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《苦參堿對肝卵圓細(xì)胞增殖模型大鼠notch1,jagged1mrna表達(dá)的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、苦參堿對肝卵圓細(xì)胞增殖模型大鼠Notch1,Jagged1mRNA表達(dá)的影響【關(guān)鍵詞】苦參堿；肝；卵母細(xì)胞；大鼠；Thy EffectofmatrineonexpressionsofNotch1,Jagged1mRNAinhepaticovalcellproliferationmodelrats 【Abstract】AIM:TostudytheexpressionsofNotch1,Jagged1mRNAinhepaticovalcellproliferationmodelratsandtheeffectofmatrineonth
2、em.METHODS:FortyeightmaleSDratslyseparatedinto4groupsaccordingtobodymass:modelgroup(groupA),loatrinegroup(groupB,5mg/100g),highdosematrinegroup(groupC,25mg/100g),controlgroup(groupD).TheexpressionofThy1proteinehistochemisty,andtheexpressionsofNotch1,Jagged1mRNAiquantita
3、tiveRTPCRmethod.RESULTS:paredRNA,Jagged1mRNAingroupARNA,Jagged1mRNAingroupCightbeoneofthemechanismsofinhibitingtheproliferationofhepaticovalcellsandinducingrathepaticovalcellstodifferentiateintomaturehepatocytes. 【Keyatrine;liver;oocytes;rats;Thy1;Notch1 【摘要】目的：研究肝卵圓細(xì)
4、胞增殖模型大鼠Notch1,Jagged1mRNA表達(dá)的變化及苦參堿對其的影響.方法：雄性SD大鼠48只按體重隨機(jī)分為4組：模型組（A組）；苦參堿小劑量（B組）；苦參堿組大劑量(C組)；D組即正常對照組.用免疫組化方法觀察造血干細(xì)胞標(biāo)記(Thy1)表達(dá)的變化、半定量RTPCR方法觀察肝組織中Notch1,Jagged1mRNA表達(dá)的變化.結(jié)果：與D組比較，A組Thy1蛋白,Notch1mRNA,Jagged1mRNA表達(dá)顯著升高（P0.01）,與A組比較,C組Thy1蛋白,Notch1mRNA,Jagged1mRNA表達(dá)顯著下調(diào)（P0
5、.01）.結(jié)論：苦參堿可有效的調(diào)節(jié)Notch信號通路、下調(diào)Thy1蛋白表達(dá)，可能是其抑制卵圓細(xì)胞過度增殖、誘導(dǎo)卵圓細(xì)胞向肝細(xì)胞方向定向分化的機(jī)制之一. 【關(guān)鍵詞】苦參堿；肝；卵母細(xì)胞；大鼠；Thy1；Notch1 0引言 卵圓細(xì)胞作為肝臟的干細(xì)胞在肝細(xì)胞損傷修復(fù)及癌變過程中起重要作用，但目前關(guān)于卵圓細(xì)胞的來源、特性、分化增殖的調(diào)控機(jī)制尚不十分清楚.研究證實多種細(xì)胞因子參與了卵圓細(xì)胞分化發(fā)育的調(diào)節(jié)過程〔1-2〕.本實驗建立了大鼠肝卵圓細(xì)胞增殖模型，觀察了卵圓細(xì)胞在肝組織內(nèi)的分布及Notch1,Jagged1mRNA在該模型中的表達(dá)
6、情況，并探討了苦參堿對其的作用. 1材料和方法 1.1材料苦參堿標(biāo)準(zhǔn)品購自中國藥品生物制品檢定所，二乙酰氨基芴（2AAF）購自Sigma公司，兔抗大鼠Thy1IgG購自SantaCruz公司，Notch1,Jagged1引物由上海生物工程公司合成，Trizol總RNA提取試劑盒,dNTPs,Oligo(dT)15Primer,MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶、TagDNA聚合酶均為美國Promega公司產(chǎn)品.雄性SD大鼠48只，體質(zhì)量130±20g,由河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供. 1.2方法雄性SD大鼠48只隨機(jī)分為模型組（A組），苦參堿小劑
7、量組（B組，按每100g大鼠5mg苦參堿灌胃），苦參堿大劑量組(C組，按每100g大鼠25mg苦參堿灌胃),正常對照組（D組）.A,B,C組飼以含0.15g/L二乙酰氨基芴（2AAF）飼料1,1RNA表達(dá)水平.總RNA抽提：應(yīng)用Trizol(一步法)總RNA提取試劑盒提取肝組織總RNA，采用分光光度法測定提取的總RNA含量及純度，A260/A280之間，計算出提取總RNA濃度.反轉(zhuǎn)錄：按Promega公司CDNA合成試劑盒說明操作，取RNA15μg,MMLV反轉(zhuǎn)錄酶1μL，總反應(yīng)體積25μL,37℃反轉(zhuǎn)錄50min,95℃5min滅活
8、反轉(zhuǎn)錄酶.引物設(shè)計：Notch1mRNA引物序列參照YujiNishikaRNA引物序列參照CharlotteHJ等〔4〕發(fā)表的文獻(xiàn)：上游:5＇atgcggtccccacggacgcg3＇，下游:5＇acactcagga
