基于ssr標記技術的越橘親緣關系分析及品種鑒定

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1、碩士學位論文基于SSR標記技術的越橘親緣關系分析及品種鑒定GeneticrelationshipanalysisandcultivaridentificationofblueberrybasedonSSRmarkers學號：21018016完成日期：星Q!壘生墨旦大連理工夫學DalianUniversityofTechnologylIRIIlllIlllIllUlltIIIIlY2590307大連理工大學學位論文獨創(chuàng)性聲明作者鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下進行研究工作所取得的成果。盡我所知，除文中已經注明引用內容和致謝的地方

2、外，本論文不包含其他個人或集體已經發(fā)表的研究成果，也不包含其他已申請學位或其他用途使用過的成果。與我一同工作的同志對本研究所做的貢獻均已在論文中做了明確的說明并表示了謝意。若有不實之處，本人愿意承擔相關法律責任。學位論文題目：基王苧墨旦疊運堇本數越插塞綞差丕金塹丞昌盤鑒定作者簽名：一蘭壘t三2紅卜一日期：互2篳年—L月j1L日大連理工大學碩士學位論文摘要本文建立了適用于越橘(Vacciniumspp．)品種鑒定及親緣關系分析的SSR-PCR技術體系，用SSR標記技術對22種越橘栽培品種進行了遺傳差異及親緣關系分析，建立了一套完善的越橘品種鑒定

3、體系，為越橘種質資源的評價、鑒定、管理及越橘新品種的培育奠定了基礎。建立的SSR．PCR反應程序為：94℃預變性4min；94℃40s，55-64℃(根據引物而定)40s，72℃40s，35個循環(huán)；72。C延伸8min。優(yōu)化的SSR-PCR反應體系為：20此體系，Taq酶1，5U，M92+2．Onmol／此，dNTP0．25nmol／IsL，上下游引物各0．25pmol／laL，DNA模板40rig。篩選出15對擴增條帶清晰、多態(tài)性高、重復性好的引物。每對引物獲得多態(tài)性條帶3～13條，22個品種共獲得115條帶，其中113條為多態(tài)性條帶，多態(tài)

4、性比率為98．26％。22個品種的遺傳相似性系數居于0．486-4)．886之間，其中奴伊(Nui)和布魯瑞卡(Bluereka)遺傳相似性系數最大；澤西(Jersey)和美登(Blomidon)遺傳相似性系數最小。使用NTSYSpc(2．10e)根據非加權組平均法(UPGMA)繪制了22個越橘品種的遺傳關系聚類圖。聚類結果顯示，供試越橘品種被分為2個大類，美登(Blomidon)被單獨聚為一類，其余的21個品種被聚為一類，此21個品種又聚為2個亞類，其中晚熟品種迪克西(Dixi)和埃利奧特(Elliot)聚在一起，另外19個中早熟品種聚在一

5、起。說明SSR聚類結果與越橘品種遺傳關系及表型特征相符?？梢杂糜谥笇г介匐s交育種的親本選配。實驗篩選出了可用于22個越橘品種鑒定的SSR核心引物NA961和NAl040，核心引物組合能夠完全區(qū)分22個越橘品種。用核心引物制作了參照分子量標記，構建了22個越橘品種的指紋圖譜，建立了一套完整的越橘品種鑒定體系。實踐驗證SSR標記用于藍莓品種鑒別的方法可行、結果可靠。關鍵詞：越橘；SSR；親緣關系分析；指紋圖譜；品種鑒定基于SSR標記技術的越橘親緣關系分析及品種鑒定Geneticrelationshipanalysisandcultivariden

6、tificationofblueberrybasedonSSRmarkersAbstractInthisstudy，aSSR—PCRprotocolservingforblueberry(Vacciniumspp．)geneticrelationshipanalysisandcultivaridenfificationwasestablished．Geneticrelationshipof22blueberrycultivarsWasanalyzedusingSSR(SimpleSequenceRepeat)markers．Ablueberr

7、ycultivaridentificationprotocolwasestablished．T11iSapproachwouldbenefitforblueberrygermplasmevaluation,identificationandmanagementaswellasnovelvarietybreeding．nleestablishedSSR．PCRprotocolforblueberryWaSasfollows：initialdenaturationat94℃for4rain；(denaturationat94℃for40s，ann

8、ealingattheoptimumannealingtemperatureoftheprimerpairfor40s，elongationat72℃for40s)