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《新生24hsd乳鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、《中國圖書資料分類法》分類號單位代碼：10660R322.81學(xué)號：S090017貴陽醫(yī)學(xué)院2012屆碩士學(xué)位論文新生24hSD乳鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化研究生：李紅平導(dǎo)師：康朝勝副教授年級：2009級專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學(xué)2012年5月19日貴陽醫(yī)學(xué)院2012屆碩士研究生論文目錄摘要??????????????????????????2前言??????????????????????????3材料與方法????????????????????????5結(jié)果??????????????????????????
2、13討論??????????????????????????24結(jié)論??????????????????????????27參考文獻(xiàn)?????????????????????????28英文摘要?????????????????????????31致謝??????????????????????????32略縮詞表?????????????????????????34論文原創(chuàng)性說明??????????????????????35附：綜述?????????????????????????361貴陽醫(yī)學(xué)院2012屆碩士研究生論
3、文新生24hSD乳鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學(xué)研究生：李紅平導(dǎo)師：康朝勝副教授摘要目的：建立新生24h內(nèi)SD乳鼠海馬源性神經(jīng)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法，探討含或不含細(xì)胞因子的血清培養(yǎng)基誘導(dǎo)海馬神經(jīng)干細(xì)胞分化的情況。方法：（1）海馬神經(jīng)干細(xì)胞(hNSCs)分離、培養(yǎng)與鑒定；（2）①hNSCs的誘導(dǎo)分化并檢測神經(jīng)細(xì)胞特有的抗原標(biāo)志物檢測：分別檢測NSE/NF-200,GFAP,Galc的表達(dá)。②將hNSCs分為三組，按不同培養(yǎng)液誘導(dǎo)分化，三組均在同一條件下培養(yǎng)，3天后同時(shí)收集各組細(xì)胞的分化率，并測量各
4、組分化的神經(jīng)細(xì)胞胞體大小，以探索不同培養(yǎng)條件下對神經(jīng)細(xì)胞生長的影響。③電鏡下觀察hNSCs及誘導(dǎo)分化后的神經(jīng)細(xì)胞。（3）流式檢測hNSCs細(xì)胞周期。結(jié)果：（1）原代及傳代的神經(jīng)球nestin免疫熒光呈陽性表達(dá)。（2）①誘導(dǎo)分化后的神經(jīng)細(xì)胞NSE/NF-200、GFAP、Galc免疫熒光均成呈陽性表達(dá)。②不同條件下培養(yǎng)3天后hNSCs的分化率，分別為對照組：（5.28士2.09）%；實(shí)驗(yàn)組1：（87.01士5.43）%；實(shí)驗(yàn)組2：（83.54士6.32）%，實(shí)驗(yàn)1組和實(shí)驗(yàn)2組均能誘導(dǎo)hNSCs分化，其分化率比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
5、（P>0.05）。分化的神經(jīng)細(xì)胞在不同培養(yǎng)條件下生長情況無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。③電鏡下可觀察到hNSCs、神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞及少突膠質(zhì)細(xì)胞的微細(xì)結(jié)構(gòu)。（3）hNSCs細(xì)胞周期顯示細(xì)胞周期完整。結(jié)論：1.體外成功分離、培養(yǎng)并鑒定新生24h內(nèi)SD乳鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞。2.含或不含細(xì)胞因子（EGF、bFGF）的血清培養(yǎng)基均能誘導(dǎo)hNSCs的分化。3.電鏡下觀察到hNSCs及誘導(dǎo)后神經(jīng)細(xì)胞的微細(xì)結(jié)構(gòu)，說明所培養(yǎng)的細(xì)胞為海馬神經(jīng)干細(xì)胞。關(guān)鍵詞：海馬神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)分化免疫熒光化學(xué)電鏡2貴陽醫(yī)學(xué)院2012屆碩士研究生論文前言干細(xì)
6、胞生物學(xué)(Stemcellbiology)是研究干細(xì)胞的一門新學(xué)科，也是一種新技術(shù)和新產(chǎn)業(yè)，主要研究干細(xì)胞的各種生命現(xiàn)象、生物學(xué)特征，以及干細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)育、[1]分化等活動規(guī)律及應(yīng)用。大部分學(xué)者認(rèn)為:干細(xì)胞是指存在于胚胎直至成體內(nèi)具有增殖（Proliferation）、自我更新(Self-renewal)能力以及多向分化潛能的原始細(xì)胞。干細(xì)胞按其來源分類，可分為胚胎干細(xì)胞(Embryonicstemcells，ESCs)和成年組織干細(xì)胞(Adultprogenitorcells)；根據(jù)其分化潛能的大小可分為3類：①全能干
7、細(xì)胞(Totipotentstemcell),如受精卵；②多能干細(xì)胞(Pluripotentstemcell)，如神經(jīng)干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、表皮干細(xì)胞等；③單能干細(xì)胞(Unipotentstemcell)，也稱定向或?qū)Ｄ芨杉?xì)胞。無論是哪種干細(xì)胞，都具有兩個(gè)顯著的特征：首先是不斷增殖，自我更新；其次是在特定微環(huán)境下能分化為多種不同類型的細(xì)胞。[2]神經(jīng)干細(xì)胞(Neuralstemcells，NSCs)是一種多能干細(xì)胞，具有自我增殖、自[3]我更新，多潛能分化的能力，能分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞及少突膠質(zhì)細(xì)胞，能[4]提供大量腦
8、組織細(xì)胞的一類細(xì)胞總稱，被BonnamainV等認(rèn)為是一種理想的中樞神經(jīng)移植的供體或載體。在20世紀(jì)中葉以前，學(xué)者們普遍認(rèn)為成年哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)細(xì)胞，在出生后喪失分化能力，逐漸停止神經(jīng)分化。至20世紀(jì)90年代，隨著神經(jīng)科學(xué)的蓬勃發(fā)展，國內(nèi)外大量的研究證實(shí)，胚胎期和成年哺乳動物的神經(jīng)組[4]織
