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《乙肝表面抗原定量檢測與hbv-dna結(jié)果的相關(guān)性分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、乙肝表面抗原定量檢測與HBV-DNA結(jié)果的相關(guān)性分析劉瑞菡1,2陳俊清1董亮3（通訊作者）（1孝感市中心醫(yī)院檢驗科湖北孝感432000）（2武漢大學醫(yī)學院湖北武漢430000；3孝感市中心醫(yī)院輸血科湖北孝感432000）【摘要】目的探討化學發(fā)光化法乙肝表面抗原定量測定與HBV-DNA水平及乙肝病毒標志物模式之間相互關(guān)系。方法運用化學發(fā)光法、熒光定量PCR（FQ-PCR）及EUSA三種方法同時檢測173清標木，并對其結(jié)果應用統(tǒng)計學方法加以對比分析。結(jié)果173例患者血清HBsAg含量與HBV-DNA及乙肝病毒標志物檢測結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學分析處理，顯示其具有良好的相關(guān)性。結(jié)論化學發(fā)光法定量檢測HB
2、sAg能較準確、快速地反映體內(nèi)乙肝病毒復制情況。【關(guān)鍵詞】乙肝表面抗原乙肝病毒DNA熒光定量PCR酶聯(lián)免疫吸附乙型肝炎病毒是危害最嚴重的病毒性肝炎之一,我岡是乙型肝炎病毒（HBV）感染的高發(fā)區(qū)，人群HBV感染率達60%左右，其中HBV攜帶率約占10%［1］。肝病毒感染的診斷主要依賴于測定血清中乙肝病毒抗原-抗體標志物（乙肝兩對HBV-M）和乙肝病毒核酸（HBV-DNA）含量（熒光定量PCR檢測），將其作為臨床分析和判斷乙肝患者病情、療效及預后的主要依據(jù),但由于兩對半組合模式復雜多樣,導致部分患者的HBV感染復制狀況難以斷;HBV-DNA雖是乙肝病毒感染和復制的特異性指標，表明其具有傳染
3、性的最有力的證據(jù)［2-3］，但受到實驗室要求的嚴格限制，無法快速檢測。木文運用化學發(fā)光法對173份清標木HBsAg作出定量檢測，并結(jié)合HBV-DNA及兩對半結(jié)果，希望能對乙肝患者的臨床診斷、治療及預后提供及時、準確的依據(jù)。1材料與方法1.1標木來源:2012年3月至2012年5月間我院住院患者173例（主要是感染科、消化內(nèi)科的病人），留取靜脈血分離血清，-20°C保存?zhèn)錂z。1.2儀器及試劑:HBsAg定量檢測所用儀器系美國雅培公司的i2000SR免疫發(fā)光檢測系統(tǒng)，診斷試劑均由雅培公司提供;HBV-DNA測定儀系美國PerkinElmer公司的PE7000自動熒光PCR儀，F(xiàn)Q2PCR試
4、劑盒由中山大學達安基因股份有限公司提供，試劑盒的靈敏度為200copies/ml;HBV-MELISA診斷試劑盒由上?？迫A生物技術(shù)有限公司提供1.3檢測方法：將-20°C冷凍保存的標本取出解凍復融。173份按乙肝兩對半不同模式分為8組，見表1。用生理鹽水以不冋的稀釋倍數(shù)稀釋各組血清樣本:乙肝大三陽組按1:500稀釋，乙肝小三陽組和HBsAg(+)、HBcAb(+)組按1:20稀釋，其余組均以原倍檢測。將稀釋好的血清標本嚴格按照說明書進行操作，測定HBsAg含量，單位為IU/ml。1.4數(shù)據(jù)處理：將測得的各組HBV-DNA拷W數(shù)及HBsAg含量(IU/ml)進行對數(shù)轉(zhuǎn)換，并以-x&plu
5、smn;s表示，以HBV-DNA對數(shù)值為橫坐標,HBsAg數(shù)值為縱坐標，求線性冋歸及相關(guān)系數(shù)⑺。2結(jié)果(表-1)2.1HBsAg定量與乙肝兩對半及HBV-DNA檢測結(jié)果比較見表-1。2.2乙肝表面抗原含量與HBV-DNA相關(guān)性分析：以HBV-DNA為橫坐標,HBsAg為縱坐標，發(fā)現(xiàn)二者存在明顯的正相關(guān)，其相關(guān)系數(shù)(r>=0.93,當HBsAg>300IU/ml(102.5≈300),HBV-DNA即可出現(xiàn)陽性。3討論化學發(fā)光標記免疫測定是用化學發(fā)光劑直接標記抗原或抗體的一類免疫測定方法，其檢測結(jié)果具有靈敏度高、重復性好、特異性強、準確性佳、檢測快速、無放射性危害等優(yōu)點
6、［4-5】。雅培i2000SR系統(tǒng)是基于化學微粒子免疫分析(CMIA)檢測技術(shù)的全自動免疫分析系統(tǒng)，以吖啶酯作為標記發(fā)光劑，能夠?qū)σ腋蝺蓪Π胱鞒龆?、準確、快速的分析。本文應用該系統(tǒng)對我院住院患者173例血清標本，作乙肝表面抗原定量分析，發(fā)現(xiàn)其與乙肝兩對半HBV-DNA具有良好的相關(guān)性。乙肝大三陽組45例中，44例HBV-DNA陽性，表明HBV均奮活動性復制［6-8】，我們測得的DNA陽性組HBsAg含量為7.2±2.02IU/ml,其中1例HBV-DNA陰性患者，測得的HBsAg僅為2.85IU;36例小三陽組中，19例HBV-DNA陽性，說明小三陽患者只有半數(shù)左右人群
7、體內(nèi)含有HBV-DNA,而我們測得的19例HBV-DNA陽性者HBsAg為3.13±1.30IU/ml,與DNA陰性者2.15±0.60IU/ml有顯著性差異，說明小三陽患者乙肝表面抗原的高低可反映體內(nèi)HBV活動性復制的情況及水平;25例HBsAg(+)、抗-HBc(+)患者血清HBV-DNA陽性率達48%,HBsAg測定值為3.01±0.64IU/ml,與小三陽患者無明顯差異，可能為血清轉(zhuǎn)換期或前C區(qū)
