確。????(二)糖化血紅蛋白檢測中的干擾問題????在糖化血紅蛋白檢測過程中,多種因素均會引起血紅蛋白數(shù)量與質(zhì)量變化,最終干擾HbA1c的檢測結(jié)果。????1、生理因素:如種族差異、年齡差異、性別差異,地區(qū)差異(高原與平原地區(qū))和妊娠(妊娠中期女性HbA1c水平略降低,而妊娠晚期略升高)。?????2、病理因素:任何引起紅細(xì)胞壽命延長或縮短的疾病,均可造成HbA1c的檢測結(jié)果假性升高或假性降低。脾切除、再生障礙性貧血

6、、維生素B12缺乏及腎損傷等疾病造成HbA1c結(jié)果的假性升高;溶血性貧血、大量失血、脾腫大、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及慢性肝臟疾病等造成HbA1c結(jié)果的假性降低。與此同時,各種導(dǎo)致高甘油三酯血癥和高膽紅素血癥的疾病可造成HbA1c水平的升高。????血紅蛋白病和血紅蛋白變異體也會影響HbA1c的檢測結(jié)果。常見的血紅蛋白變異體包括HbS、HbE、HbC、HbD,在全球范圍內(nèi):HbS、HbE、HBC、HbD的分布依次減少。此外,HbF也是影響HbA1c的檢測結(jié)果的常見因素。NGSP(美國國家糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化計劃)列出了常見血紅蛋白變異體對不同檢測系統(tǒng)的影響,并每年進(jìn)行更新。????3、

7、藥物的影響:如長期大劑量服用維生素C和維生素E會造成HbA1c的檢測結(jié)果假性偏低;而長期大劑量服用乙酰水楊酸鹽、慢性麻醉劑、羥基脲、嗜酒會導(dǎo)致結(jié)果假性升高。????目前,日本、美國、歐洲和WHO已先后將HbA1c納入糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)中,同時針對不同人群,提出不同的監(jiān)測和管理方案,便于開展不同的治療。時至2018年,我國中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會發(fā)布的《中國2型糖尿病防治指南(2017版)》,HbA1c仍未能納入糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)??上驳氖?,該指南已將HbA1c納入糖尿病患者的治療和管理工作中。????目前我國HbA1c檢測工作尚面臨許

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