非小細胞肺癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化與egfr突變以及臨床病理特征之間的關(guān)系的論文

《非小細胞肺癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化與egfr突變以及臨床病理特征之間的關(guān)系的論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。

1、非小細胞肺癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化與EGFR突變以及臨床病理特征之間的關(guān)系的論文【摘要】目的探討非小細胞肺癌（nsclc）上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(emt)與表皮生長因子受體(egfr)突變和臨床病理特征之間的關(guān)系。方法采用免疫組化法檢測nsclc患者癌組織中e鈣黏素和波蛋白的表達情況。采用卡方檢驗和logistic回歸分析，探討臨床病理特征和egfr基因型nsclc中emt的影響。結(jié)果62例nsclc標本中，上皮表型35.48%（22/62）。egfr突變nsclc中，上皮表型顯著高于野生型(77.78%vs18.18%；p<

2、0.0001)；女性顯著高于男性(54.55%vs25%；p=0.02)；腺癌高于其他病理類型(39.47%vs29.17%；p=0.4087)；不吸煙者稍高于吸煙者(42.42%vs27.59%；p=0.2231)；年齡<60歲和年齡≥60歲組差異無統(tǒng)計學意義(43.33%vs28.12%；p=0.211)，早期肺癌與晚期肺癌組差異無統(tǒng)計學意義(38.24%vs32.12%；p=0.6178)。結(jié)論egfr突變型、女性、非吸煙者、腺癌傾向于上皮表型，與egfr酪氨酸激酶抑制劑療效分布人群的臨床特征相一致?！娟P(guān)鍵

3、詞】上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化肺癌表皮生長因子受酪氨酸激酶抑制劑肺癌是世界上惡性腫瘤死亡的首要原因。盡管臨床醫(yī)師不斷提高了診治水平，肺癌對現(xiàn)有的手術(shù)及化放療的反應仍難盡人意。分子靶向治療由于其選擇性高、毒性低而倍受青睞。.針對腫瘤分子靶向治療中存在的如何選擇合適的患者人群及如何預測療效等問題也成為日益關(guān)注的焦點。上皮細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelialmesenchymaltransition,emt)是上皮細胞在與周圍間質(zhì)的相互作用過程中逐漸獲得了某些間質(zhì)細胞特有性狀的現(xiàn)象，以e鈣黏素（ecadherin）、連環(huán)蛋白（cat

4、enin）等表征上皮型指標蛋白的喪失以及波蛋白（vimentin）和纖維粘連蛋白（fibronectin）等表征間質(zhì)型指標蛋白的獲得為主要特征，并且與腫瘤細胞的原位侵襲和遠處轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系[1]。最新研究顯示，上皮型的肺癌對表皮生長因子受體(epidermalgrot狀態(tài)有望成為靶向治療療效的預測因素應用于臨床[2，3]。本研究將對非小細胞肺癌（nonsmallcelllungcancer,nsclc）的emt狀態(tài)與egfr基因型以及患者臨床病理特征間的關(guān)系進行探討，為ecadherin、vimentin、fi

5、bronectin等emt標志物作為治療預測因子最終應用于臨床做前期研究。1資料與方法1．1臨床資料收集上海市肺科醫(yī)院2003年9月～2004年6月行手術(shù)切除并經(jīng)病理證實的nsclc標本62例。其中男40例、女22例。中位年齡62歲（39～83歲）；病理類型：腺癌38例、鱗癌24例、鱗腺混合癌2例；按1997年uicc修訂的肺癌tnm病理分期標準：i期29例、ii期5例、iii期25例和iv期3例。各例術(shù)前均未接受化療和放療。1．2nsclc的egfr突變分析采用上海華舜生物有限公司小量組織細胞基因組dna快速抽提純化

6、試劑盒抽提冰凍組織的基因組dna。按照paez等[4]報道的方法，采用巢式pcr技術(shù)對egfr基因的18、19、21外顯子進行擴增。擴增片段包含外顯子及其相連的內(nèi)含子部分。pcr條件：變性95℃15min；95℃20s、60℃30s和72℃1min循環(huán)35次；延伸72℃10min。pcr產(chǎn)物送交上?；瞪锛夹g(shù)有限公司進行測序鑒定egfr基因18、19和21外顯子突變區(qū)域。1．3免疫組織化學檢測采用免疫組織化學方法（sp法)檢測nsclc組織中ecadherin和vimentin的表達。ecadherin和vime

7、ntin抗體均為鼠抗人單克隆抗體，購自上海長島公司，工作液濃度為1∶100。石蠟切片經(jīng)脫蠟、水化、抗原修復等處理后加入一抗4℃過夜。二抗37℃30min；dab顯色；蘇木素復染；鹽酸酒精分化；脫水、透明；中性樹脂封固。用已知陽性切片做陽性對照，pbs代替一抗做陰性對照。結(jié)果判定：胞膜和（或）胞漿著棕黃色染色顆粒提示陽性顯色結(jié)果。隨機觀察10個高倍視野，根據(jù)切片中癌細胞陽性數(shù)的有、無及陽性細胞的百分率將表達結(jié)果分為：陰性（-）為無棕黃色染色或染色陽性細胞數(shù)<10%；弱陽性（+）為陽性細胞數(shù)10%～24%；中等陽性（

8、++）為陽性細胞數(shù)25%～49%；強陽性（+++）為陽性細胞數(shù)≥50%。1．4統(tǒng)計學方法采用卡方檢驗分析emt現(xiàn)象和年齡、性別、腫瘤分期、組織類型、吸煙情況以及egfr基因型等因素的關(guān)系；logistic回歸分析進一步檢驗各因素與emt狀態(tài)的關(guān)系；計算kappa值對ecadherin染色和vimentin染色表征emt狀態(tài)一致性