正交試驗優(yōu)選葛根提取工藝

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1、正交試驗優(yōu)選葛根提取工藝正交試驗優(yōu)選葛根提取工藝更新日期:2011-01-24點擊:徐新剛 路富玉 隋曉春 盧寧摘要:為探討葛根的提取工藝條件,采用薄層掃描法,以葛根素為檢測指標(biāo),用正交試驗考察了4種因素(乙醇濃度、用量、提取時間及提取次數(shù))對其含量的影響,并從中優(yōu)選出確保葛根制劑質(zhì)量及療效的提取工藝。關(guān)鍵詞:葛根; 葛根素; 乙醇; 薄層掃描中圖分類號:R283  文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A  文章編號:1008-0805(2000)09-0780-01OptimizationoftheExtractingTechnolog

2、yforPuerarialobatabyOrthogonalTestXUXin-gang(ShandongResearchInstituteofTraditionalChineseMedicineandMateriaMedica,Jinan250014,China)LUFu-yu(FirstHospitalofTaianCity,ShandongProvince271000,China)SUIXiao-chun(JinanPharmaceuticalFactoryforTraditionalChineseDrug,

3、Jinan,Shandong250100,China)LUNing(TaianDrugStationofTCM,Taian,Shandong271000,China)Abstract:TostudytheextractingtechnicalconditionsofPuerarialobata,Puerarinasindex,TLC-scanningwasappliedwith,andorthogonalmethodwasusedforstudyingtheeffectoffourextractingfactors

4、onextractingrateofPuerarin(alcoholdensity,volume,timeandtimes)andanoptimumextractingprocessforPuerarialobatawaschosentoensurethequalityofpreparationandcurativeeffect.Keywords:Puerarialobataohwi; Puerarin; Alcohol; TLC-scanning  葛根為豆科植物野葛PuerariaLobata(Willd.)O

5、hwi或甘葛藤PuerariathomsoniiBenth.的干燥根,系常用中藥,具有解肌清熱、生津、透疹、升陽止瀉之功效,中藥制劑中使用較多。其工藝考察時多以總黃酮作為檢測指標(biāo)[1],而不同提取工藝對其中異黃酮成分葛根素的影響研究較少。據(jù)文獻(xiàn)報道,葛根素有明顯的擴張冠狀血管作用[2]和顯著降低四氧嘧啶致小鼠高血糖作用[3]。為更好地發(fā)揮葛根的藥用功效,本文采用薄層掃描法。以葛根素為檢測指標(biāo),用正交試驗法對其生產(chǎn)工藝進(jìn)行了優(yōu)選。1 儀器與試藥  島津CS-9301薄層色譜掃描儀;硅膠G由青島海洋化工廠生產(chǎn);試驗用藥

6、材購自濟(jì)南建聯(lián)藥材公司,經(jīng)鑒定符合《中國藥典》之規(guī)定;葛根素對照品由中國藥品生物制品檢定所提供;甲醇、氯仿為分析純,乙醇為化學(xué)純。2 方法與結(jié)果2.1 正交試驗方案:根據(jù)單因素初篩試驗結(jié)果,分別確定提取溶媒(乙醇)濃度、溶媒用量、提取時間及提取次數(shù)為試驗因素,每個因素備選了3個水平,見表1。表1 正交試驗因素水平表水平乙醇濃度A(%)提取時間B/h乙醇倍數(shù)C提取次數(shù)D160163270272380381  我們利用L9(34)正交表安排試驗,每次試驗均重復(fù)3次,重復(fù)試驗與正交表中空列的誤差性質(zhì)完全一樣,代表整體誤差

7、。試驗基本方法為:精稱葛根藥材粗顆粒50g,用乙醇提取,按正交順序表試驗,合并乙醇提取液,回收乙醇至盡,濃縮液置于蒸發(fā)皿中,水浴蒸干,得稠膏,備用。2.2 葛根素的含量測定2.2.1 對照品溶液配制:精密稱取葛根素對照品5mg于5ml量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,備用。2.2.2 供試品溶液制備:取正交試驗順序表中各所得稠膏,按重量比精稱相當(dāng)于1g葛根藥材的稠膏,以甲醇溶解,定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中,稀釋至刻度,搖勻,備用。2.2.3 薄層層析及掃描條件:用定量毛細(xì)管分別吸取對照品溶液及供試品溶液各2μl點于

8、同一塊硅膠G-CMC-Na薄層板上。以氯仿-甲醇-水(16∶5∶2)下層液展開,揮干溶劑后,紫外燈(254nm)下檢視,被檢測組分葛根素顯一藍(lán)色熒光斑點,分離度好,結(jié)果見圖1。經(jīng)CS-9301薄層掃描儀測定,λS=255nm,λR=370nm,SX=3,狹縫0.4mm×0.4mm,雙波長反射式鋸齒掃描。2.2.4 線性關(guān)系的考察:分別吸取對照品溶液1,2,3

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