廣棗總黃酮對cvb_3病毒引起細(xì)胞凋亡的影響

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1、廣棗總黃酮對CVB_3病毒引起細(xì)胞凋亡的影響第17卷第3期VoI.17No.3中蓮藥導(dǎo)最GuidingJournalofTraditionalChineseMedicineandPharmacy2011年3月March.2011廣棗總黃酮對CVB3病毒引起細(xì)胞凋亡的影響劉爽(內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院,內(nèi)蒙古呼和浩特010000)『摘要1目的:建立病毒性心肌炎的體外模型,用新的化學(xué)方法提取到含量較高的廣棗總黃酮,研究廣棗總黃酮抗病毒的效果方法:化學(xué)法提取廣棗總黃酮,高效液相法測定其含量.培養(yǎng)HeLa~胞和乳鼠心肌細(xì)胞,在HeLa~胞和心肌

2、細(xì)胞水平上對柯薩奇B病毒進(jìn)行毒力滴定,并測定廣棗總黃酮的藥物毒性,建立體外病毒性心肌炎模型,通過細(xì)胞病變抑制實(shí)驗(yàn)測定廣棗總黃酮體外抗柯薩奇病毒能力.采用Hoechst33258熒光單染觀察染色質(zhì)凝聚,觀察病毒性心肌炎發(fā)病過程中心肌細(xì)胞是否存在凋亡,以及運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測廣棗總黃酮是否抑制細(xì)胞凋亡.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用T檢驗(yàn).結(jié)果:成功建立體外病毒性心肌炎的模型,廣棗總黃酮在HeLa細(xì)胞和乳鼠心肌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中可有效抑制CVB3病毒引起的細(xì)胞病變數(shù)(P<O.05),對病毒繁殖及細(xì)胞凋亡有抑制作用.結(jié)論:成功建立體外細(xì)胞模型,通過體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)提

3、取的廣棗總黃酮對心肌細(xì)胞有保護(hù)作用,通過凋亡相關(guān)實(shí)驗(yàn)證實(shí)病毒性心肌炎發(fā)病過程中有心肌細(xì)胞凋亡,且廣棗總黃酮能抑制心肌細(xì)胞凋亡作用.『關(guān)鍵詞】廣棗總黃酮;病毒性心肌炎;CVB3;細(xì)胞凋亡『中圖分類號1R285.5[文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A[文章編號】1672—951X(201l】03—0087—03TheeffectofTFCtocellapoptosisinducedbyCVB3virusABSTRACTLiuShuangsecondaffiliatedhospitalofinnermongoliamedicalcollege,hohhotOLO

4、OOO)[Objectives】Toestablishmodelofviralmyocarditisinvitro,TodistillTFC(Totalflavonesofchoerospondiasaxillariesfructus1withanewmethod,Totesttheanti—viraleffectofTFC.Method:UsingchemicalmeanstodistillTFCandtestcontentwithHPLCmethod.TCID50ofCVB(coxsackievirusB1)wasdetermine

5、dwithReed—Muenchmethod,theanti—viraleffectofTFCinvitrowasvalidatedthroughcytopathiceffectexperiment.CardiomyocyteApoptosiswasperformedbyusingHoechst33258,Flowcytometry.Result:Theviralmyocarditismodelinvitrowassuccessfullyestablished,TFCcaninhibitCPE(P<0.05)inCPEexperi

6、ment.Virus-reproducinginhibitingexperimentshowsTFCcaneffectivelyinhibitcoxsackievirus,Loga—rithmValueraisemorethanoneunit,Apoptosisrateofcellswasreduced.Conclusion:weestablishedviralmycarditismud—elinvitroandprovedTFCisaneffectiveantiviraldrug.TFCcanreducetherateofapopto

7、sisinducedbyCVB3.[KeywordJTFC;VMC;CVB3;Apoptosis廣棗為蒙醫(yī)常用藥材,主要分布于華中,華南各省f區(qū))及貴州,云南,福建,浙江等省區(qū),是漆樹科南酸棗屬植物南皂苷具有專屙陛強(qiáng),顯色靈敏的優(yōu)點(diǎn),明顯優(yōu)于傳統(tǒng)顯色劑.3.2溶劑選擇對照品與供試品的溶解性試驗(yàn)結(jié)果顯示,二者在70%乙醇中易溶,溶解度優(yōu)于甲醇,經(jīng)試驗(yàn)70%乙醇對比色測定無干擾,故選擇70%乙醇作為供試品與對照品的溶劑.3.3提取方法比較對皂苷的提取方法進(jìn)行了比較試驗(yàn),結(jié)果顯示超聲與回流提取效果基本一致,而超聲具有操作簡便快速的優(yōu)點(diǎn),故選擇

8、了超聲處理的方法;對超聲時間考察結(jié)果顯示,超聲30min已提取完全,故確定超聲時間為30min.參考文獻(xiàn)[1】國家中醫(yī)藥管理局.中華本草第8冊【M】.上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,2000:252【2】康阿龍,

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