地錦草不同萃取部位體外抗真菌作用分析

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1、地錦草不同萃取部位體外抗真菌作用分析論文摘要:目的對(duì)地錦草不同萃取部位進(jìn)行體外抗真菌實(shí)驗(yàn),測定其最小抑菌濃度值(MIC)。方法采用溶劑萃取法分離地錦草乙醇提取液,得到水、石油醚、氯仿、正丁醇等4個(gè)萃取部位;根據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)推薦的《產(chǎn)孢絲狀真菌的液基稀釋法抗真菌藥物敏感性試驗(yàn)方案》(M38-A),測定地錦草各萃取部位對(duì)23株臨床常見皮膚癬菌的MIC。結(jié)果由于地錦草萃取分離后的石油醚和氯仿部位在藥敏試驗(yàn)中的溶解度甚小,影響結(jié)果的科學(xué)觀察,本研究主要針對(duì)正丁醇和水部位的體外藥敏進(jìn)行了檢測,正丁醇和水部位對(duì)真菌有明顯的抑制作用,并且正丁醇部位的作用

2、優(yōu)于水部位。結(jié)論地錦草萃取部位具有體外抗真菌作用。關(guān)鍵詞:地錦草;M38-A方案;體外試驗(yàn);抗真菌作用;最低抑菌濃度  Abstract:Objective:ToexaminetheantifungaleffectofdifferentextractionpartsofEuphorbiahumifusainvitro,andmeasuretheminimuminhibitionconcentrations(MICs).MethodsSeparatedtheDijincaoextractandgotfourpartsbysolventextraction.Applied

3、thestandarditteeforClinicalLaboratoryStandards(NCCLS):ReferenceMethodforBrothDilutionAntifungalSusceptibilityTestingofFilamentous,Fungi(M38-A).MICsofdifferentpartsofDijincaoextractagainst23strainsofmonclinicaldermatophytesextractandpetroleumetherextractcouldnotgetclearanddefiniteMICbeca

4、usetheirsolubilitydisturbedthedeterminationofexperiment’sresults.Hoifusaextractpartshaveantifungnalactivityagainstdermatophytesinvitro.Keyifusaextractparts;M38-A;antifungaleffect;invitro;MIC  地錦草,維吾爾名為夏塔熱其尼(Xiahatereqini)、雅麗蔓(Yalmankulake),為大戟科植物地錦Euphorbiahumifusa38-A)[4],探討其各部位的體外抗真菌活

5、性?! ?材料與方法  1.1藥物  地錦草藥材由新疆維吾爾醫(yī)藥研究所藥劑室提供,經(jīng)生藥學(xué)鑒定為大戟科植物地錦草(EuphorbiahumifusaI-1640培養(yǎng)基,美國Sigma公司;三氮嗎啡琳丙磺酸(MOPS),美國Sigma公司;沙堡氏瓊脂培養(yǎng)基(SDA),批號(hào)20080228,北京奧博星生物科技有限公司?! PMI-1640培養(yǎng)基的配制:將10.4gRPMI-1640和34.53gMOPS粉末溶于900mL蒸餾水中,用1mol/LNaOH溶液調(diào)整其pH至7.0(25℃),加蒸餾水定容至1L,G-6漏斗濾過滅菌,存于4℃冰箱備用?! DA培養(yǎng)基的配制:稱取

6、PDA粉末67g,加入1000mL蒸餾水,搖勻加熱煮沸溶解,121℃高壓滅菌20min,分裝,4℃保存,備用?! ?.4儀器  BHC-1300ⅡA型生物安全柜,蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司;FMspx-250B型生化培養(yǎng)箱,上海?,斣囼?yàn)設(shè)備有限公司;LeicaDM-2500型顯微鏡,德國?! ?.5地錦草不同部位的提取分離方法  取地錦草全草10kg,粉碎,加70%乙醇回流提取2次(8、6倍),每次2h,藥渣加水煎煮提取1次(10倍,2h),分別濾過,合并醇提液,減壓回收至流浸膏狀(相對(duì)密度1.1,熱測),另水提液減壓回收至流浸膏狀(狀態(tài)同上)。合并以上醇提及水提浸膏(

7、體積約5~10L,若粘稠可加水稀釋),依次用石油醚、氯仿、正丁醇萃取,每種有機(jī)溶劑萃取5次,合并有機(jī)溶劑萃取液,分別將各有機(jī)溶劑萃取液及萃取后的水相減壓回收至干,分別得到石油醚、氯仿、正丁醇及水相4個(gè)溶劑萃取部位,稱重,粉碎,即得?! ?.6最低抑菌濃度測定  根據(jù)NCCLS推薦的《產(chǎn)孢絲狀真菌的液基稀釋法抗真菌藥物敏感性試驗(yàn)方案》(M38-A)[4],測定地錦草不同萃取部位對(duì)23株皮膚癬菌的最低抑菌濃度值(MIC)?! ?.6.1抗真菌藥物儲(chǔ)備液、稀釋液的制備稱取地錦草各萃取部位分別為204.8mg,用1mL二甲基亞砜(DMSO)溶解,制成濃度為2

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