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《正柴胡飲體外抗甲型流感病毒和乙型流感病毒作用的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、正柴胡飲體外抗甲型流感病毒和乙型流感病毒作用的研究作者：趙萍，劉安平，劉妮，李青雅【摘要】為探討中藥復(fù)方正柴胡飲（柴胡、陳皮、防風(fēng)、芍藥、甘草、生姜等）的抗病毒作用，從體外抗病毒實驗對其抑制甲型流感病毒（FM1）和乙型流感病毒（昆科70B）的作用進行了研究。結(jié)果顯示：中藥復(fù)方正柴胡飲在無毒濃度1.56g／L、6.25g／L分別對FM1、昆科70B有明顯的抑制病毒致細胞病變作用?！娟P(guān)鍵詞】感冒／中藥療法；甲型流感病毒；乙型流感病毒；正粘病毒／藥物作用 流行型感冒是由流感病毒引起的急性傳染病，以其病原的易變性和
2、疾病的傳播速度快而著稱。臨床特征為呼吸道癥狀較輕而發(fā)熱、全身酸痛、乏力等中毒癥狀較重。對老年人、兒童和有潛在健康問題的人有合并并發(fā)癥甚至致命的危險，但目前合成藥中尚無理想的能消除癥狀的抗病毒藥物問世［1］。古方正柴胡飲，由明代著名醫(yī)家張介賓所創(chuàng)，對外感風(fēng)寒諸疾頗具療效。為研究其對流感病毒的抑制作用，我們選擇了甲型流感病毒(FM1)和乙型流感病毒(昆科70B)兩種流感病毒進行了體外抗病毒作用的實驗研究?！ ?材料與方法 1.1實驗材料 1.1.1藥物正柴胡飲全方六味(柴胡、陳皮、防風(fēng)、芍藥、甘草、生姜等)。
3、實驗用藥均經(jīng)生藥鑒定并按原方比例水煎濃縮，由本所實驗室制備。陽性對照藥物三氮唑核苷(病毒唑)，由湖北省醫(yī)工所提供，批號010804?！ ?.1.2毒種 1.1.2.1FM1由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所提供，于狗腎細胞株(MDCK)狗腎細胞傳代，以病變雞紅血球血凝法來判斷其滴度，在35℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！ ?.1.2.2昆科70B由昆明醫(yī)學(xué)研究所提供，于MDCK狗腎細胞傳代，以病變及雞紅血球血凝法來判斷其滴度，在35℃，5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 1.1.3細胞MDCK引自廣州市兒童醫(yī)院病毒室?！?/p>
4、 1.1.4細胞培養(yǎng)液和維持液各為含10％、2％小牛血清，100kU／L青霉素，鏈霉素的DMEM(GIBCOBRI，公司產(chǎn)品)。 1.2方法抗病毒實驗在96孔微量板上進行，每孔0.1ml，細胞數(shù)為3×104個，長成單層后，將藥液用維持液稀釋成不同濃度，拋掉原培養(yǎng)液后將不同濃度的藥液加入細胞孔中，0.1ml／孔，以細胞不出現(xiàn)病變的最小稀釋度為該藥液對細胞的無毒界限。通過毒性試驗觀察到正柴胡飲藥液6.25g／L和病毒唑1g／L濃度對細胞生長無明顯影響，同時在相應(yīng)敏感細胞上測定攻擊病毒之TCID50。實驗時設(shè)病毒
5、對照、細胞對照、藥物毒性對照及三氮唑核苷(病毒唑)對照，置37℃CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，每天在倒置顯微鏡下觀察病變并記錄。當(dāng)病毒對照孔細胞出現(xiàn)+++病變時，繼續(xù)觀察4d則終止。細胞出現(xiàn)病變的程度按以下6級標準記錄：細胞生長正常，無病變出現(xiàn)；細胞病變少于整個單層細胞的10％；細胞病變約占整個單層細胞的25％；細胞病變約占整個單層細胞的50％；細胞病變約占整個單層細胞的75％；細胞病變約占整個單層細胞的75％以上。 2結(jié)果 表1結(jié)果表明：正柴胡飲煎劑在1.56g／L濃度下，對FM1有較好的抑制病變作用，在6.25g／
6、L濃度下對昆科70B有較好的抑制病變作用。陽性藥病毒唑25μg/ml時能完全抑制病毒所致病變。該實驗重復(fù)2次，結(jié)果與表1完全一致。 表1正柴胡飲在MDCK上對病毒致病變抑制作用（略） 注：+表示不抑制；-表示抑制?！ ?討論 流感在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認為，是由病毒引起，病毒感染首先入侵鼻咽、口咽、喉部等呼吸道的纖毛柱狀上皮細胞內(nèi)進行復(fù)制，借神經(jīng)氨酸酶的作用而釋出，再侵入其他柱狀上皮細胞引起變性、壞死、脫落，從而引起感冒癥狀。每年全球約有10％的人口即6億人患流行性感冒，我國被國際上公認是流感的多發(fā)地。自1957年
7、以來3次流感大流行均首發(fā)于我國，且在香港地區(qū)和內(nèi)地分別發(fā)現(xiàn)了禽H5N1和H9N2亞型毒株能感染人［2］，嚴重危脅人類健康。目前西方和國內(nèi)臨床用于抗流感病毒的藥物有金剛烷胺(amatadine)、甲基金剛烷胺(rimantadine)、病毒唑(Virazole)等，前二者可引起中樞性眩暈和迅速耐藥毒株的出現(xiàn)［1］，而低劑量口服病毒唑1.0g/d無明顯抗病毒作用，大劑量口服對無并發(fā)癥流感患者退熱與癥狀消除的作用較快［3］，但大劑量口服的毒性較大，且對乙型流感無治療作用。祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中用中草藥治療流感歷史悠久。流感
8、，在祖國醫(yī)學(xué)屬風(fēng)寒傷于足太陽經(jīng)，即時病的范疇?，F(xiàn)代的體外實驗也證實了中草藥的抗病毒作用。中藥復(fù)方正柴胡飲引自古方，清熱解毒，解熱鎮(zhèn)痛，亦有對病毒的抑制作用。我們的實驗顯示：正柴胡飲在無毒濃度1.56g／L下在體外對FM1有較好的抑制作用，在無毒濃度6.25g／L下在體外對昆科70B有較好的抑制作用。此次實驗采用效果確切的抗病毒藥物病毒唑做陽性藥物，與正柴胡飲進行對照，實驗結(jié)果確實可信，我們將在此基礎(chǔ)
