植物組培復習總結

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1、第一章植物細胞組培：在離體條件下利用人工培養(yǎng)基對植物器官、組織、細胞原生質(zhì)體等進行培養(yǎng)，使其長成完整株體。類型1器官培養(yǎng)2莖尖分生組織培養(yǎng)3愈傷組織培養(yǎng)4細胞培養(yǎng)5原生質(zhì)體培養(yǎng)植物組培特點:1培養(yǎng)條件可認為控制2生長周期短，繁殖率高3管理方便，利用工廠化生產(chǎn)和自動化控制植物細胞全能性：每個植物體細胞或性細胞都具有該植物的全套遺傳基因，因此在一定條件下培養(yǎng)都可發(fā)育成一個與母體一樣的植株。植物細胞變現(xiàn)全能性必須經(jīng)過的步驟:成熟細胞——分生細胞——胚狀體——完整植株成熟細胞——愈傷組織——出根出芽——完整植株愈傷組織:原本指植物受傷后在表面形成的一團薄壁細胞。植物組培中特指人工培養(yǎng)基

2、上形成的無數(shù)生長的薄壁細胞。脫分化：已經(jīng)完全分化定型的細胞，經(jīng)過誘導成為重新恢復分裂能力的細胞的過程。誘導細胞脫分化是處于抑制的，需要外接條件刺激，在各條件中，激素起重要作用。4類植物1有些植物只需生長素——IAA吲哚乙酸NAA萘乙酸2,4-D如菊苣2有些僅需細胞激動素蘿卜大豆3須加細胞激動素和生長素煙草胡蘿卜馬鈴薯4不需加任何激素煙草愈傷組織再分化：植物成熟細胞經(jīng)過脫分化后（形成愈傷組織后），由愈傷組織再形成完整植株的過程。植物組培過程取組織——形成愈傷組織——幼胚——植物幼體——成熟植株脫分化再分化*以高度分化的動物體細胞的細胞核具有全能性植物組培動物組培原理植物細胞全能性

3、細胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖、植物生長調(diào)節(jié)劑葡萄糖、動物血清培養(yǎng)結果植物植株細胞系、細胞株培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株等獲得細胞或細胞分泌物植物組培發(fā)展簡史探索階段施萊登施旺創(chuàng)立細胞學說提出理念細胞學說要點1動植物均由細胞組成2所有細胞來自其他細胞3卵和精子是細胞4單個細胞可分裂形成組織5細胞遺傳全能性；組培技術哈勃蘭特成功培育出植物提供理論基礎奠基階段懷特配制出培養(yǎng)基認識到維生素和植株激素在植物組培中的重要作用崔徵用不同種類和比例植物激素處理離體培養(yǎng)的煙草莖段和髓發(fā)現(xiàn)腺嘌呤和生長素的比例是控制芽和根形成的主要條件之一斯圖爾特證實哈波蘭特50年前

4、理論正確性快速發(fā)展階段MS培養(yǎng)基PEG原生質(zhì)體融合法植物遺傳轉(zhuǎn)化體細胞無性系變異人工種子植物組培應用1增加遺傳變異性，改良作物2繁殖植物無性系：組培中從一個單細胞、一塊愈傷組織、一個芽等器官都可獲得無性系。無性系就是用植物體細胞繁殖所得的后代。植物組培的無性系5種原球莖經(jīng)原球莖形成植物蘭花愈傷發(fā)生型細胞或愈傷組織通過不定芽形成植株煙草愈傷組織胚狀體發(fā)生型細胞或愈傷組織通過胚狀體胡蘿卜體細胞培養(yǎng)器官型離體莖花芽等直接產(chǎn)生小植株百合無菌短枝扦插腋芽，連同短枝經(jīng)滅菌后在無菌條件下培養(yǎng)，使其生根3有用化合物的工業(yè)化生產(chǎn)培養(yǎng)物低溫貯藏和種質(zhì)庫的建立生物科學的發(fā)展三大成就生苦克隆技術基因工

5、程干細胞技術植物基因工程技術發(fā)展對植物育種影響核心DNA重組技術T-DNA轉(zhuǎn)化原理植物細胞全能性通過揭示T-DNA轉(zhuǎn)化原理，改造Ti質(zhì)粒并構建植物表達載體系統(tǒng)，誘導轉(zhuǎn)基因細胞分化。發(fā)展最快領域?？寺V義一個細胞個體無性繁殖產(chǎn)生的后代基因克隆是指基于大腸埃希菌的DNA片段（或基因）的擴增過程目標DNA的獲得、重組載體的構建、受體細胞的轉(zhuǎn)化以及重組細胞的篩選和繁殖植物遺傳轉(zhuǎn)化：將外源基因轉(zhuǎn)移到植物體內(nèi)穩(wěn)定的整合、表達與遺傳的過程先決條件建立穩(wěn)定高效的轉(zhuǎn)化體系主要方法農(nóng)桿菌法基因槍法花粉管通道法顯微注射法電擊法聚乙二醇法基因組學：最早指基因組作圖和測序。后來經(jīng)發(fā)展科學家定義為研究生物

6、基因組的結構和功能的科學。分為結構基因組學和功能基因組學兩大部分。DNA分子標記直接分子水平檢測DNA差異DNA水平上遺傳變異的直接反應現(xiàn)在有數(shù)十種對植物育種影響篩選分子標記，構建分子標記遺傳圖普，為植物育種，特別是數(shù)量性狀遺傳育種提供參考第二章基本設備：超凈工作臺植物組培用具培養(yǎng)基配置用具——燒杯容量瓶量筒移液器培養(yǎng)用具——試管三角瓶培養(yǎng)皿封口膜接種用具——酒精燈鑷子噴霧器解剖刀用具洗滌——洗滌劑酸洗轉(zhuǎn)基因廢棄物必須滅菌用具滅菌——干熱滅菌酒精灼燒過濾0.2um小型器具——分注器血球計數(shù)器移液器過濾滅菌器常用儀器——酸度計天平磁力攪拌器高壓蒸鍋滅菌器干燥滅菌箱離心機電冰箱搖床

7、培養(yǎng)箱顯微鏡培養(yǎng)室潔凈培養(yǎng)架植物生長專用燈25℃70%-80%濕度培養(yǎng)室和接種室滅菌2%新杰爾敏擦洗75%乙醇噴霧UV照射20MIN（紫外）器皿和接種工具滅菌解剖刀鑷子剪刀等采用干熱滅菌法烘箱滅菌120℃1H外植體滅菌原則：充分滅菌不損傷外植體不同外植體滅菌要求不一樣常用方法75%乙醇（無毒濕潤植物）氯化汞（有殘毒）次氯酸鈉（無害）培養(yǎng)基滅菌方法高溫高壓蒸汽滅菌過濾滅菌植物組織培養(yǎng)基主要成分：水無機成分大量元素NPKCa（平衡體內(nèi)離子）MgS微量元素鐵硼猛鋅銅鉬鈷氯有機物質(zhì)硫胺素VB1鹽酸吡