西紅花質(zhì)量評(píng)價(jià)研究

《西紅花質(zhì)量評(píng)價(jià)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。

1、西紅花質(zhì)量評(píng)價(jià)研究作者：朱友雙，牛萬(wàn)剛，姚寶君【摘要】應(yīng)用高效液相色譜和DAD檢測(cè)器對(duì)上海、浙江、江蘇大產(chǎn)地的藥材進(jìn)行了全面質(zhì)量考察。本文可提供清晰的HPLC指紋圖譜，藥材總苷含量在23%～27%之間為優(yōu)，指紋圖譜相似度>0.9。西紅花總苷的指紋圖譜特征性及專(zhuān)屬性強(qiáng)，可結(jié)合含量測(cè)定用于全面控制藥材質(zhì)量，確保每批產(chǎn)品的均一性。本文建立了西紅花的指紋圖譜檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好?！娟P(guān)鍵詞】西紅花；含量測(cè)定；指紋圖譜西紅花為鳶尾科植物番紅花（CrocussativusL.）的干燥柱頭，又名藏紅花，被譽(yù)為“植物黃金”。具有活血化瘀，散郁開(kāi)結(jié)，治憂思郁結(jié)，胸膈痞悶，吐血，

2、傷寒發(fā)狂，驚怖恍惚，婦女經(jīng)閉，產(chǎn)后瘀血腹痛［1］。本品在歷史上依靠進(jìn)口，見(jiàn)到的樣品有外表加油、摻假、含量低現(xiàn)象存在?，F(xiàn)在我國(guó)已引種栽培成功，質(zhì)量?jī)?yōu)于進(jìn)口品，每年并有相當(dāng)數(shù)量的西紅花藥材出口［2］。目前國(guó)內(nèi)已成功開(kāi)發(fā)了西紅花總苷片等藥物，擴(kuò)大了內(nèi)需，因此迫切需要建立一套方便、可行、快速的質(zhì)量鑒別方法，以便滿足工業(yè)化生產(chǎn)的需要。本實(shí)驗(yàn)對(duì)我國(guó)三大產(chǎn)地西紅花藥材應(yīng)用現(xiàn)代色譜法—薄層色譜、高效液相色譜和紫外-可見(jiàn)分光光度法進(jìn)行方法學(xué)研究。HPLC指紋圖譜首次采用中藥質(zhì)量指紋圖譜全譜圖相似性計(jì)算方法，以指紋圖譜和指標(biāo)成分相結(jié)合的方法建立了西紅花質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。本文領(lǐng)會(huì)了國(guó)家藥品監(jiān)督管理局于200

3、2年4月在上海召開(kāi)的全國(guó)中藥注射劑指紋圖譜工作會(huì)議上的精神。通過(guò)建立中藥材指紋圖譜，可以促進(jìn)同品種中成藥各生產(chǎn)企業(yè)工藝的統(tǒng)一、規(guī)范和優(yōu)化，穩(wěn)定產(chǎn)品質(zhì)量，提高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的可控性，通過(guò)現(xiàn)代科學(xué)手段讓世界了解中藥，讓中藥走向世界。1儀器、試劑與試藥1.1儀器UV762雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。LC-10Atvp島津高效液相色譜儀（日本島津公司）。1.2試劑甲醇（色譜純，杭州匯普化工儀器有限公司）；磷酸二氫銨（分析純，四川林辰實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司）；三蒸水。1.3對(duì)照品西紅花苷-Ⅰ、西紅花苷-Ⅱ、西紅花苷-Ⅲ、西紅花苷-Ⅳ。1.4藥材來(lái)源見(jiàn)表1。表1西紅花藥材來(lái)源1.

4、5藥材重量見(jiàn)表2。表2藥材重量2西紅花藥材質(zhì)量分析2.1紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定西紅花藥材總苷含量2.1.1樣品液、標(biāo)準(zhǔn)液及供試液的制備2.1.1.1樣品液分別稱取十個(gè)批號(hào)的藥材一定量研成細(xì)粉，取60mg精密稱定，70℃加甲醇索氏提取至溶液無(wú)色，冷卻，甲醇定容至100ml容量瓶。2.1.1.2標(biāo)準(zhǔn)液取西紅花苷-Ⅰ對(duì)照品用甲醇制成0.02mg/ml標(biāo)準(zhǔn)液。2.1.1.3供試液分別精密吸取上述樣品液各1ml，甲醇稀釋?zhuān)ㄈ葜?0ml。2.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇西紅花紫外-可見(jiàn)測(cè)吸收曲線，分在λmax（432±2）nm及（458±2）nm處有最大吸收。2.3西紅花藥材總苷含量測(cè)定取十個(gè)批號(hào)藥材

5、供試液。以西紅花苷-Ⅰ為基準(zhǔn)物，433nm處測(cè)定吸收度。見(jiàn)表3。表3西紅花藥材總苷含量2.4HPLC指紋圖譜2.4.1色譜條件色譜柱：HypersilODS2250×4.6mm,5μm;流動(dòng)相：甲醇-水（53：47）；甲醇-0.01mol/L磷酸二氫銨（48：52）；流速1ml/min;柱溫30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)440nm。2.4.2樣品液及標(biāo)準(zhǔn)液制備2.4.2.1樣品液分別稱取十個(gè)批號(hào)的藥材研成細(xì)粉，精密稱取60mg，甲醇索氏提取至無(wú)色，甲醇定容至100ml。2.4.2.2標(biāo)準(zhǔn)液取西紅花苷-Ⅰ、西紅花苷-Ⅱ和西紅花苷-Ⅲ、西紅花苷-Ⅳ混合物對(duì)照品用甲醇制成0.03mg/ml標(biāo)準(zhǔn)液。2.

6、4.3指紋圖譜技術(shù)對(duì)西紅花藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)2.4.3.1流動(dòng)相的考察與優(yōu)化分別用甲醇-水（50：50）、甲醇-水（53：47）、甲醇-水（55：45）、甲醇-0.01mol/L磷酸二氫銨（50：50）、甲醇-0.01mol/L磷酸二氫銨（48：52）、甲醇-0.01mol/L磷酸二氫銨（45：55）六種體系進(jìn)行洗脫，結(jié)果以甲醇-水（53：47）和甲醇-0.01mol/L磷酸二氫銨（48：52）體系得到的色譜峰形較好，尤其以甲醇-0.01mol/L磷酸二氫銨（48：52）峰形最好，分離度高，大部分得到基線分離，且較穩(wěn)定。2.4.3.2參照峰的選擇西紅花苷-Ⅰ和西紅花苷-Ⅱ?yàn)橹讣y圖譜中峰面

7、積積分值較大、出峰時(shí)間較早、很穩(wěn)定的兩個(gè)峰，而且均可制備純度>98%的對(duì)照品，西紅花苷-Ⅲ和西紅花苷-Ⅳ為指紋圖譜中峰面積積分值較小、出峰時(shí)間較晚、兩個(gè)峰較穩(wěn)定。2.4.3.3指紋圖譜的測(cè)定精密吸取藥材提取液2ml，甲醇定容量至10ml，精密吸取20μl，進(jìn)樣，記錄60min的色譜圖（見(jiàn)圖1），以西紅花苷-Ⅰ的保留時(shí)間和峰面積積分值為1，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間和峰面積積分值的比值。2.4.4實(shí)驗(yàn)方法考察2.4.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線制備分別精密吸取西紅花苷-Ⅰ標(biāo)準(zhǔn)液0.05、