關(guān)于呼吸道合胞病毒及其檢測的相關(guān)研究進(jìn)展

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1、關(guān)于呼吸道合胞病毒及其檢測的相關(guān)研宄進(jìn)展（安徽人口職業(yè)學(xué)院病理學(xué)教研室；安徽池州247099）【摘要】呼吸道合胞病毒是引起嬰幼兒呼吸道感染最常見的病毒病原體，患兒經(jīng)常會(huì)表現(xiàn)出咳嗽、鼻塞，較重者可岀現(xiàn)呼吸網(wǎng)難等癥狀。木文從該病毒的分子生物學(xué)特征、流行病學(xué)特點(diǎn)、臨床表現(xiàn)、預(yù)防和治療、臨床檢測方法這些方面進(jìn)行討論，以便掌握該病毒的特點(diǎn)。。【關(guān)鍵詞】呼吸道合胞病毒；檢測方法；呼吸道感染呼吸道合胞病毒（Respiratorysyncytialvirus,RSV））是一種單負(fù)鏈RNA病毒，屬肺炎病毒屬。RSV是呼吸道感染患兒的最常見的病毒病原體［1］。?；純航?jīng)常會(huì)表現(xiàn)出

2、咳嗽、鼻塞，較重者可岀現(xiàn)呼吸網(wǎng)難等癥狀。目前臨床上常用的檢測方法有病毒免疫熒光技術(shù)法、細(xì)胞分離培養(yǎng)法、堿性磷酸酶、抗堿性磷酸酶橋聯(lián)酶標(biāo)法、酶聯(lián)免疫檢測法、聚合酶鏈反應(yīng)等［2］。1分子生物學(xué)特點(diǎn)呼吸道合胞病毒顆粒與副流感病毒相似，都是RNA病毒［3］。對物理化學(xué)因素抵抗力較低，不耐熱，冰凍融化容易滅活。在細(xì)胞培養(yǎng)中，在胞漿內(nèi)繁殖，可形成特有的合胞體，具有特異性［4］。2流行病學(xué)特點(diǎn)合胞病毒是呼吸道感染常見的病原體，感染極廣，其感染途徑主要為呼吸道傳播,RSV在環(huán)境中的可以存活時(shí)間約6h多。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查，RSV流行有顯著的氣候及季節(jié)特征，在溫帶及亞熱帶地區(qū)，感

3、染發(fā)生在秋末、冬季或初春季；在熱帶則發(fā)生在雨季。在我們國家，RSV流行的常見季節(jié)發(fā)生在北方的冬春季節(jié)和南方的夏秋季。RSV引起的肺炎主要見于一歲以內(nèi)的嬰兒，其中2月齡嬰兒發(fā)病率較高［5］。3臨床表現(xiàn)特征該病毒感染多見于嬰幼兒。初期可見咳嗽、鼻堵塞。多數(shù)病例的熱程為4?10天?；純航?jīng)常會(huì)表現(xiàn)出咳嗽、鼻塞，較重者可出現(xiàn)呼吸閑難等癥狀［6］。Nakamura等發(fā)現(xiàn)患有神經(jīng)肌肉疾病患兒更易受RSV感染，表現(xiàn)出意識模糊、抽搐等急性RSV腦病癥狀，以及出現(xiàn)較嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，經(jīng)CT和磁共振成像掃描顯示彌漫性腦損傷。4預(yù)防與治療RSV主要經(jīng)空氣或直接接觸傳播，要保持個(gè)

4、人及環(huán)境衛(wèi)生，勤洗手，妥善處理U鼻排出的分泌物，嬰幼兒或抵抗力弱的人砬注意防護(hù)，避免和患者接觸，以防感染。因本病較輕，不需用較多的對癥療法及支持療法。對臨床表現(xiàn)較重的患者可用三氮唑核苻霧化吸入治療，也可用短期大劑量霧化治療合胞病毒感染，效果較好有效。5臨床與實(shí)驗(yàn)室檢測方法臨床上常用檢測方法有吋在無法明確病原體，常出現(xiàn)濫用抗生素、延誤病情等問題。0前主要采用以下方法檢測5.1病毒分離培養(yǎng)法該技術(shù)原理是將待測標(biāo)本接種于培養(yǎng)細(xì)胞上，是診斷病毒性疾病的金標(biāo)準(zhǔn)。培養(yǎng)病毒一般使用細(xì)胞，可用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、雞胚做病毒的培養(yǎng)。因RSV不耐熱和凍融，細(xì)胞培養(yǎng)條件苛刻，成本和技術(shù)要求

5、較高，II不易儲(chǔ)存及運(yùn)輸，因此該方法主要用于實(shí)驗(yàn)室檢測，而臨床應(yīng)用較局限。5.2免疫熒光技術(shù)免疫熒光技術(shù)是利用抗原與抗體特異性結(jié)合原理及特殊的熒光素標(biāo)記技術(shù),通過激光激發(fā)使熒光素發(fā)出熒光，在熒光顯微鏡觀察熒光的變化，對細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行分析的技術(shù)。RSV檢測物主要檢測呼吸道分泌物，采用的是熒光抗體檢測樣本中的抗原。細(xì)胞或組織中形成的抗原抗體復(fù)合物上含冇熒光素，利用觀察標(biāo)本，熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光，可以看見熒光所在的細(xì)胞或組織，從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位，以及利用定量技術(shù)測定含量。免疫熒光技術(shù)有些常見問題，背景過高，信號弱或無信號熒光，熒光強(qiáng)度

6、會(huì)隨時(shí)間的延長而逐漸消退,iL必須用熒光顯微鏡檢測，技術(shù)要求高，結(jié)果不易長期保存，由于這些缺點(diǎn)，在臨床普及上受到一定的限制。5.3堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶橋聯(lián)酶標(biāo)法堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶(APAAP)橋聯(lián)酶標(biāo)法是以APAAP復(fù)合物及橋聯(lián)二，抗替代了一般間接免疫酶技術(shù)中的酶標(biāo)抗體。由于呼吸道組織細(xì)胞中幾乎不存在堿性磷酸酶，因而比價(jià)適用于呼吸道鼻咽分泌物脫落細(xì)胞中RSV抗原。APAAP橋聯(lián)酶標(biāo)技術(shù)中使用的第一抗體RSV-McAb,具有高度的特異性，不需要熒光顯微鏡，操作簡單，可用于快速診斷RSV感染，有利于在推廣。5.4ELISA法酶聯(lián)免疫檢測(ELISA)可用于

7、檢測大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。對呼吸道感染患者做RSV-lgA、RSV-IgG定量RSV-Ag定性檢測，對檢測結(jié)果進(jìn)行分析?？稍诤艽蟪潭壬辖档图訇栃詥栴}。結(jié)果可靠，特異性強(qiáng)，可做為臨床快速診斷合胞病毒的主要方法。5.5聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法常用檢測RSV方法較敏感的是巢式PCR,是一種變異的聚合酶鏈反應(yīng)，使用兩對PCR引物擴(kuò)增完整的片段，該技術(shù)需做兩次PCR，操作較繁瑣，結(jié)果易出現(xiàn)假陽性。張其威等將定量檢測RSV技術(shù)和巢式PCR相結(jié)合，通過對呼吸道感染者的鼻腔分泌物，檢測RSV序列，可以明確RSV的感染。該方法可

8、以快速診斷RSV的感染，指導(dǎo)醫(yī)生針對性用藥。5.6檢