程序性細(xì)胞死亡與細(xì)胞衰老課件.ppt

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1、2021/8/231第十三章程序性細(xì)胞死亡 與細(xì)胞衰老●程序性細(xì)胞死亡(programmmedcelldeath,PCD)●細(xì)胞衰老(cellageing或cellsenescence)2021/8/232程序性細(xì)胞死亡動物細(xì)胞程序性死亡細(xì)胞凋亡(apoptosis)細(xì)胞壞死(necrosis)細(xì)胞自噬(autophagy)植物細(xì)胞與酵母細(xì)胞的程序性死亡植物細(xì)胞的程序性死亡:木質(zhì)部管狀細(xì)胞的成熟過程,植物細(xì)胞在受到真菌或細(xì)菌感染后會發(fā)生主動快速死亡。死亡細(xì)胞的殘余被細(xì)胞壁固定在原位,被液泡中水解酶消化。酵母細(xì)胞的程序性死亡:與動物程序性死亡類似。2021/8/233細(xì)胞

2、凋亡(Apoptosis)●細(xì)胞凋亡的概念和特征●細(xì)胞凋亡的生理意義:對于動物個(gè)體的正常發(fā)育,自穩(wěn)態(tài)的維持,免疫耐受的形成,腫瘤監(jiān)控等多種生理及病理過程具有重要意義。蝌蚪尾的消失,發(fā)育過程中手和足的成形過程;脊椎動物的神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育;凋亡不足導(dǎo)致腫瘤在內(nèi)的多種疾病,調(diào)亡過度導(dǎo)致機(jī)體免疫功能的喪失。●細(xì)胞凋亡的檢測方法●細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制2021/8/234細(xì)胞凋亡的概念和特征●細(xì)胞凋亡生物學(xué)意義:強(qiáng)調(diào)這種細(xì)胞的死亡方式是自然的生理學(xué)過程,是受基因調(diào)控的主動的生理性細(xì)胞自殺行為?!駝游锛?xì)胞凋亡的過程,在形態(tài)學(xué)上分為三個(gè)階段:◆凋亡的起始:細(xì)胞表面的特化結(jié)構(gòu)如微絨毛消失,細(xì)

3、胞間接觸的消失,但細(xì)胞膜依然完整;線粒體大體完整,但核糖體逐漸從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上脫離,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊腔膨脹,并逐漸與質(zhì)膜融合;染色質(zhì)固縮,形成新月形帽狀結(jié)構(gòu)等形態(tài),沿著核膜分布;◆凋亡小體的形成:核染色質(zhì)斷裂為大小不等的片段,與某些細(xì)胞器如線粒體一起聚集,為反折的細(xì)胞質(zhì)膜所包圍。細(xì)胞表面產(chǎn)生了許多泡狀或芽狀突起,逐漸形成單個(gè)的凋亡小體;◆凋亡小體逐漸為鄰近的細(xì)胞或體內(nèi)的吞噬細(xì)胞所吞噬,凋亡細(xì)胞的殘余物質(zhì)被消化后重新利用。2021/8/235細(xì)胞凋亡的檢測方法◆形態(tài)學(xué)觀測:染色法(臺盼藍(lán))、透射和掃描電鏡觀察?!鬌NA電泳:DNA片段就呈現(xiàn)出梯狀條帶?!鬞UNEL測定法,即DNA斷裂的

4、原位末端標(biāo)記法?!翦缧请娪痉ǎ╟ometassay):將細(xì)胞裂解處理,電泳并用熒光染料染色,凋亡細(xì)胞DNA降解片斷在電場中泳動速度快,使細(xì)胞核呈彗星式圖案?!袅魇郊?xì)胞分析:凋亡細(xì)胞DNA斷裂和丟失,呈亞二倍體狀態(tài),用碘化丙腚染色使DNA產(chǎn)生激發(fā)熒光。2021/8/236細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制●誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的因子●Caspase家族與凋亡◆Caspase◆Caspase依賴性的細(xì)胞凋亡▲死亡受體起始的外源途徑▲線粒體起始的內(nèi)源途徑◆Caspase非依賴性的細(xì)胞凋亡◆生死抉擇:細(xì)胞凋亡的調(diào)控2021/8/237誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的因子◆物理性因子,包括射線(紫外線,?射線等),較溫和

5、的溫度刺激(如熱激,冷激)等?!艋瘜W(xué)及生物因子:包括活性氧基團(tuán)和分子,鈣離子載體,維生素K3,視黃酸,細(xì)胞毒素,DNA和蛋白質(zhì)合成的抑制劑,正常生理因子(激素,細(xì)胞生長因子等)失調(diào)以及腫瘤壞死因子?(TNF?)處理等。2021/8/238Caspase◆Caspase:是一組存在于細(xì)胞質(zhì)中具有類似結(jié)構(gòu)的蛋白酶,活性位點(diǎn)均包含半胱氨酸殘基,裂解靶蛋白位點(diǎn)是天冬氨酸殘基后的肽鍵,因此稱為天冬氨酸特異性的半胱氨酸蛋白水解酶(Cysteineasparticacicspecificprotease),即Caspase。負(fù)責(zé)選擇性切割蛋白質(zhì),使靶蛋白活化或失活。◆線蟲(C.ele

6、gans)凋亡研究發(fā)現(xiàn)ced3,ced4基因促進(jìn)細(xì)胞凋亡,ced9基因阻止ced3/ced4的激活,抑制細(xì)胞凋亡。Ced3哺乳類同源物是白介素-1β轉(zhuǎn)換酶(Interleukin-1βconvertingenzyme,ICE),被命名Caspase-1:◆哺乳動物細(xì)胞Caspase家族成員有15種?!艏?xì)胞凋亡的分為激活期和執(zhí)行期兩個(gè)階段。2021/8/239細(xì)胞凋亡分為兩個(gè)階段激活期:前期細(xì)胞應(yīng)答死亡信號,起始Caspase活化。凋亡信號刺激→酶原分子在特異性的Asp位點(diǎn)被切割→形成兩個(gè)大小亞基的異二聚體→具有活性的Caspase;執(zhí)行期:后期執(zhí)行Caspase活化,執(zhí)

7、行細(xì)胞死亡程序。起始Caspase招募執(zhí)行Caspase酶原分子后→進(jìn)行切割→產(chǎn)生具有活性的執(zhí)行Caspase→切割細(xì)胞內(nèi)重要的結(jié)構(gòu)和功能蛋白→細(xì)胞凋亡。已知執(zhí)行Caspase底物約280種。起始Caspase和執(zhí)行Caspase組成細(xì)胞內(nèi)凋亡信號的聯(lián)級分子網(wǎng)絡(luò),凋亡程序一旦啟動,網(wǎng)絡(luò)頂端起始Caspase首先活化,切割下游Caspase酶原,使得凋亡信號在短時(shí)間內(nèi)迅速放大并傳遞到整個(gè)細(xì)胞,產(chǎn)生凋亡效應(yīng)。2021/8/2310死亡受體起始的外源途徑▲凋亡信號通路:死亡配體主要是腫瘤壞死因子(TNF)家族成員,死亡配體的生物學(xué)功能是通過與細(xì)

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