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《松花粉總黃酮對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用論文》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、松花粉總黃酮對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用論文【摘要】目的研究松花粉總黃酮對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用,探討其療效機制。方法松花粉總黃酮予小鼠連續(xù)灌胃給藥10d,用CCl4造成小鼠急性肝損傷,測定小鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量,以及肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平,觀察光鏡下小鼠肝組織的病理變化。結(jié)果松花粉總黃酮高、中、低各劑量組均能抑制小鼠腹腔注射CCl4引起的急性肝損傷所致的ALT和AST的升高,同時能升高肝組織中SOD的活性,并能降低MDA的含量;減輕肝組織壞死程度。結(jié)論松花粉總黃酮對四氯化碳所致的小鼠急
2、性肝損傷具有保護(hù)作用.freelassoniana,油松P.tabulaeformi或同屬數(shù)種植物于春季花剛開時,采摘花穗曬干收集,除去雜質(zhì)所得的淡黃色細(xì)花粉,其成分穩(wěn)定、不含激素,是花粉產(chǎn)品中的佼佼者。松花粉是我國傳統(tǒng)食藥兼用的花粉品種,神農(nóng)本草、本草綱目等多種醫(yī)籍中均有記載,有潤心肺、益氣、祛風(fēng)止血、養(yǎng)顏益志、強身健體的功能1。作為古老的藥源和營養(yǎng)源,國家衛(wèi)生部近年已確認(rèn)松花粉為新資源食品,并將其列為普通食品管理2。松花粉中的多種酶、核酸、有機酸、黃酮等生物活性物質(zhì)能調(diào)節(jié)人體機能,具有延緩衰老,促進(jìn)新陳代謝的功能,對于保健及功能藥物的開發(fā)具有重要意義3。本研究采用CCl4小鼠
3、急性肝損傷模型,運用酶活力測定,抗脂質(zhì)過氧化物測定以及形態(tài)學(xué)觀察等方法,研究松花粉總黃酮(FlavoneinPinusMassonianapollen,F(xiàn)PMP)對小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用并探討其保護(hù)機制。1材料1.1藥物馬尾松花粉采自云南騰沖高黎貢山南麓。將松花粉曬干后冷凍超微粉碎,石油醚回流脫脂,95%乙醇回流浸提,提取后減壓回收乙醇,浸膏加適量水溶解,取水層濃縮后加入已處理好的聚酰胺柱中洗脫,至洗脫液中不含黃酮類成分為止,回收乙醇,水浴上揮干即得松花粉總黃酮,以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)測定黃酮含量為67.80%。松花粉總黃酮用雙蒸水配成所需濃度。1.2試劑聯(lián)苯雙酯滴丸(廣州星群藥業(yè)股份有
4、限公司);四氯化碳(天津市四通化工廠);魯花純正花生油;ALT,AST,MDA,SOD試劑盒(南京建成生物工程研究所)。1.3儀器高速冷凍離心機(BECKMAN儀器公司J2-HS722);生化分析儀(日本日立公司Hitachi7600-020);分光光度計(南京第四分析儀器有限公司);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海予華儀器有限公司);電熱恒溫水浴箱(杭州中拓儀器有限公司)。1.4動物60只雄性昆明種小鼠,體質(zhì)量(20±2)g,南方醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)動物實驗中心提供。2方法2.1模型建立4,5取昆明種小鼠60只,隨機分為6組,即空白對照組、聯(lián)苯雙酯組、CCl4模型組及松花粉總黃酮高、中、低劑量組。聯(lián)苯
5、雙酯組灌胃給予聯(lián)苯雙酯混懸液150mg·kg-1;松花粉總黃酮3個劑量組分別灌胃給予松花粉總黃酮15,30,60mg·kg-1??瞻讓φ战M和CCl4模型組給予同等量的蒸餾水。連續(xù)10d后除空白對照組外其余各組均腹腔注射0.5%CCl4油溶劑0.1ml·10g-1(此即CCl4的給藥方式,為一次性給藥造成急性肝損)。禁食24h后摘眼球取血,靜置30min,3000r·min-1離心10min后分離血清,待測血清中AST及ALT含量。取肝組織,用生理鹽水洗去殘血并用濾紙濾干,剪成小塊。稱取100mg,加預(yù)冷生理鹽水0.9ml制成10%勻漿,待測肝組織SOD活性和MDA的含量。取肝大葉
6、相同部位的一小塊肝組織固定于10%福爾馬林,做病理切片檢查。2.2生化檢測分離得到的各組小鼠血清,按照試劑盒說明測定ALT和AST的活力。10%肝組織勻漿4℃3500r·min-1離心10min后取上清液,按照試劑盒說明測定SOD活性和MDA的含量。2.3形態(tài)學(xué)觀察所取小鼠肝組織用10%福爾馬林固定,制備肝組織切片,HE染色,普通光鏡下觀察肝組織病理結(jié)構(gòu)改變。2.4統(tǒng)計方法組間比較采用CochranCox近似t檢驗,數(shù)據(jù)用±s表示,P0.05為差異顯著,P0.01為差異極顯著。3結(jié)果3.1對血清中ALT和AST含量的影響CCl4模型組與空白對照組比較,血清ALT及AST均明顯增高
7、(P0.01)。與CCl4模型組比較,松花粉總黃酮高、中、低劑量組均可明顯降低肝損傷小鼠血清ALT及AST活力。表1松花粉總黃酮對小鼠急性肝損傷血清中ALT,AST活力的影響3.2對肝組織中MDA和SOD含量的影響CCl4模型組與空白對照組比較,肝組織中MDA含量明顯增高,SOD活性明顯降低(P0.01)。與CCl4模型組比較,松花粉總黃酮高、中劑量組均能明顯降低肝損傷小鼠肝組織中MDA含量并能增高SOD的活性。表2松花粉總黃酮對小鼠急性肝損傷肝組織中MDA含量、SOD活性的影響