foxp3調(diào)節(jié)性t細(xì)胞在喉癌中的表達(dá)及意義

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1、Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在喉癌中的表達(dá)及意義劉昉1李瑞玉1趙苗青2(1福建省立醫(yī)院耳鼻喉科/福建醫(yī)科大學(xué)省立臨床醫(yī)學(xué)院350001)(2山東省立醫(yī)院病理科)【摘要】目的研究Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Foxp3+Treg)在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)和臨床病理特征關(guān)系。方法采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)36例喉鱗狀細(xì)胞癌和15例正常喉部組織中Foxp3+Treg的表達(dá)，并分析其與臨床病理特征的相關(guān)性。結(jié)果喉癌組織中Foxp3+Treg表達(dá)顯著多于正常組織，差異顯著(P<0.01)；低分化組Foxp3+Treg細(xì)胞數(shù)

2、明顯高于中高分化組(P<0.01)；有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Foxp3+Treg細(xì)胞數(shù)高于無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。結(jié)論喉癌組織中Treg細(xì)胞增多可能導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸，Treg細(xì)胞表達(dá)受腫瘤相關(guān)因素的影響，而其數(shù)量變化可能與喉癌的發(fā)生發(fā)展有直接關(guān)系。【關(guān)鍵詞】TregFoxp3喉癌免疫組織化學(xué)【中圖分類號(hào)】R730.2【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】2095-1752(2012)18-0035-02調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Treg)是CD4+T淋巴細(xì)胞的分支之一，它可通過抑制各種生理性和病理性免疫反應(yīng)，包括抑

3、制病原微生物、同種器官移植和腫瘤的細(xì)胞免疫等，從而維持著機(jī)體的自身免疫耐受和免疫穩(wěn)態(tài)。腫瘤微環(huán)境中的Treg細(xì)胞能夠識(shí)別腫瘤相關(guān)性自身抗原，并能抑制針對(duì)腫瘤抗原的T細(xì)胞免疫應(yīng)答,因此Treg細(xì)胞在抗腫瘤免疫砬答的免疫抑制和免疫逃逸過程中起著重要作用［1］。頭頸部惡性腫瘤的研究也證實(shí)其微環(huán)境可嚴(yán)重?fù)p害多種免疫細(xì)胞，鈕括NK細(xì)胞、單核細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞。轉(zhuǎn)錄因子Foxp3,是目前公認(rèn)的Treg的特異性分子標(biāo)志，其基因表達(dá)產(chǎn)物可控制CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)的生長(zhǎng)、分化和成熟［2］。通過Tre

4、g細(xì)胞對(duì)抗腫瘤細(xì)胞免疫的免疫抑制，F(xiàn)oxp3在腫瘤的發(fā)牛.、發(fā)展中起到重要作用。喉癌是常見的頭頸部惡性腫瘤之一，木研究采用免疫組化方法檢測(cè)Foxp3+Treg在喉癌組織中的表達(dá)水平及其與患者臨床病理特征的關(guān)系，探討Foxp3在喉癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。1材料和方法1.1患者和樣本采集36例標(biāo)本取自福建省立醫(yī)院耳鼻喉科2008.8-2010.12月行手術(shù)切除喉癌患者，其中34例，女2例；年齡45?79歲，平均年齡64歲；腫瘤組織高分化16例，中分化11例，低分化9例；T1?T2期21例，T3?T4期15例

5、；有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移11例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移25例。15例對(duì)照來源于喉癌患者正常的喉部組織。所有病例均未行放、化療和生物免疫治療，均為首次手術(shù)，所有標(biāo)本經(jīng)病理學(xué)診斷證實(shí)。標(biāo)本經(jīng)福爾馬林固定，石蠟包埋，4μm厚連續(xù)切片，常規(guī)H-E染色和免疫組織化學(xué)染色。1.2檢測(cè)方法1.2.1免疫組織化學(xué)染色鼠抗人Foxp3單克隆抗體（Abeam公司）；即用型免疫組化超敏SP試劑盒、DAB顯色試劑盒均為福州邁新生物技術(shù)公司產(chǎn)品。常規(guī)SP法，每次染色設(shè)置陽性（喉癌組織）和陰性對(duì)照（PBS代替一抗）。結(jié)果判定，陽性細(xì)胞形態(tài)

6、完整，結(jié)構(gòu)清晰，棕黃色顆粒特異性定位于細(xì)胞核。1.2.2免疫組織化學(xué)結(jié)果觀察采用雙盲法進(jìn)行觀察，隨機(jī)對(duì)每張切片選擇5個(gè)高倍視野（400×）計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞數(shù)，求其平均值。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)以x-&plUsmn;S表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)和Spearman等級(jí)相關(guān)分析，以P<0.05為差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；P<0.01為差異非常顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果（見圖）2.1喉癌組織高表達(dá)Foxp3+TregFoxp3+Treg細(xì)胞形態(tài)完整，結(jié)構(gòu)明晰,DAB顯

7、色細(xì)胞核棕黃色染色,散在分布于腫瘤組織中。腫瘤組織中陽性細(xì)胞的平均浸潤(rùn)數(shù)目（31.40±10.89）高于正常組織（2.70±2.35）P<0.01,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.2喉癌組織Foxp3+Treg表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系對(duì)喉癌組織Foxp3+Treg分布與艽臨床病理特征進(jìn)行分析，結(jié)果顯示：低分化組Foxp3+Treg細(xì)胞數(shù)(47.89±5.58)顯著高于中分化組(26.72±4.34)和高分化組(25.43±5.56),P<0.0

8、1；中分化組稍高于高分化組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(圖1、2、3)。Spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示Foxp3+Treg細(xì)胞數(shù)與腫瘤細(xì)胞分化等級(jí)間存在相關(guān)(相關(guān)系數(shù)0.65，P=0.000)。冇頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Foxp3+Treg細(xì)胞數(shù)(40.4±14.2)高于無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(27.50±5.98),P<0.05?；颊叩哪挲g、病史、腫瘤的原發(fā)部位及腫瘤大小(T)與Foxp3+Treg細(xì)胞數(shù)之間的相關(guān)性研究未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1)。表