《抗人fcεriα 》word版

《《抗人fcεriα 》word版》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。

1、研究生優(yōu)秀畢業(yè)論文上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：私寢，日期：沙岱年廠月7日萬方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保

2、留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于，不保密窗。(請在以上方框內(nèi)打“4’’)學(xué)位論文作者簽名：鶿暇指導(dǎo)教師簽名：日期：沙f5年，月寸E1日期：勘t陣廠月乎日萬方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文抗人FccRIaFab．聚合物膠束．雷公藤紅素誘導(dǎo)肥大細胞凋亡治療過敏性疾病摘要研究目的：構(gòu)建偶

3、聯(lián)抗人FceRIotFab包裹雷公藤紅素的聚合物膠束(抗人Fce．RlctFab．聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物)，分析其對肥大細胞的靶向性、增殖抑制及促凋亡作用，探討其在過敏性哮喘小鼠體內(nèi)的分布及對哮喘和被動皮膚過敏反應(yīng)的抑制效果。研究方法：①采用薄膜水化法制備雷公藤紅素．聚合物膠束，EDC偶聯(lián)法構(gòu)建抗人FceRItxFab．聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物，采用粒度分析儀、透射電子顯微鏡分別觀察膠束的粒徑和形態(tài)，反相．高效液相色譜法測定其包封率和載藥量。②體外以人外周血嗜堿性白血病細胞KU812(

4、表面高表達Fc8RI，靶細胞)和人未成熟肥大細胞HMC．1(表面幾乎不表達FceRI，非靶細胞)為研究對象，以香豆素6為探針，采用流式細胞儀和激光共聚焦顯微鏡檢測三聚物的靶向作用；CCK一8法測定細胞增殖抑制率，AnnexinV-FITC／PI雙標(biāo)記合并流式細胞儀定量分析凋亡細胞比率，酶法和免疫印跡分別檢測凋亡分子caspase3活性和切割的PARP表達水平，分析三聚物對肥大細胞增殖抑制及凋亡作用。⑧以卵清蛋白免疫萬方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文BABL／c小鼠建立哮喘模型，以近紅外熒光素DiR

5、為探針，觀察三聚物在過敏性哮喘小鼠體內(nèi)的分布及其對肺組織的靶向性；給予三聚物干預(yù)治療，ELISA法檢測血清OVA特異性IgE(OVA-slgE)和肺泡灌洗液(BALF)組胺的水平，采用Luminex技術(shù)測定BALF中Thl／Th2細胞因子的含量，計數(shù)BALF白細胞總數(shù)及嗜酸性粒細胞數(shù)，觀察肺組織炎癥情況，分析三聚物對過敏性哮喘的治療效果。此外，通過皮內(nèi)注射IgE．DNP和尾靜脈注射DNP-HSA誘導(dǎo)小鼠被動皮膚過敏反應(yīng)，給予三聚物干預(yù)治療，觀察伊文氏藍擴散程度，驗證三聚物對過敏反應(yīng)的抑制作用。研

6、究結(jié)果：①制備了抗人FceRIotFab．聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物，包封率為98．9-t：3．3％，載藥量為22．8+1．O％，粒徑在93．43nm左右，分布均勻，呈短棒狀或橢圓狀。②流式細胞儀和激光共聚焦顯微鏡檢測結(jié)果顯示抗人FceRIotFab．聚合物膠束進入靶細胞的量顯著高于未偶聯(lián)抗體的膠束；細胞增殖和凋亡的結(jié)果表明抗人FceRIotFab-聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物作用組的肥大細胞抑制率、凋亡細胞比例、caspase3活性和切割的PARP水平均顯著高于單純的雷公藤紅素和雷公藤紅素．

7、聚合物膠束組。⑨體內(nèi)研究結(jié)果表明，三聚物能促進藥物在過敏性哮喘小鼠的肺組織聚集，并有效地減少哮喘小鼠血清OVA-slgE、BALF組胺和Th2細胞因子(IL．4、IL．5、IL．13和TNF．僅)的合成，增加抗炎因子IL．10的分泌，降低BALF白細胞和嗜酸性粒細胞數(shù)量，減輕肺組織炎細胞浸萬方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文潤和黏液分泌：此外三聚物能有效減少伊文氏藍的滲出，降低血管通透性，減輕小鼠被動皮膚過敏反應(yīng)。且三聚物的抗過敏效果明顯比單純的雷公藤紅素和雷公藤紅素．聚合物膠束組更強。研究結(jié)論：成

8、功構(gòu)建了抗入FceRIaFab．聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物，該三聚物具有良好的表征和肥大細胞靶向性，能特異地抑制肥大細胞增殖、誘導(dǎo)其凋亡；在體內(nèi)能促進藥物在過敏性哮喘小鼠肺部聚集，對小鼠過敏性哮喘和被動皮膚過敏反應(yīng)具有明顯的抑制作用。這些結(jié)果提示抗人FceRIaFab-聚合物膠束．雷公藤紅素三聚物具有治療過敏及肥大細胞相關(guān)疾病的潛在應(yīng)用價值。關(guān)鍵詞：雷公藤紅素，聚合物膠束，抗人FceRIQ單抗Fab片段，肥大細胞，凋亡，過敏性疾病萬方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文TARGET玎呵GMASTCEL