研究黃芩素的體內(nèi)抗甲型流感病毒作用.docx

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1、研究黃芩素的體內(nèi)抗甲型流感病毒作用摘要：　【目的】觀察黃芩素的體內(nèi)抗甲型流感病毒作用?！痉椒ā窟x用NIH小鼠，隨機(jī)分為正常對(duì)照組，模型組，病毒唑組（劑量為007g·kg-1·d-1）,黃芩素高、中、低劑量組（劑量分別為100、10、1μg·kg-1·d-1）;采用甲1型流感病毒肺適應(yīng)株FM1滴鼻感染復(fù)制模型后，檢測(cè)各組肺指數(shù)、肺指數(shù)抑制率、存活率及死亡保護(hù)率，并行肺組織病理檢查?！窘Y(jié)果】模型組肺指數(shù)和存活率顯著性降低，與正常對(duì)照組比較差異有顯著性意義（P＜001），肺組織出現(xiàn)明顯炎性突變；黃芩素高劑量組可顯著性升高肺指數(shù)和存活率，與模型組比較差異有顯著性意義（P＜005

2、）,并可明顯改善模型小鼠的肺組織炎性突變，作用與陽(yáng)性對(duì)照藥病毒唑相仿。【結(jié)論】黃芩素具有一定的體內(nèi)抗甲型流感病毒作用。關(guān)鍵詞：黃芩素/藥理學(xué)；病毒性肺炎/中藥療法；流感病毒，甲型；肺組織/病理學(xué)；疾病模型，動(dòng)物；小鼠　　黃芩是常用中藥，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎等功效［1］。黃芩素(baicalein，BAI)是其主要有效成分之一，化學(xué)結(jié)構(gòu)屬黃酮類，具有多種藥理作用，如：抗菌、抗病毒、抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、抗氧化、清除氧自由基、抗癌、抗腫瘤、抗凝、抗血栓形成和保護(hù)肝臟、心腦血管、神經(jīng)元等作用［2］。目前臨床主要用于抗炎和抗菌，但其抗流感病毒作用尚未見報(bào)道。本研究選擇甲1型流

3、感病毒FM1株，觀察BAI的體內(nèi)抗病毒作用，現(xiàn)報(bào)道如下?！　?材料與方法　　11藥物　　黃芩素購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：071012；病毒唑由湖北醫(yī)工所提供，批號(hào)：060408?！　?2動(dòng)物　　NIH小鼠由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，雌雄不拘，體質(zhì)量14～16g,符合清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，合格證號(hào)：SCXK(粵)020030002，粵監(jiān)證字2004A018?！　?3流感病毒株　　甲1型流感病毒株由廣東省防疫站病毒室提供，在狗腎細(xì)胞（MDCK）中傳代，以病變及公雞紅血球血凝法來(lái)判斷其滴度［3］，在35℃、體積分?jǐn)?shù)5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?！　?4對(duì)小鼠流感病毒性肺炎的

4、影響　?。?］將NIH小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、病毒唑組（劑量為007g·kg-1·d-1）及黃芩素高、中、低劑量組（劑量分別為100、10、1μg·kg-1·d-1），于感染前1d開始灌胃給藥，02mL/次，連續(xù)5d，對(duì)照組給予等容積蒸餾水灌胃。各組在乙醚輕度麻醉下感染甲1型流感病毒鼠肺適應(yīng)株FM115個(gè)半數(shù)致死劑量（LD50），感染后96h處死，稱體質(zhì)量后取肺稱質(zhì)量，逐個(gè)算出肺指數(shù)(lungindex，LI）：wLI=mlung/mboby×100，以及肺指數(shù)抑制率：pLI抑制=（w模型對(duì)照組-w給藥組）/w模型對(duì)照組×100%。　　15對(duì)小鼠體內(nèi)感染流感病毒

5、的死亡保護(hù)作用　?。?］將小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、病毒唑組及黃芩素高、中、低劑量組，分別以流感病毒FM1株2個(gè)LD50滴鼻感染，給藥組自感染病毒1d開始到感染后4d灌胃給藥,02mL/次，對(duì)照組灌胃給予等容積蒸餾水，逐日觀察動(dòng)物發(fā)病和記錄死亡數(shù)，共觀察14d，計(jì)算死亡保護(hù)率：p死亡保護(hù)=（p模型組死亡-p給藥組死亡）/p模型組死亡×100%?！　?6病毒檢查　　取各組肺組織，行蘇木素—伊紅（HE）染色，光鏡下觀察各組肺組織病理改變情況。　　17統(tǒng)計(jì)學(xué)方法　　采用SPSS100統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。2結(jié)果　　21黃芩素對(duì)小鼠流感病毒性肺炎的影響　　表1結(jié)果顯

6、示，模型組肺指數(shù)顯著性降低，與正常對(duì)照組比較，差異有顯著性意義（P＜001）;黃芩素高劑量組肺指數(shù)與模型組比較差異有顯著性意義（P＜005），表明黃芩素對(duì)小鼠流感病毒性肺炎有治療作用。表1黃芩素對(duì)小鼠流感病毒性肺炎的影響（略）　　22黃芩素對(duì)體內(nèi)感染流感病毒小鼠的死亡保護(hù)作用　　表2結(jié)果顯示，黃芩素高劑量組存活率與模型組比較差異有顯著性意義（P＜005），表明黃芩素具有一定的死亡保護(hù)作用。表2黃芩素對(duì)體內(nèi)感染流感病毒小鼠的死亡保護(hù)作用　　23肺組織病理檢查結(jié)果　　正常對(duì)照組肺泡結(jié)構(gòu)清晰；模型組肺泡大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，漿液浸潤(rùn)，肺泡出現(xiàn)實(shí)性炎變；病毒唑組可見肺泡內(nèi)炎性滲

7、出物明顯減少，與正常對(duì)照組相近；黃芩素高劑量組肺泡壁有所增厚，但肺泡浸潤(rùn)不明顯，較模型組肺泡浸潤(rùn)情況明顯減輕；黃芩素中、低劑量組可見部分正常肺泡結(jié)構(gòu)消失，出現(xiàn)浸潤(rùn)及炎性實(shí)變。結(jié)果見圖1(彩圖見第200頁(yè))?！　?討論　　我國(guó)的感冒病人中除鼻病毒外，以流感病毒感染較為多見，并且呈周期性大流行，嚴(yán)重威脅著人類健康。國(guó)內(nèi)外臨床用于抗A型流感病毒的藥物有金剛烷胺(amatadine)、甲基金剛烷胺(rimantadine)、病毒唑(virazole)和干擾素等，前兩者可引起中樞性眩暈和迅速耐藥毒株的出現(xiàn)［5］；