實(shí)驗(yàn)一-費(fèi)林(-Fehling)試劑熱滴定法定糖

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實(shí)驗(yàn)一費(fèi)林試劑熱滴定法定糖

1一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?初步掌握費(fèi)林試劑熱滴定法定糖的原理和方法2應(yīng)用到實(shí)際當(dāng)中(測定農(nóng)副產(chǎn)品(水果牛奶)還原糖含量)

2二實(shí)驗(yàn)原理1）糖的概念：多羥基的醛或酮，及其縮合產(chǎn)物和衍生物這樣一類物質(zhì)。2）還原糖概念：還原糖是指含有自由醛基（如葡萄糖）或酮基（如果糖）的單糖和某些二糖（如乳糖和麥芽糖具有半縮醛羥基）。

3二實(shí)驗(yàn)原理3）還原糖性質(zhì)：在堿性溶液中，還原糖能將Cu2+、Hg2+、Ag+等金屬離子還原，而糖本身被氧化成糖酸及其他產(chǎn)物。糖類的這種性質(zhì)常被用于糖的定性和定量測定。

44）費(fèi)林試劑熱滴定法的原理費(fèi)林試劑的組成：費(fèi)林試劑由甲、乙兩種溶液組成。甲液含硫酸銅和次甲基藍(lán)（氧化還原指示劑）；乙液含氫氧化鈉，酒石酸鉀鈉和亞鐵氰化鉀。二實(shí)驗(yàn)原理

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6反應(yīng)原理：2）在堿性溶液中，所生成的氫氧化銅沉淀與酒石酸鈉反應(yīng)，生成可溶性的絡(luò)合物酒石酸鉀鈉銅：二實(shí)驗(yàn)原理

7反應(yīng)原理：3）在加熱條件下，用樣液滴定，樣液中的還原糖與酒石酸鉀鈉銅反應(yīng)，酒石酸鉀鈉銅被還原糖還原，產(chǎn)生磚紅色氧化亞銅沉淀：二實(shí)驗(yàn)原理

8反應(yīng)原理：4）反應(yīng)生成的氧化亞銅沉淀與費(fèi)林試劑中的亞鐵氰化鉀（黃血鹽）反應(yīng)生成可溶性復(fù)鹽：Cu2O+K4Fe(CN)6+H2O-->K2Cu2Fe(CN)6（無色）+2KOH二實(shí)驗(yàn)原理

9反應(yīng)原理：5）滴定時(shí)以次甲基藍(lán)為氧化－還原指示劑。因?yàn)榇渭谆{(lán)氧化能力比二價(jià)銅弱，待二價(jià)銅離子全部被還原后，稍過量的還原糖可使藍(lán)色的氧化型次甲基藍(lán)還原為無色的還原型的次甲基藍(lán)，即達(dá)滴定終點(diǎn)。次甲基藍(lán)（蘭色氧化型）+葡萄糖+H2O-->次甲基藍(lán)（無色還原型）+葡萄糖酸二實(shí)驗(yàn)原理

101）甲液+乙液(硫酸銅與氫氧化鈉)生成氫氧化銅沉淀2）氫氧化銅沉淀+酒石酸鉀鈉生成酒石酸鉀鈉銅(可溶性絡(luò)合物)3）還原糖+酒石酸鉀鈉銅(Cu2+)生成氧化亞銅(磚紅色)4）氧化亞銅+亞鐵氰化鉀生成可溶性復(fù)鹽5）還原糖(過量)+次甲基藍(lán)生(藍(lán)色)生成次甲基藍(lán)(無色)二實(shí)驗(yàn)原理

11三實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器材料：葡萄試劑：費(fèi)林試劑甲乙溶液標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液0.1%(0.001g/ml)儀器：錐形瓶(50ml)、堿性滴定管、吸量管(5ml)、容量瓶(100ml)、電爐(墊鐵盤)、石棉網(wǎng)、鐵臺、蝴蝶夾。

121）樣品中還原糖的提?。喝?0克左右葡萄，洗凈，濾紙擦干，研缽搗碎，葡萄原汁倒入三角瓶，80℃恒溫水浴中保溫30min，過濾到試管，取1mL定容到100mL。四實(shí)驗(yàn)步驟

132）空白測定：準(zhǔn)確吸取費(fèi)林試劑甲液和乙液各5mL，置于50mL錐形瓶中，加蒸餾水5mL。加熱使其在2min內(nèi)沸騰，趁熱以每3秒1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)。記錄消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積(V1)。平行操作3次，取其平均值。四實(shí)驗(yàn)步驟

143）樣品中還原糖的測定：吸取費(fèi)林試劑甲液及乙液各5mL，置于錐形瓶中，加待測樣品稀釋液5mL(從滴定管中加入約5mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液)，加熱使其在2min內(nèi)沸騰，趁熱以每3秒1滴的速度繼續(xù)滴加樣液，直至藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)。記錄消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(V2)。平行操作3次，取其平均值。四實(shí)驗(yàn)步驟

15測定樣品及編號取樣量（ml）費(fèi)林試劑（ml）標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖耗用量（ml）甲液乙液每種樣品的平均值平均值空白155525553555還原糖155525553555

16五實(shí)驗(yàn)結(jié)果（計(jì)算）還原糖=(V1–V2)×標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液濃度×稀釋倍數(shù)取樣液體積

17（1）費(fèi)林試劑甲液和乙液應(yīng)分別貯存，用時(shí)才混合，否則酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物長期在堿性條件下會慢慢分解析出氧化亞銅沉淀，使試劑有效濃度降低。（2）滴定時(shí)不能隨意搖動錐形瓶，更不能把錐形瓶從熱源上取下來滴定，以防止空氣進(jìn)入反應(yīng)溶液中。六注意事項(xiàng)

18（3）滴定必須是在沸騰條件下進(jìn)行，其原因一是加快還原糖與Cu2＋的反應(yīng)速度；二是亞甲基藍(lán)的變色反應(yīng)是可逆的，還原型的亞甲基藍(lán)遇空氣中的氧時(shí)會再被氧化為氧化型。保持反應(yīng)液沸騰可防止空氣進(jìn)入，避免亞甲基藍(lán)和被氧化而增加消耗量。注意事項(xiàng)

19（4）樣品溶液應(yīng)預(yù)測，其目的：通過預(yù)測可以知道樣液大概消耗量，以便在正式測定時(shí)，預(yù)先加入比實(shí)際用量少1ml左右的樣液，只留下1ml左右樣液在繼續(xù)滴定時(shí)加入，以保證在1分鐘之內(nèi)完成繼續(xù)滴定工作，提高測定的準(zhǔn)確度。（5）必須嚴(yán)格控制反應(yīng)液的體積，標(biāo)定和測定時(shí)消耗的體積應(yīng)接近，使反應(yīng)體系堿度一致。注意事項(xiàng)（不用掌握）