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1、新疆石榴籽中總多酚提取工藝的研究作者：常占瑛,高曉黎,馬桂芝【摘要】 目的優(yōu)選出新疆石榴籽中總多酚的提取方法。方法以多酚含量為指標，采用單因素實驗設(shè)計與正交實驗設(shè)計優(yōu)選新疆石榴籽中總多酚提取工藝。結(jié)果石榴籽中總多酚最優(yōu)提取工藝為：乙醇濃度為60%，提取溫度100℃，回流提取1次，每次1.0h，每次加乙醇量為石榴籽粉末量的12倍。結(jié)論驗證實驗表明優(yōu)選出的提取方法穩(wěn)定，合理，可行?！娟P(guān)鍵詞】新疆石榴籽總多酚提取工藝 石榴PunicagranatumL.為石榴科Punicaceae石榴屬(PunicaL.)落葉灌木或小喬木［
2、1］，全世界共有1屬［石榴屬（PunicaL.）］，2種，產(chǎn)于地中海及亞洲西部地區(qū)，現(xiàn)在主要分布在亞熱帶及溫帶地區(qū)，在我國南北各地區(qū)均有種植。石榴籽具有降低血糖、抗腹瀉的功效，并具有顯著的抗人體乳腺癌和抗氧化活性，可用于預(yù)防和治療乳腺癌及動脈硬化引起的心臟病，具有延緩人體衰老的功效［2］，這些生理、藥理活性都與其所含的多酚類成分有關(guān)?！ ≈参锒喾邮且活悘V泛存在于植物體內(nèi)的多酚類化合物。近年來,多酚類物質(zhì)的生物活性及對人體的保健預(yù)防作用日益受到人們的關(guān)注,其清除機體內(nèi)自由基、抗脂質(zhì)氧化、延緩機體衰老、預(yù)防心血管系統(tǒng)疾病、防癌
3、、抗輻射等生物活性功能的發(fā)現(xiàn),使多酚的研究和應(yīng)用越來越受到重視［3］。石榴中的多酚類成分主要是黃酮類化合物,濃縮單寧和水解單寧［4］。本文采用單因素實驗和正交實驗優(yōu)選了新疆石榴籽中總多酚的提取工藝，為石榴的進一步綜合利用提供一定的依據(jù)。 1儀器與材料 1.1儀器RE-52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海安亭電子儀器廠）；ZK-82B型真空干燥箱（上海市實驗儀器總廠）；UV-2550PC紫外-可見分光光度計(日本島津)；SartoriusBS110S電子天平（北京塞多利）；H左右有最大吸收。 2.1.1Folin-Ciocalteu試
4、劑的制備在1000ml的磨口圓底燒瓶中加入鎢酸鈉50g，鉬酸鈉12.5g,蒸餾水350ml，濃磷酸25ml，濃鹽酸50ml，充分混勻，小火回流10h。再加入硫酸鋰75g，蒸餾水25ml，溴水數(shù)滴，開口繼續(xù)沸騰15min，使溴水揮發(fā)完全為止。冷卻后定容至500ml，過濾，濾液呈綠色，置于棕色試劑瓶中保存。使用時加入1倍體積的蒸餾水，此液為應(yīng)用液，置于冰箱中可以長期保存［5］?！ ?.1.2對照品溶液的制備取沒食子酸對照品2.79mg，精密稱定，置50ml棕色容量瓶中，蒸餾水溶解定容至刻度，作為對照品溶液?！ ?.1.3標準曲
5、線的繪制精確吸取上述沒食子酸對照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5ml于25ml棕色容量瓶中，加適量蒸餾水，依次加入Folin-Ciocalteu試劑1ml和75g/L碳酸鈉溶液8ml，蒸餾水定容至刻度，充分混勻后在室溫下靜置1h，于波長760nm處分別測定吸光度值，以吸光度值（A）對沒食子酸含量（C）進行線性回歸，得回歸方程為A=0.1034C+0.0307，r=0.9999，沒食子酸濃度在1.11～7.81μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好?！ ?.1.4供試品溶液的制備稱取20g石榴籽粉末，置于1
6、000ml圓底燒瓶中，照各試驗項下條件，回流提取，過濾，真空濃縮，得石榴籽總多酚提取物，蒸餾水定容至100ml，精密吸取1ml置25ml容量瓶中，蒸餾水稀釋至刻度，作為供試品溶液?！ ?.1.5樣品測定方法精密吸取2ml供試品溶液于25ml棕色容量瓶中，依次加入Folin-Cio-calteu試劑1ml，75g/L碳酸鈉溶液8ml，蒸餾水定容至刻度，充分混勻后在室溫下靜置1h，于波長760nm處測定吸光度值，計算其濃度值?！ ?.2提取方法的篩選 2.2.1單因素實驗不同乙醇濃度對多酚提取率的影響：將提取次數(shù)固定為1次，
7、溶媒量固定為8倍，提取時間固定為1h，提取溫度固定為30℃，分別以20%，40%，60%，80%，100%的乙醇溶液為提取溶媒，考察不同濃度的乙醇對石榴籽中總多酚提取率的影響。結(jié)果見表1。表1不同乙醇濃度對石榴籽中多酚提取率的影響（略） 不同提取時間對多酚提取率的影響：將提取次數(shù)固定為1次，溶媒量固定為8倍，乙醇濃度固定為60%，提取溫度固定為30℃，分別以0.5，1.0，2.0，3.0，4.0h為提取時間，考察不同提取時間對石榴籽中總多酚提取率的影響。結(jié)果見表2。表2不同提取時間對石榴籽中多酚提取率的影響（略）不同提取
8、溫度對多酚提取率的影響：將提取次數(shù)固定為1次，溶媒量固定為8倍，提取時間固定為1h，乙醇濃度固定為60%，分別以30，40，60，80，100℃為提取溫度，考察不同提取溫度對石榴籽中總多酚提取率的影響。結(jié)果見表3。表3不同提取溫度對石榴籽中多酚提取率的影響（略）不同溶媒量對多酚提取率的影響：將提取次數(shù)固
