資源描述：
《電泳技術(shù)的臨床應(yīng)用完整版》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、現(xiàn)代電泳技術(shù)的臨床應(yīng)用Sebia廈門市第二醫(yī)院王友祥使用范圍和檢測原理電泳技術(shù)就是利用在電場的作用下,由于待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小,形狀等性質(zhì)的差異,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而對樣品進行分離,鑒定或提純的技術(shù).在生化檢測中,主要用于分離各類蛋白分子.發(fā)展歷程1809年俄國科學(xué)家列伊斯首先發(fā)現(xiàn)電泳現(xiàn)象1937年瑞典科學(xué)家Tiselius建立了界面電泳技術(shù),并首次證明了血清是由白蛋白及α,β,γ球蛋白組成的因此獲得1948年諾貝爾化學(xué)獎.1950年后,區(qū)帶電泳從發(fā)展到成熟.1980年以來,毛細管電泳逐漸受到
2、重視常用的電泳技術(shù)濾紙電泳醋酸纖維素薄膜電泳凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳:瓊脂糖凝膠適用于蛋白質(zhì)和核酸的電泳支持介質(zhì),成本低,結(jié)果易保存.聚丙烯酰胺凝膠電泳:最常用的定性分析蛋白質(zhì)的電泳方法,特別是用于蛋白質(zhì)純度檢測和測定蛋白質(zhì)分子量,一般用于科研.毛細管電泳:經(jīng)典電泳技術(shù)和現(xiàn)代微柱分離相結(jié)合的產(chǎn)物電泳技術(shù)的醫(yī)學(xué)應(yīng)用蛋白質(zhì)電泳分析是實驗室必備的檢測手段,可全面精確,描繪出患者蛋白質(zhì)的全貌.對疾病的早期診斷,療效觀察及預(yù)后判斷具有非常重要的臨床價值.蛋白的電泳檢測根據(jù)使用的染料或者是底物的不同，我們可以檢測到不同類型的蛋白:血清蛋白脂蛋白
3、(運送脂類)各種酶類血紅蛋白電泳技術(shù)在臨檢中的應(yīng)用急,慢性炎癥造血系統(tǒng)疾病:多發(fā)性骨髓瘤,巨免疫球蛋白血癥腎臟疾病肝臟疾病中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病:多發(fā)性硬化癥遺傳性疾病:地中海貧血代謝性疾病:糖尿病心血管疾病:心梗,動脈粥樣硬化惡性腫瘤正確解釋電泳結(jié)果 為臨床對疾病的判斷提供可靠參考gba2白蛋白a1:a1酸性糖蛋白,a1抗胰蛋白酶:結(jié)合珠蛋白,a2巨球蛋白,a脂蛋白,銅藍蛋白:轉(zhuǎn)鐵蛋白,血液結(jié)合素,C3補體,b脂蛋白:免疫球蛋白血清蛋白電泳蛋白染色血清蛋白電泳后會呈現(xiàn)出5或者6條帶.染色后,每個條帶呈現(xiàn)出的不同程度的染色對應(yīng)著各自的
4、蛋白濃度.如何檢測染色程度:需要使用光密度儀.正常的電泳圖譜出現(xiàn)單克隆免疫球蛋白的電泳圖譜蛋白電泳檢測的不同步驟制備膠片,加樣,啟動電源,開始電泳,染色,脫色,結(jié)果檢測血清蛋白電泳的目的是什么?檢測異常:含量的變化:條帶中蛋白含量的增加或減少性質(zhì)的變化:異常條帶的出現(xiàn)臨床意義將電泳作為常規(guī)檢測之一,基于蛋白含量的變化,有助于我們對以下疾病的篩查:炎癥營養(yǎng)不良肺氣腫臨床意義對異常條帶的篩查,有助于我們檢測下列疾病:骨髓瘤巨球蛋白血癥(Waldenstrom)細菌和病毒感染在這些情況下,必須要做其他輔助測試,比如說免疫固定,使用不同類
5、型的抗血清對異常蛋白進行檢測.(對于后期治療有很重要的指導(dǎo)意義)電泳結(jié)果的臨床應(yīng)用及常見電泳結(jié)果分析電泳檢測什么情況下必須進行電泳檢測?A/G比例變化血液沉降速度發(fā)生異常變化出現(xiàn)惡性疾病征兆在免疫球蛋白定量檢測中發(fā)現(xiàn)某一種免疫球蛋白出現(xiàn)大量異常增加電泳區(qū)帶分析雙白蛋白,或者一條寬峰,或者在白蛋白條帶出現(xiàn)附屬條帶可能是由以下原因造成:遺傳性雙白蛋暫時性的雙白蛋白血癥可能是由于藥物刺激導(dǎo)致的急性胰腺炎導(dǎo)致的雙白蛋白血癥:大量的胰酶的出現(xiàn)可以導(dǎo)致白蛋白降解白蛋白區(qū)帶雙白蛋白血癥雙白蛋白血癥在下列情況下白蛋白會出現(xiàn)下降:-腎病綜合癥,蛋白
6、流失,胃腸病:檢查尿蛋白-淋巴細胞增生綜合征-營養(yǎng)不良-肝臟功能不全-慢性炎癥-嚴重?zé)齻?血液稀釋在下列情況中白蛋白會出現(xiàn)增加:-脫水癥狀-血液濃縮-白蛋白注射Alpha1globulins(α1球蛋白區(qū)帶)將會在下列情況下出現(xiàn)下降:-蛋白流失-肝功能不全-先天性抗胰蛋白酶缺乏癥出現(xiàn)兩個條帶:-抗胰蛋白酶的不同基因型出現(xiàn)增加:-炎癥癥狀A(yù)1AT不同的基因型A1AT等電聚焦電泳急性炎癥電泳圖譜Alpha2globulins(α2球蛋白區(qū)帶)下列情況中出現(xiàn)下降:-肝功能不全-血管內(nèi)溶血出現(xiàn)兩個條帶:-溶血標(biāo)本(結(jié)合珠蛋白-血紅蛋白復(fù)合
7、體)-結(jié)合珠蛋白不同基因型-出現(xiàn)單克隆免疫球蛋白(帶有大量負電荷)*Alpha2條帶在電泳圖譜中,是一個很特殊的條帶.因為這一條帶中含有五種蛋白:HDL,Haptoglobin,Alpha2Macroglobulin,CeruloplasminandGcglobulin.由于結(jié)合珠蛋白有不同的基因表現(xiàn)型,增加了這一條帶的復(fù)雜程度.結(jié)合珠蛋白非常靠近Alpha1條帶;出現(xiàn)溶血時結(jié)合珠蛋白的遷移率會發(fā)生改變.同時,由于HDL的含量或者是存放過久的標(biāo)本,HDL的遷移速度可能會更快.溶血的標(biāo)本出現(xiàn)在a2區(qū)域的單克隆免疫球蛋白下列情況下Al
8、pha2區(qū)域會出現(xiàn)增加現(xiàn)象:-炎癥癥狀-腎病綜合征-出現(xiàn)游離輕鏈腎病綜合征Betaglobulins(β球蛋白區(qū)帶)在下列情況下會出現(xiàn)下降:-肝功能不全-C3長期缺乏或者C3代謝過快(alsoinagingsample,C3denaturation
