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《大黃、蟲對藥含藥血清對原代培養(yǎng)人子宮肌瘤細胞增殖》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、大黃、蟲對藥含藥血清對原代培養(yǎng)人子宮肌瘤細胞增殖【摘要】目的觀察大黃蟲對藥不同劑量含藥血清對原代培養(yǎng)人子宮肌瘤細胞增殖的影響。方法原代培養(yǎng)并建立人子宮平滑肌瘤細胞系，采用中藥血清藥理學(xué)方法處理細胞，以MTT比色法檢測含藥血清作用于子宮肌瘤細胞12，24，48，72h的光密度值，計算細胞存活率。結(jié)果大黃蟲對藥含藥血清可直接抑制子宮肌瘤細胞增殖。結(jié)論大黃蟲對藥含藥血清可直接抑制子宮肌瘤細胞增殖，子宮肌瘤細胞是大黃蟲對藥含藥血清發(fā)揮治療作用的靶細胞?！娟P(guān)鍵詞】大黃;蟲;子宮肌瘤;細胞培養(yǎng);含藥血清 Abstract：Objective
2、ToobservetheeffectsofdifferentdosagesofmedicatedseraofDahuangandZhechongontheproliferationofhumanleiomyomacellsinvitro.MethodsHumanleiomyomacellspharmacologymethod.TheMTTassaycontainingDahuangandZhechongshoyomacells.ConclusionDahuangandZhechongmedicatedserumhasinhibi
3、toryeffectonproliferationofhysteromyomacells,yomacellsaretargetcells. Keyyoma;Cellculture;Medicatedserum 子宮肌瘤(myomaofuterus)又稱子宮平滑肌瘤(leiomyomaofuterus)，是女性生殖器官中最常見的良性腫瘤，也是人體最常見的腫瘤之一，它好發(fā)于生育年齡的婦女，素有“婦科第一瘤”之稱。根據(jù)其臨床表現(xiàn)，屬中醫(yī)“癥瘕”范疇，即婦女下腹包塊，伴有或痛或脹或滿或陰道出血溢液等癥狀的病證。由于淤血內(nèi)阻在疾病中的
4、關(guān)鍵作用，活血化淤方藥得到普遍推崇，應(yīng)用和研究最多并最早確認療效的是桂枝茯苓丸。隨著研究的不斷深入，我們發(fā)現(xiàn)，在改善血淤證患者體內(nèi)血液黏、凝、濃、聚狀態(tài)、消散肌瘤方面，破血消癥類中藥制劑的效果明顯優(yōu)于活血化淤類中藥制劑。大黃、蟲對藥組合出自經(jīng)方下淤血湯、大黃蟲丸等，具有活血化淤，消散癥積之功用。兩藥相須為用，大黃入血偏于瀉，蟲入血偏于通，使脈絡(luò)暢通，淤血得散[1]。本實驗采用細胞生物學(xué)與中藥血清藥理學(xué)相結(jié)合的方法，研究大黃、蟲含藥血清對原代培養(yǎng)的人子宮肌瘤細胞的生長抑制作用，探討經(jīng)方對藥的作用機制。 1材料 1.1動物及含藥
5、血清的制備清潔級健康雌性SD大鼠20只，鼠齡80～100d，體質(zhì)量180～220g。購自第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心，用于制備含藥血清。分5組，每組4只，空白組(無藥血清組)，桂枝茯苓膠囊組(含有桂枝茯苓膠囊的含藥血清組)，大黃蟲對藥小劑量組，大黃蟲對藥中劑量組，大黃蟲對藥大劑量組。灌胃給藥，2次/d，共3d，末次給藥前8h禁食不禁水。桂枝茯苓膠囊以臨床日用量的10倍給藥。大黃蟲對藥小、中、大劑量組以臨床日用量的1，2，4倍給藥。末次給藥后1h股動脈采血，分離血清，經(jīng)56℃恒溫水浴30min處理滅活補體后，用0.22μm的微孔濾膜過
6、濾除菌分裝，置-20℃凍存?zhèn)溆??！ ?.2藥物及試劑大黃蟲對藥，購自陜西中醫(yī)學(xué)院金秋門診，經(jīng)本院藥劑科鑒定無偽劣品。藥物加水浸泡常規(guī)煎煮過濾，水浴蒸發(fā)至大、中、小劑量，每毫升含生藥量分別為0.506g，0.253g，0.126g，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆?。桂枝茯苓膠囊，連云港康緣制藥有限責(zé)任公司，0.31g/粒。國藥準字號210950005，產(chǎn)品批號060518。胰蛋白酶、DMEM培養(yǎng)基、新生胎牛血清、抗α-平滑肌肌動蛋白(α-Actin)、MTT、SP免疫組化試劑盒均購自第四軍醫(yī)大學(xué)寶泰克生物試劑有限公司。青霉素、鏈霉素、碳酸氫鈉
7、、二甲基亞砜(DMSO)、氯化鈉、氯化鉀、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、苯甲酸雌二醇、黃體酮均為第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心309細胞培養(yǎng)室友情提供?！ ?.3儀器電動玻璃勻漿機(寧波新芝科器研究所，DY-1)，電子天平(上海精科天平，Ja12002)，低溫高速離心機(Heraeusinstruments，Biofugefresco)，低溫高速臺式離心機(Heraeusinstruments，Biofugestratos)，超凈工作臺(匯龍儀表電子責(zé)任有限公司，SHJ系列)，電熱恒溫水槽(精宏實驗設(shè)備有限公司，DK-600型)，可調(diào)式封閉
8、電爐(上海浦東榮豐科學(xué)儀器有限公司)，臺式離心機(Heraeusinstruments，BIOFUGEPICO)，移液槍(GILSON，200μl、10μl、1000μl)，NAPCO-5410型CO2培養(yǎng)箱、OLYMPUS倒置顯微鏡、MR5000型酶標儀。一次
