《抗人fcεriα 》word版

《《抗人fcεriα 》word版》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在應用文檔-天天文庫。

1、研究生優(yōu)秀畢業(yè)論文上海交通大學博士學位論文上海交通大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經注明引用的內容外，本論文不包含任何其他個人或集體己經發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者簽名：私寢，日期：沙岱年廠月7日萬方數據上海交通大學學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保

2、留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權上海交通大學可以將本學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密口，在一年解密后適用本授權書。本學位論文屬于，不保密窗。(請在以上方框內打“4’’)學位論文作者簽名：鶿暇指導教師簽名：日期：沙f5年，月寸E1日期：勘t陣廠月乎日萬方數據上海交通大學博士學位論文抗人FccRIaFab．聚合物膠束．雷公藤紅素誘導肥大細胞凋亡治療過敏性疾病摘要研究目的：構建偶

3、聯抗人FceRIotFab包裹雷公藤紅素的聚合物膠束(抗人Fce．RlctFab．聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物)，分析其對肥大細胞的靶向性、增殖抑制及促凋亡作用，探討其在過敏性哮喘小鼠體內的分布及對哮喘和被動皮膚過敏反應的抑制效果。研究方法：①采用薄膜水化法制備雷公藤紅素．聚合物膠束，EDC偶聯法構建抗人FceRItxFab．聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物，采用粒度分析儀、透射電子顯微鏡分別觀察膠束的粒徑和形態(tài)，反相．高效液相色譜法測定其包封率和載藥量。②體外以人外周血嗜堿性白血病細胞KU812(

4、表面高表達Fc8RI，靶細胞)和人未成熟肥大細胞HMC．1(表面幾乎不表達FceRI，非靶細胞)為研究對象，以香豆素6為探針，采用流式細胞儀和激光共聚焦顯微鏡檢測三聚物的靶向作用；CCK一8法測定細胞增殖抑制率，AnnexinV-FITC／PI雙標記合并流式細胞儀定量分析凋亡細胞比率，酶法和免疫印跡分別檢測凋亡分子caspase3活性和切割的PARP表達水平，分析三聚物對肥大細胞增殖抑制及凋亡作用。⑧以卵清蛋白免疫萬方數據上海交通大學博士學位論文BABL／c小鼠建立哮喘模型，以近紅外熒光素DiR

5、為探針，觀察三聚物在過敏性哮喘小鼠體內的分布及其對肺組織的靶向性；給予三聚物干預治療，ELISA法檢測血清OVA特異性IgE(OVA-slgE)和肺泡灌洗液(BALF)組胺的水平，采用Luminex技術測定BALF中Thl／Th2細胞因子的含量，計數BALF白細胞總數及嗜酸性粒細胞數，觀察肺組織炎癥情況，分析三聚物對過敏性哮喘的治療效果。此外，通過皮內注射IgE．DNP和尾靜脈注射DNP-HSA誘導小鼠被動皮膚過敏反應，給予三聚物干預治療，觀察伊文氏藍擴散程度，驗證三聚物對過敏反應的抑制作用。研

6、究結果：①制備了抗人FceRIotFab．聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物，包封率為98．9-t：3．3％，載藥量為22．8+1．O％，粒徑在93．43nm左右，分布均勻，呈短棒狀或橢圓狀。②流式細胞儀和激光共聚焦顯微鏡檢測結果顯示抗人FceRIotFab．聚合物膠束進入靶細胞的量顯著高于未偶聯抗體的膠束；細胞增殖和凋亡的結果表明抗人FceRIotFab-聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物作用組的肥大細胞抑制率、凋亡細胞比例、caspase3活性和切割的PARP水平均顯著高于單純的雷公藤紅素和雷公藤紅素．

7、聚合物膠束組。⑨體內研究結果表明，三聚物能促進藥物在過敏性哮喘小鼠的肺組織聚集，并有效地減少哮喘小鼠血清OVA-slgE、BALF組胺和Th2細胞因子(IL．4、IL．5、IL．13和TNF．僅)的合成，增加抗炎因子IL．10的分泌，降低BALF白細胞和嗜酸性粒細胞數量，減輕肺組織炎細胞浸萬方數據上海交通大學博士學位論文潤和黏液分泌：此外三聚物能有效減少伊文氏藍的滲出，降低血管通透性，減輕小鼠被動皮膚過敏反應。且三聚物的抗過敏效果明顯比單純的雷公藤紅素和雷公藤紅素．聚合物膠束組更強。研究結論：成

8、功構建了抗入FceRIaFab．聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物，該三聚物具有良好的表征和肥大細胞靶向性，能特異地抑制肥大細胞增殖、誘導其凋亡；在體內能促進藥物在過敏性哮喘小鼠肺部聚集，對小鼠過敏性哮喘和被動皮膚過敏反應具有明顯的抑制作用。這些結果提示抗人FceRIaFab-聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物具有治療過敏及肥大細胞相關疾病的潛在應用價值。關鍵詞：雷公藤紅素，聚合物膠束，抗人FceRIQ單抗Fab片段，肥大細胞，凋亡，過敏性疾病萬方數據上海交通大學博士學位論文TARGET玎呵GMASTCEL